謝麗曲 詹湉湉 陳婉如 王長(zhǎng)康 林麗花 曾興有

（1.福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 福州 350002；2.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013；3.福建省華龍集團(tuán)飼料有限公司 福州 350003）

飼用抗生素由于其具有防病促生長(zhǎng)作用，在畜禽生產(chǎn)中得到了廣泛應(yīng)用，但若濫用將對(duì)環(huán)境和食品安全帶來(lái)危害。因此，尋找抗生素替代品，減少或取消抗生素在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用已成為迫在眉睫的問(wèn)題。益生素具備無(wú)耐藥性、無(wú)殘留、無(wú)毒副作用和抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)在眾多飼料添加劑中脫穎而出，成為較為理想的抗生素代替品，它的發(fā)現(xiàn)與應(yīng)用在一定程度上解決了抗生素殘留和動(dòng)物耐藥性等問(wèn)題。

凝結(jié)芽孢桿菌作為有孢子性乳酸菌，具有調(diào)節(jié)動(dòng)物腸道功能紊亂、維持腸道的菌群平衡、提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能和機(jī)體免疫力等作用，因此，凝結(jié)芽孢桿菌作為飼料添加劑受到廣泛關(guān)注。前人研究，凝結(jié)芽孢桿菌能夠抑制大腸埃希氏菌、沙門氏菌等常見(jiàn)腸道致病菌［1］，促進(jìn)尖吻鱸生長(zhǎng)［2］，提高廣西黃雞的飼料轉(zhuǎn)化率、日增重和存活率，且改善其肉質(zhì)［3］。目前凝結(jié)芽孢桿菌在肉鴨上的應(yīng)用研究報(bào)道較少，本研究通過(guò)在櫻桃谷肉鴨飼糧中添加不同水平的凝結(jié)芽孢桿菌制劑，以探討其對(duì)櫻桃谷肉鴨生長(zhǎng)性能、血清抗氧化指標(biāo)、免疫器官指數(shù)的影響，為凝結(jié)芽孢桿菌在櫻桃谷肉鴨配合飼料中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料與動(dòng)物 試驗(yàn)用凝結(jié)芽孢桿菌制劑（活菌含量為1×109cfu/g）由福建洛東生物技術(shù)有限公司提供。試驗(yàn)用1日齡櫻桃谷公鴨，由漳州昌龍農(nóng)牧有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 選取體質(zhì)健康、體重中等的1日齡櫻桃谷公鴨750 羽，隨機(jī)分為5 組，每組5個(gè)重復(fù)，每重復(fù)30 羽。Ⅰ組為空白對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)飼糧；Ⅱ組為抗生素對(duì)照組，在基礎(chǔ)飼糧中添加30 mg/kg 桿菌肽鋅；Ⅲ～Ⅴ組為試驗(yàn)組，在基礎(chǔ)飼糧中分別添加100 mg/kg、200 mg/kg、300 mg/kg的凝結(jié)芽孢桿菌制劑，試驗(yàn)期21 d。基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)在漳州昌龍農(nóng)牧有限公司進(jìn)行。采用網(wǎng)上平養(yǎng)，24 h 光照，第1 周控溫30 ℃，以后每周下降2 ℃，直至與環(huán)境溫度一致。每天喂料1 次，自由采食和飲水，每3 d 刮糞1 次，每周進(jìn)行1 次帶鴨消毒。鴨群按常規(guī)免疫程序免疫。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)測(cè)定 飼養(yǎng)期間記錄每日采食量，于1日齡和21日齡以重復(fù)為單位空腹稱重，計(jì)算平均日采食量、平均日增重和料重比（日采食量/日增重）；每天記錄鴨存欄數(shù)及死淘數(shù)，計(jì)算成活率（成活率/%=鴨存欄數(shù)/飼養(yǎng)鴨數(shù)×100）。

1.4.2 血清抗氧化指標(biāo)測(cè)定 于21日齡，每重復(fù)組隨機(jī)抽取2 羽體質(zhì)健康、體重中等的櫻桃谷肉鴨，用真空采血管翅靜脈采血10 mL，轉(zhuǎn)移到離心管中，靜置3 min 后，3 000 r/min 離心10 min 分離血清，做好標(biāo)記并于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

選用谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-PX）、總超氧化物歧化酶（total superoxide dismutase，T-SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）作為血清抗氧化指標(biāo)，用Microlab300 半自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，試劑盒均購(gòu)自上海榮盛生物技術(shù)有限公司。

1.4.3 免疫器官指數(shù)測(cè)定 對(duì)采血后的鴨只進(jìn)行屠宰（采血前稱活體重），摘取胸腺、脾臟和法氏囊，用濾紙吸去其表面血液，用手術(shù)刀片剝離脂肪，稱重，測(cè)定免疫器官指數(shù)。免疫器官（胸腺、脾臟、法氏囊）指數(shù)=免疫器官重（mg）/活體重（g）。

1.5 數(shù)據(jù)處理 數(shù)據(jù)采用spss13.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著后進(jìn)行LSD 多重比較，以P＜0.01（差異極顯著），P＜0.05（差異顯著）作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨生長(zhǎng)性能的影響 由表2 可知，與Ⅰ組相比，試驗(yàn)組櫻桃谷肉鴨平均日采食量均有所降低，而平均日增重分別提高了0.39%（P＞0.05）、0.39%（P＞0.05）和1.18%（P＞0.05），與Ⅱ組相比差異均不顯著；料重比，試驗(yàn)組較Ⅰ組分別顯著（P＜0.05） 降低了1.25%、1.88%和2.5%，其他各組之間差異均不顯著（P＞0.05）；各組之間的成活率沒(méi)有顯著性差異（P＞0.05）。

表2 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨生長(zhǎng)性能的影響

2.2 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨血清抗氧化指標(biāo)的影響 由表3 可知，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組與Ⅰ組相比，櫻桃谷肉鴨血清谷胱甘肽過(guò)氧化物酶分別提高了1.96%（P＞0.05）、1.64%（P＞0.05）和6.53%（P＜0.05）；其他各組間差異不顯著（P＞0.05）。Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組的血清總超氧化物歧化酶較Ⅰ組有不同程度的提高，其中Ⅴ組提高了3.62%，但差異均不顯著（P＞0.05）。各組間血清丙二醛含量差異不顯著，但試驗(yàn)組均低于對(duì)照組。

表3 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.3 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨免疫器官指數(shù)的影響 由表4 可知，與Ⅰ組相比，Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ組胸腺指數(shù)均有所提高，其中Ⅴ組較Ⅰ組顯著提高26.67%（P＜0.05）、較Ⅲ組顯著提高26.02%（P＜0.05），其他各組間差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)組脾臟指數(shù)較空白對(duì)照組呈上升趨勢(shì)。Ⅴ組法氏囊指數(shù)較Ⅰ組和Ⅱ均顯著提高6.37%（P＜0.05）。

表4 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨免疫器官指數(shù)的影響

3 討論

3.1 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨生長(zhǎng)性能的影響 眾多研究表明凝結(jié)芽孢桿菌能產(chǎn)生多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)供動(dòng)物機(jī)體吸收利用，如維生素、短鏈脂肪酸、氨基酸、促生長(zhǎng)因子等，它們不僅可參與動(dòng)物機(jī)體的新陳代謝，還能促進(jìn)小腸蠕動(dòng)，改善腸道功能，從而促進(jìn)機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收［4-5］。試驗(yàn)表明，在櫻桃谷肉鴨飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌制劑能有效提高肉鴨的生長(zhǎng)性能，降低其料重比，提高經(jīng)濟(jì)效益。MARK等［6］通過(guò)研究證明，凝結(jié)芽孢桿菌在50 ℃、pH為5.0的條件下能利用戊糖-磷酸鹽途徑有效地發(fā)酵分解木質(zhì)素等。李國(guó)建等［7］研究表明，生長(zhǎng)肥育豬飼料中添加凝結(jié)芽孢桿菌制劑可顯著提高豬的平均日增重，降低飼料成本?；糗姷龋?］研究也表明，在生長(zhǎng)育肥豬飼料中添加凝結(jié)芽孢桿菌制劑可以顯著提高平均日增重，降低飼料成本和沙門氏菌陽(yáng)性率，飼養(yǎng)效果與喹乙醇沒(méi)有差異。王彥波等［9］在羅非魚中的研究也證明了這一觀點(diǎn)。ALEX等［10］為評(píng)估凝結(jié)芽孢桿菌ATCC7050 對(duì)肉用仔雞生產(chǎn)性能、腸道組織結(jié)構(gòu)及微生物菌群的影響，采用600 羽1日齡肉用仔雞隨機(jī)分成5個(gè)處理組，每個(gè)處理四個(gè)重復(fù)，試驗(yàn)期42 d，結(jié)果表明，凝結(jié)芽孢桿菌ATCC7050 能提高肉用仔雞的飼料轉(zhuǎn)化率。這些研究結(jié)果與本研究結(jié)果一致。

3.2 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨血清抗氧化指標(biāo)的影響 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-PX）是一種重要的催化過(guò)氧化氫分解的酶，廣泛存在于機(jī)體內(nèi)，它能特異催化還原型谷胱甘肽（GSH）與過(guò)氧化氫反應(yīng)，清除體內(nèi)有毒有害物質(zhì)，起到保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能完整的作用。超氧化物歧化酶（SOD）是機(jī)體內(nèi)重要的氧化還原酶，是清除體內(nèi)有毒氧自由基（O2-）的關(guān)鍵性酶，起到保護(hù)細(xì)胞免受損傷的作用。丙二醛（MDA）是多不飽和脂肪酸過(guò)氧化的終末代謝產(chǎn)物，其含量反映氧自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化程度。本試驗(yàn)中，與空白對(duì)照組相比，試驗(yàn)組通過(guò)飼喂凝結(jié)芽孢桿菌能明顯提高血清中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和總超氧化物歧化酶的活性，降低血清中丙二醛的含量，從而提高機(jī)體的抗氧化能力和免疫能力。

3.3 凝結(jié)芽孢桿菌對(duì)1～21日齡櫻桃谷肉鴨免疫器官指數(shù)的影響 胸腺、脾臟和法氏囊是動(dòng)物重要的免疫器官，是血液T 細(xì)胞和B 細(xì)胞的來(lái)源，參與細(xì)胞免疫、體液免疫及對(duì)抗原刺激進(jìn)行免疫反應(yīng)等。免疫器官指數(shù)的提高在一定程度上反映機(jī)體免疫功能的增強(qiáng)。眾多研究表明，益生菌有提高機(jī)體免疫功能的作用［11-13］。本試驗(yàn)在櫻桃谷肉鴨飼糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌制劑，與空白對(duì)照組相比，試驗(yàn)組胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)均有不同程度的提高，可能是凝結(jié)芽孢桿菌在消化道的識(shí)別抗原部位發(fā)揮免疫佐劑的功能，使得相關(guān)淋巴組織處于較高免疫準(zhǔn)備狀態(tài)，從而加快免疫器官發(fā)育和免疫系統(tǒng)成熟［14］。與別的芽孢桿菌相似，凝結(jié)芽孢桿菌能夠分泌凝結(jié)素等抗菌物質(zhì)，穿透細(xì)胞膜，對(duì)鏈球菌、金黃色葡萄球菌等致病菌有拮抗作用，從而改善機(jī)體客觀生活環(huán)境，提高機(jī)體的抗病力，減少動(dòng)物疾病的發(fā)生［15］。

4 結(jié)論

在1～21日齡櫻桃谷肉鴨飼料中添加凝結(jié)芽孢桿菌制劑，可以提高其生長(zhǎng)性能、抗氧化能力和免疫功能，三個(gè)不同梯度添加量中以300 mg/kg 效果最佳。

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