馮亞杰，王二耀，吳 姣，施巧婷，辛?xí)粤?，楚秋霞，徐照學(xué)

(1.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)院，河南 鄭州 450002;2.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，河南 鄭州 450002)

獲得大量、優(yōu)質(zhì)的卵母細(xì)胞，是開(kāi)展胚胎工程各項(xiàng)研究的前提條件。目前在超數(shù)排卵技術(shù)日臻成熟的情況下，如何提高個(gè)體的排卵率非常重要。促排卵3號(hào)作為促黃體素釋放激素的類似物，在動(dòng)物繁殖中應(yīng)用廣泛。它作用于腦垂體，刺激促黃體生成素和促卵泡刺激素的分泌，提高受胎率和產(chǎn)仔數(shù)。為了驗(yàn)證其不同劑量在小尾寒羊超排中對(duì)排卵率的影響，我們進(jìn)行了促排卵3號(hào)應(yīng)用效果試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

1～3歲的小尾寒羊，膘情中等，體格健康，繁殖機(jī)能正常，圈舍飼養(yǎng)。試驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源于河南省焦作市。

1.2 超排藥物

陰道埋植栓(新西蘭生產(chǎn));國(guó)產(chǎn)卵泡刺激素(中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所生產(chǎn)，規(guī)格10 mg/瓶);前列腺素D-PG(上海計(jì)劃生育研究所生產(chǎn)，規(guī)格0.15 mg/支);促排3號(hào)(寧波激素廠，規(guī)格25 μg/支);速眠新合劑(長(zhǎng)春軍需大學(xué)獸醫(yī)研究所，規(guī)格1.5 mL/支)。

1.3 處理方法

埋置陰道栓的當(dāng)天記為0 d，第10天遞減注射促卵泡素共6次(總劑量6 mg)，第5次注射促卵泡素的同時(shí)，撤出陰道栓并注射前列腺素0.15 mg。第1組發(fā)情開(kāi)始時(shí)肌注促排3 號(hào)25 μg，第2 組注射促排3 號(hào)50 μg，對(duì)照組不注射促排3號(hào)。在發(fā)情后27～32 h進(jìn)行輸卵管采卵手術(shù)。供體手術(shù)前停食停水24 h。手術(shù)部位選在腹中線旁切口，在一側(cè)乳房基部稍前方于腹白線旁2 cm處，由后向前切開(kāi)6 cm左右的切口。在切開(kāi)腹膜前，要徹底止血以防血液進(jìn)入腹腔，引起腹內(nèi)臟器尤其是子宮的粘連。用食指和中指尋找及顯露子宮、輸卵管及卵巢，記錄卵巢狀況及排卵點(diǎn)情況，采用輸卵管上行沖洗法收集卵母細(xì)胞。觀察記錄所得卵子的形態(tài)。沖卵結(jié)束后按常規(guī)外科手術(shù)方法處理傷口。

2 結(jié)果

第1組共獲得紅體56個(gè)，獲得卵33個(gè)，排卵率為58.92%。第2組共獲得紅體52個(gè)，獲得卵48個(gè)，排卵率為92.3%。對(duì)照組共獲得紅體48個(gè)，獲得卵18個(gè)，排卵率為37.5%。第2組的排卵率比第1組提高了33.38%，比對(duì)照組提高了54.8%。

3 討論

LH可促使孕激素分泌增多，后者促使卵巢合成多種酶使卵泡壁溶解破裂，引起排卵。因此，排卵機(jī)制和LH密切相關(guān)。當(dāng)優(yōu)勢(shì)卵泡成熟時(shí)會(huì)刺激垂體釋放LH，使其破裂排卵，因此排卵前LH峰值和排卵率有密切的關(guān)系。Krishe[1]報(bào)道，對(duì)山羊注射促性腺激素釋放激素后的排卵數(shù)明顯高于未注射的，而且卵泡數(shù)比未注射的少。仲躋峰[2]報(bào)道，對(duì)超排的蒙古羊在發(fā)情后注射促性腺激素釋放激素后的未排卵泡數(shù)明顯減少，同時(shí)總獲卵數(shù)也有升高。本次試驗(yàn)中也得到相似的結(jié)果。但有資料報(bào)道，綿羊垂體LH的含量較高，供體發(fā)情后內(nèi)源性LH足以誘導(dǎo)大多數(shù)卵泡排出[3]。而本次試驗(yàn)在小尾寒羊發(fā)情后注射50 μg促排卵3號(hào)，排卵率達(dá)到92.3%，遠(yuǎn)高于對(duì)照組37.5%的排卵率。分析其原因，一方面可能是由于超排后卵巢上具備排卵能力的卵泡數(shù)量較多，內(nèi)源性促性腺激素引發(fā)排卵的能力不足，而促排卵3號(hào)所誘導(dǎo)的LH則能彌補(bǔ)其不足，促使具備排卵能力的卵泡成熟排卵，從而提高排卵率[4，5]。一方面可能是個(gè)體差異造成的，對(duì)于某些自身LH分泌量不足和LH峰值與排卵時(shí)間相對(duì)異常的個(gè)體，促排卵3號(hào)所誘導(dǎo)的LH則能有效彌補(bǔ)其不足。因此，只要注射促排卵3號(hào)的時(shí)間、劑量得當(dāng)，對(duì)提高小尾寒羊超排后排卵率是有益的。

[1] Krisher R L，Gwazdauskas F C，Page R L，et al.O-vulation rate，zygote recovery and follicular populations in FSH-superovulated goats treated with PGF2α and/or GnRH [J].Theriogenology，1994，41(2):491-498

[2] 仲躋峰.使用GnRH類似物對(duì)蒙古羊超排及孕酮、雌二醇、LH和FSH分泌的影響 [J].草食家畜，1992，(增刊):58

[3] 王光亞，段恩奎.山羊胚胎工程 [M].陜西.楊陵:天則出版社，1993.5

[4] Adams N R，Atk insow S，Martin G B，et al.Frequent block sampling changes the plasma concentration of LH and FSH and the ovulation rate in Mermo ewes[J].Reprod Fertil，1993，99:689-694

[5] Docchio M J，Sudha C，Jillell S D，et al.Close synchrony of ovulation in super stimulater heifers that have a down regulated anterior pituitary gland and are induced to ovulate with exogenous LH[J].Theriogenology，1998，49:637-644.