李玉芹，江峰錦

（1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院檢驗科，成都 610072；2.重慶市渝北區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，重慶 401120）

網(wǎng)織紅細(xì)胞是晚幼紅細(xì)胞脫核后仍含有殘留RNA的紅細(xì)胞，用煌焦藍(lán)染色后，根據(jù)RNA含量的多少著色呈點狀及網(wǎng)狀。其傳統(tǒng)分型方法是在顯微鏡下進(jìn)行分類計數(shù)（計數(shù)1 000個紅細(xì)胞中的網(wǎng)織紅細(xì)胞），根據(jù)形態(tài)將其分為4型，此種方法費(fèi)時費(fèi)力，受人為因素的影響較大。隨著科學(xué)的不斷發(fā)展，自動化血液細(xì)胞分析儀器的廣泛使用，網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)也由全自動血細(xì)胞分析儀逐步代替手工操作，并將網(wǎng)織紅細(xì)胞精確分為高熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞（HFR）、中熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞（MFR）、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞（LFR）3部分。但影響血細(xì)胞分析儀計數(shù)的因素很多，除了儀器本身的精密度與準(zhǔn)確性、試劑質(zhì)量、操作者自身水平的高低、標(biāo)本采集等因素外，標(biāo)本采集后保存溫度及放置時間也是很重要的影響因素。為此，筆者對53例不同溫度下放置不同時間的靜脈血標(biāo)本測定其網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)，以了解時間和溫度對網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)測定的影響，現(xiàn)報告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

53例標(biāo)本來源于我院門診病人，標(biāo)本收集以EDTA－K2鹽抗凝真空管（BD公司生產(chǎn)）采集新鮮靜脈抗凝全血。

1.2 儀器和試劑

日本希森美康公司生產(chǎn)的Sysmex XE－2100全自動血細(xì)胞分析儀及其配套試劑；質(zhì)控品是Sysmex公司生產(chǎn)在線質(zhì)控物，分為高、中、低3個水平。

1.3 方法

1.3.1 Sysmex XE－2100血細(xì)胞分析儀各項參數(shù)均經(jīng)校準(zhǔn)，每天用Sysmex公司生產(chǎn)高、中、低3個水平的質(zhì)控品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控。

1.3.2 檢測 將靜脈血標(biāo)本采集后立即上機(jī)檢測（用手動方法，為保證結(jié)果的可靠性，減少人員操作誤差，所有實驗均由1人完成）網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)（此次計數(shù)為0h結(jié)果），然后將標(biāo)本均勻分成兩組（用未加抗凝劑的空白管），一組放室溫（24℃），另一組放冰箱（4℃），分別在2、4、6、8、10、12、24、48、72h測定網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，統(tǒng)計數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）形式表示，運(yùn)用配對t檢驗進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)計量分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 室溫（24℃）不同放置網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)測定結(jié)果

網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)在12h內(nèi)與即刻值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），12h之后與即刻值比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（見表1）。

2.2 冰箱（4℃）不同放置時間網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)測定結(jié)果

與即刻值進(jìn)行比較，網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率和HFR在72h內(nèi)差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），IRF、LFR、MFR值與即刻值比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）（見表2）。

表1 室溫（24℃）不同放置時間網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)測定結(jié)果

表2 冰箱（4℃）不同放置時間網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)測定結(jié)果

3 討論

網(wǎng)織紅細(xì)胞是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞，是反映骨髓造血功能的重要指標(biāo)。在貧血診斷、療效觀察、腫瘤化療及骨髓移植等方面都有重要的臨床價值［1－4］。

隨著檢驗技術(shù)的不斷發(fā)展，目前對網(wǎng)織紅細(xì)胞的檢測技術(shù)已由原先簡單傳統(tǒng)的手工計數(shù)法衍變成現(xiàn)在的血細(xì)胞分析儀檢測，不僅能更精確地計數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞的個數(shù)，還能將網(wǎng)織紅細(xì)胞精確地分為HFR、MFR及LFR 3部分，即“分群”。熒光越高，表示網(wǎng)織紅細(xì)胞含核酸越多，細(xì)胞也就越幼稚。IRF為MFR和HFR之和（MFR＋HFR），表示幼稚細(xì)胞占總Ret的百分比。而對骨髓移植和腫瘤化療病人主要是觀察網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)即“分群”的變化，特別是分析 HFR 或IRF的變化［5－8］.

網(wǎng)織紅細(xì)胞的發(fā)育是從晚幼紅細(xì)胞、HFR、MFR到LFR的動態(tài)變化過程。為探討標(biāo)本離體后溫度和時間對網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)的影響，我們進(jìn)行了上述試驗。從表1可以看出網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)在室溫（24℃）12h內(nèi)與即刻值比較無統(tǒng)計學(xué)差異，12h之后與即刻值比較均有統(tǒng)計學(xué)差異；從表2可以看出，4℃ 保存的標(biāo)本72h內(nèi)網(wǎng)織紅細(xì)胞百分率和HRF與即刻值比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，IRF、LFR、MFR值與即刻值比較24h內(nèi)差異無統(tǒng)計學(xué)意義，24h之后差異有統(tǒng)計學(xué)意義。從表1、表2的均值可以看出，在4℃和24℃條件下，IRF均呈降低趨勢，而LFR有升高趨勢，其結(jié)果與叢玉隆等［8］報道有一定差異，與白壵等［10］報道一致。在4℃時網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)在72h內(nèi)均值改變不明顯，而24℃時較明顯，對于這種現(xiàn)象，我們認(rèn)為可能是由于低溫條件下，Ret成熟較慢，RNA消失延遲；還有可能是標(biāo)本離體后，在較高溫度條件下越幼稚的網(wǎng)織紅細(xì)胞向成熟階段發(fā)育速度越快，而到了較成熟階段（LFR）發(fā)育速度有所減慢所致。

總之，為了保證檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床提供可靠的網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)結(jié)果，我們認(rèn)為在測定網(wǎng)織紅細(xì)胞及其參數(shù)時，標(biāo)本離體后在室溫12h、4℃24h內(nèi)應(yīng)完成檢測。

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