賈彩虹，劉培賢，李小麗

(1.山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院，山西 太原 030001;2.陽(yáng)曲縣人民醫(yī)院，山西 太原 030100)

對(duì)擬輸血或備血患者進(jìn)行鹽水介質(zhì)加抗人球蛋白介質(zhì)交叉配血，在交叉配血時(shí)經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)凝集，導(dǎo)致配血困難，對(duì)出現(xiàn)凝集的結(jié)果做出及時(shí)、正確的分析和處理，有利于臨床輸血安全?，F(xiàn)對(duì)山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院輸血科2012 年8 月至2012 年11 月交叉配血中出現(xiàn)凝集的67 例標(biāo)本分析如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 戴安娜專(zhuān)用離心機(jī)

1.1.2 試劑 微柱凝膠卡(戴安娜公司);抗體篩查細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);抗A、抗B血型定型試劑為單克隆試劑(北京金豪制藥股份有限公司);人紅細(xì)胞反定型試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司);所有試劑均檢定合格且在有效期內(nèi)使用。1.1.3 病例來(lái)源 資料均為山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院輸血科2012 年8 月至2012 年11 月擬輸血或備血患者中交叉配血出現(xiàn)凝集的病例。

1.2 方法

抗人球蛋白介質(zhì)采用微柱凝膠法(MGT)。MGT交叉配血試驗(yàn)和抗體篩查試驗(yàn)嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作。

1.2.1 交叉配血凝集標(biāo)本的處理 主側(cè)凝集的標(biāo)本首先復(fù)查血型，做不規(guī)則抗體篩查;次側(cè)凝集的標(biāo)本做紅細(xì)胞直接抗球蛋白試驗(yàn)。將所配獻(xiàn)血員血清進(jìn)行抗體篩查和鑒定等。

1.2.2 復(fù)查血型采用試管法 正反定型，至少包括6支試管(抗A、抗B、Ac、Bc、Oc、自身對(duì)照)，對(duì)有凝集者鏡下觀察凝集狀態(tài)，呈緡錢(qián)狀凝集的為蛋白凝集，為非抗原抗體特異性凝集。

1.2.3 直接抗球蛋白試驗(yàn)和血型鑒定 按照《免疫血液學(xué)》［1］中制定的方法進(jìn)行。

1.2.4 乙醚放散試驗(yàn) 取經(jīng)洗滌3 次的受檢者壓積紅細(xì)胞1 份加生理鹽水1 份、乙醚2 份，劇烈振蕩1 ～2 min，然后以3 400 轉(zhuǎn)/min 1 000 g離心2 min。離心后分成3 層，上層是乙醚，中層是紅細(xì)胞基質(zhì)，下層是具有抗體的釋放液，呈深紅色。用吸管吸出底層釋放液，置37 ℃水浴10 min(或56 ℃1 min)，除盡乙醚，再3 400 轉(zhuǎn)/min 1 000 g 離心1 min，取上清液即為釋放液。用相應(yīng)細(xì)胞和抗人球方法檢測(cè)放散液中的抗體。

2 結(jié)果

2.1 主側(cè)凝集

交叉配血主側(cè)凝集的標(biāo)本11 例，其中檢出不規(guī)則抗體7 例(抗M 2 例，抗E 1 例，抗Ec 1 例，未確定特異性2 例，紅細(xì)胞亞型產(chǎn)生不規(guī)則抗體導(dǎo)致凝集1例)，自身免疫性疾病導(dǎo)致的自身抗體1 例，蛋白凝集3 例。

2.2 次側(cè)凝集

交叉配血次側(cè)凝集的標(biāo)本57 例，其中直接抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性56 例(其中1 例為自身免疫性溶血性貧血導(dǎo)致主側(cè)凝集，直接抗人球蛋白試驗(yàn)也呈陽(yáng)性)，獻(xiàn)血員檢出不規(guī)則抗體1 例。直接抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性致交叉配血次側(cè)凝集的56 例標(biāo)本，其中血液科35 例，腎內(nèi)科4 例，腫瘤生物科4 例，骨科2 例，普外科2 例，風(fēng)濕科2 例，消化科1 例，呼吸科2 例，泌尿外科1 例，心內(nèi)科1 例，血管乳腺科2 例。

67 例在輸血時(shí)經(jīng)過(guò)配合性輸注所需紅細(xì)胞制品均未出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)。

3 討論

引起交叉配血主側(cè)凝集的主要原因是患者血清中存在不規(guī)則抗體。不規(guī)則抗體是人們?cè)谂R床實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)除抗A 和抗B 之外，其他紅細(xì)胞血型抗體的存在與否沒(méi)有規(guī)則可循，因此稱(chēng)為不規(guī)則抗體。而ABO 系統(tǒng)中的亞型、變異型中的抗A1或某種抗B 等抗體，也稱(chēng)為不規(guī)則抗體。在臨床輸血時(shí)如確定了抗體的特異性，選擇相對(duì)應(yīng)抗原特異性相同的供者做交叉配血試驗(yàn);如無(wú)特異性則選擇ABO 和Rh 抗原同型的供者做交叉配血試驗(yàn);蛋白凝集常見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、霍奇金病等，如為蛋白凝集，配血時(shí)則在患者血清中加等量的生理鹽水即可去除干擾;對(duì)ABO 血型系統(tǒng)存在不規(guī)則抗體或進(jìn)行骨髓移植后輸血，要避開(kāi)相應(yīng)抗體進(jìn)行輸血或輸注O 型洗滌紅細(xì)胞。

引起交叉配血次側(cè)凝集的主要原因是直接抗球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性。直接抗球蛋白試驗(yàn)(DAT)是一種鑒定紅細(xì)胞是否在體內(nèi)被免疫球蛋白及補(bǔ)體致敏的簡(jiǎn)便方法。造成DAT 試驗(yàn)陽(yáng)性的原因有很多，包括自身抗體與固有的紅細(xì)胞抗原反應(yīng)、溶血性輸血反應(yīng)、胎兒和新生兒溶血、藥物誘發(fā)的抗體、供者血漿和免疫球蛋白被動(dòng)獲得的抗體、非特定吸附的蛋白、細(xì)菌感染及自身或同種抗體導(dǎo)致的補(bǔ)體活化等。對(duì)于直接抗球蛋白試驗(yàn)(DAT)≥1 +的患者標(biāo)本應(yīng)該做乙醚放散試驗(yàn)確定紅細(xì)胞表面致敏抗體或補(bǔ)體的種類(lèi)，包括自身抗體、同種抗體、類(lèi)抗體或藥物抗體等。研究統(tǒng)計(jì)顯示，次側(cè)凝集主要發(fā)生在血液病和腫瘤、免疫性疾病、腎臟疾病、肝膽疾病等，這可能與原發(fā)病引起機(jī)體免疫功能改變，進(jìn)而激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生自身抗體有關(guān)。

在臨床輸血時(shí)，如為自身抗體引起的自身免疫性溶血性貧血，不建議輸血，在Hb ＜40 g/L時(shí)，可輸少量的洗滌紅細(xì)胞;如確定了同種抗體或類(lèi)抗體的特異性，選擇相對(duì)應(yīng)抗原特異性相同的供者做交叉配血試驗(yàn);如無(wú)特異性則選擇ABO 和CcDEe 抗原以及MN 抗原匹配的紅細(xì)胞輸注，以省略復(fù)雜的自身吸收等操作，節(jié)省時(shí)間，使患者得到及時(shí)有效的治療［2］;獻(xiàn)血員一般都會(huì)經(jīng)過(guò)問(wèn)詢(xún)篩選，但在出現(xiàn)次側(cè)凝集找不到原因的情況下也要考慮獻(xiàn)血者的抗體情況。本組病例就出現(xiàn)了1 例因獻(xiàn)血員抗C 引起的凝集。

另外因IgG 或補(bǔ)體水平上升而導(dǎo)致的DAT 試驗(yàn)陽(yáng)性的情況，與貧血無(wú)關(guān)，通常會(huì)發(fā)生在患有鐮狀細(xì)胞疾病、地中海貧血、腎臟疾病、多發(fā)性骨髓瘤、自身免疫紊亂以及其他伴有血清球蛋白或血尿素氮水平升高疾病患者的紅細(xì)胞上等。

因此，對(duì)于交叉配血不合的標(biāo)本，要從患者和獻(xiàn)血員兩方面考慮。對(duì)于DAT 陽(yáng)性的解釋還應(yīng)考慮到患者的病史，臨床數(shù)據(jù)以及其他實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果。遇到直抗陽(yáng)性的標(biāo)本，不能簡(jiǎn)單的認(rèn)為是自身抗體導(dǎo)致，要結(jié)合患者既往病史、輸血史、妊娠史認(rèn)真分析，尤其是近期有輸血史的患者，可能存在輸血反應(yīng)，避免輸入不相合的血液，從而保證輸血安全。

［1］ 劉達(dá)莊. 主編. 免疫血液學(xué)［M］. 上海:上海科技技術(shù)出版社，2002.

［2］ 向 東，劉 曦，王健蓮，等. 紅細(xì)胞溫自身抗體的血清學(xué)特點(diǎn)分析及配血對(duì)策［J］.中國(guó)輸血雜志，2008，21(12):924-926.