張麗瓊

（1.安康學(xué)院農(nóng)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，陜西，725000；2.安康學(xué)院農(nóng)業(yè)科技研發(fā)中心）

生防放線菌對油菜生長效應(yīng)的研究

張麗瓊1，2

（1.安康學(xué)院農(nóng)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院，陜西，725000；2.安康學(xué)院農(nóng)業(yè)科技研發(fā)中心）

為了研究生防放線菌與草木灰混合包衣油菜種子對油菜的生長效應(yīng)，為油菜的栽培及病害防治提供理論依據(jù)和指導(dǎo)，探討了不同濃度的生防放線菌對油菜種子出苗、幼苗株高、根長及葉綠素、維生素C含量的影響。試驗結(jié)果表明，生防放線菌能夠促進(jìn)油菜出苗，且菌劑濃度越高，出苗率越高；低濃度（2%和4%）生防放線菌制劑會抑制油菜幼苗的生長，而10%濃度的菌劑能促進(jìn)幼苗的生長；隨菌劑濃度的提高，油菜幼苗的光合作用能力、抗氧化能力逐漸增強。生防放線菌與草木灰包衣油菜種子時，不同濃度的菌劑對油菜的生長產(chǎn)生不同的效應(yīng)。因此在生產(chǎn)上應(yīng)用生防放線菌防治油菜土傳病害菌核病時，應(yīng)正確使用適宜的菌劑濃度，以免抑制油菜的生長。

油菜；生防放線菌；生長效應(yīng)

油菜(Brassica napusL.）屬于十字花科蕓薹屬（Brassica）油料作物，栽培面積在世界四大油料作物中居第二位[1]。我國油菜產(chǎn)量占世界第一。油菜用途很多，可用于制油，還可作精飼料和蜜源植物等。油菜菌核病是制約油菜種植與生產(chǎn)的決定性因素，因此控制菌核病的為害能夠提高油菜的經(jīng)濟效益。采用化學(xué)農(nóng)藥防治油菜菌核病的效果不佳，而且還存在環(huán)境污染、農(nóng)藥殘留等問題。近年來的研究表明，利用生防放線菌防治油菜菌核病效果較好，對環(huán)境不會造成污染，也沒有農(nóng)藥殘留[2，3]。但這些研究都集中于生防放線菌的防病效果及油菜菌核病的拮抗菌篩選上[2～5]，而對于如何正確使用生防放線菌，保證生防線菌在防病治病的同時又能促進(jìn)油菜的生長、提高油菜產(chǎn)量的研究較少。為此，從種子的處理入手，研究生防放線菌與草木灰按一定比例混合后包衣油菜種子對油菜植株生長和油菜品質(zhì)的影響，探討生防放線菌在油菜栽培中適宜的使用方法，為油菜栽培及菌核病防治提供理論依據(jù)和指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

栽培基質(zhì)為細(xì)沙∶土壤=1∶1；供試油菜種子為產(chǎn)自漢中的金油一號；生防放線菌制劑為植物枯萎病特效放線菌制劑 （攀枝花市茂園農(nóng)資有限責(zé)任公司），主要成分為密旋鏈霉菌（Streptomyces pactum）。

1.2 試驗方法

①試驗設(shè)計 試驗以純草木灰 （不含菌劑）為對照，設(shè)2%菌粉（生防放線菌∶草木灰=1∶49），4%菌粉（生防放線菌∶草木灰=1∶24），10%菌粉（生防放線菌∶草木灰=1∶9）3個菌劑處理。

②包衣 生防放線菌制劑與草木灰按設(shè)計比例混合（以下簡稱菌粉），挑選大小一致的油菜種子用水濕潤后以菌粉包衣。

③盆栽 包衣后的油菜種子播種于裝有基質(zhì)的花盆中，每盆播種10粒，20個重復(fù)，播后置于恒溫箱25℃培養(yǎng)，出苗后置于室內(nèi)培養(yǎng)，日常管理采用常規(guī)方法。

1.3 調(diào)查項目及方法

播種3 d后調(diào)查發(fā)芽率，分別于播種第6天、第9天、第12天隨機選取5盆測量所有油菜苗的株高及主根長，取平均值。播種后第12天隨機選取5盆，每株選取頂端的2片葉子測定葉綠素及維生素C含量，葉綠素含量采用乙醇比色法測定，維生素C含量采用磺胺比色法測定[6]。

分別對所測的生長指標(biāo)用下式求出各處理各項指標(biāo)的具體隸屬值，即 X （μ）=（X-Xmin）/（Xman-Xmin），式中，X為各處理的某一指標(biāo)測定值，Xmax為所有處理某一指標(biāo)測定值內(nèi)的最大值，Xmin為該指標(biāo)中的最小值。如果某一指標(biāo)與生長性為負(fù)相關(guān)，可用反隸屬函數(shù)計算其抗旱隸屬函數(shù)值，即X（μ）= 1-[（X-Xmin）/（Xmax-Xmin）]，把各處理的各項指標(biāo)具體隸屬值進(jìn)行累加，得加權(quán)值。

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)藝性狀表現(xiàn)

生防放線菌制劑能促進(jìn)油菜出苗，提高油菜發(fā)芽率（圖1），菌劑濃度越高，發(fā)芽率越高，10%菌粉的發(fā)芽率高達(dá)90%。菌劑對油菜幼苗根長及株高的影響趨勢是一致的（圖2、圖3），低濃度的菌劑（2%菌粉，4%菌粉）會抑制油菜幼苗根系及地上部分的生長，而高濃度（10%菌粉）的菌劑則有利于油菜幼苗的生長。因此，在利用菌粉包衣種子種植油菜時，應(yīng)適當(dāng)提高菌劑的濃度，否則會抑制幼苗的生長。

圖1 不同濃度菌粉處理的油菜發(fā)芽率

圖2 不同濃度菌粉處理的油菜根長

圖3 不同濃度菌粉處理的油菜株高

2.2 葉綠素及維生素C含量測定

葉綠素a含量的高低直接標(biāo)志著生長能力的強弱。由表1可知，低濃度菌劑（2%菌粉）處理下，油菜葉片的葉綠素a及葉綠素總含量與不含菌劑的草木灰處理間的差異不明顯，隨菌劑濃度的提高，葉綠素a含量及葉綠素總含量逐漸升高，說明在本試驗范圍內(nèi)，油菜種子包衣時菌劑濃度越高，油菜幼苗的光合作用能力越高，越能促進(jìn)油菜幼苗的生長。

維生素C能減輕氧化脅迫傷害[7，8]，因此，其含量的多少標(biāo)志著植物抗氧化能力的強弱。隨菌劑濃度的提高，維生素C的含量逐漸提高，說明使用生防放線菌包衣油菜種子能增強油菜幼苗的抗氧化能力，且菌劑濃度越高，越有利于油菜幼苗抗氧化能力的提高。

2.3 綜合評價

單憑某項指標(biāo)不能說明各處理對油菜的生長是否有促進(jìn)作用，本研究運用模糊數(shù)學(xué)中的隸屬函數(shù)方法對各處理的生長指標(biāo)進(jìn)行了綜合測評，測評的加權(quán)值愈大，表明油菜生長力越好[9]。測評結(jié)果（表2）表明，不同濃度的菌粉包衣油菜種子對油菜幼苗的出芽及生長有不同的效應(yīng)，低濃度的菌粉（2%菌粉）處理時，油菜葉片葉綠素含量較低，因而光合能力較差，對油菜幼苗的生長有一定的抑制作用，但隨菌劑濃度的提高，生防放線菌反而能促進(jìn)油菜幼苗的生長。

表1 生防放線菌菌對油菜葉片的生理生化效應(yīng)

3 結(jié)論與討論

油菜菌核病為土傳病害，傳統(tǒng)采用輪作結(jié)合使用大量化學(xué)制劑以達(dá)到控制病害的目的，對環(huán)境會造成一定的污染。本試驗采用生防放線菌防治，可克服油菜的連作障礙問題，且不會對環(huán)境造成污染，符合綠色、無公害農(nóng)產(chǎn)品發(fā)展的要求。放線菌能夠在土壤中長期生存且大量繁殖成為優(yōu)勢微生物，并產(chǎn)生抑制病原菌的抗生素[10]，在種植油菜的土壤中人為施用生防放線菌制劑，通過生防放線菌的大量繁殖及其產(chǎn)生的抗生素抑制油菜菌核病病原菌生長，使油菜根區(qū)微生物區(qū)系保持在正常狀態(tài)，進(jìn)而控制油菜菌核病的發(fā)生。但在防治油菜菌核病的同時，生防放線菌也會對油菜生長產(chǎn)生一定的影響，如果使用不當(dāng)，會抑制油菜的生長，從而影響油菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，造成經(jīng)濟損失。本研究結(jié)果表明，低濃度菌劑的菌粉包衣處理油菜種子對油菜幼苗的生長就有一定抑制作用，但高濃度菌劑的菌粉能促進(jìn)油菜幼苗的生長。

表2 生防放線菌對油菜的生長效應(yīng)的隸屬函數(shù)值

從油菜的農(nóng)藝性狀看，隨生防放線菌濃度的提高，油菜種子的出苗率隨之提高。這是因為生防放線菌產(chǎn)生的抗生素抑制了土壤基質(zhì)周圍有害物質(zhì)的生長，放線菌的大量繁殖使其他微生物的生存空間受到限制，為油菜種子的出芽提供了非常適宜的環(huán)境，而且隨著生防放線菌濃度的提高，其對種子的保護(hù)作用、對有害物質(zhì)的抑制作用也增加。

但生防放線菌制劑對油菜幼苗的根長和株高并不都起到了促進(jìn)作用，如本試驗中，在播種后的第6～12天，各處理的幼苗根長和株高均出現(xiàn)相同的生長趨勢，即10%菌粉處理>純草木灰處理>2%菌粉處理>4%菌粉處理，說明低濃度的菌劑包衣種子對油菜幼苗的生長有抑制作用，但具體的濃度范圍還有待進(jìn)一步的試驗探討，本試驗中以10%菌劑濃度的菌粉處理油菜種子為宜。說明生防放線菌在低濃度的條件下，與其他微生物菌群競爭的過程中可能產(chǎn)生了抑制油菜幼苗生長的有害物質(zhì)。

從葉綠素和維生素C含量看，低濃度的菌劑在提高油菜幼苗的光合作用及抗氧化能力方面效果不明顯，但隨生防放線菌濃度的提高，其能夠為油菜生長提供的環(huán)境也就越適宜油菜生長，油菜幼苗的光合作用增強，抗氧化能力提高。高濃度的生防放線菌促進(jìn)了油菜的生長，其葉片也就生長得越好，進(jìn)而葉綠素含量也就提高。

本研究的結(jié)果表明，生防放線菌與草木灰按一定比例混合后包衣處理油菜種子，能促進(jìn)油菜幼苗的出芽及增強油菜幼苗的光合作用能力，提高其抗氧化能力。但適宜的菌劑濃度才能促進(jìn)油菜幼苗根系及植株的生長，本試驗中以菌劑濃度為10%的菌粉對油菜的生長較為有利，因此，在油菜生產(chǎn)中，可以采用生防放線菌制劑∶草木灰=1∶9的菌粉（菌劑濃度10%）包衣油菜種子，以促進(jìn)油菜種子出芽、幼苗生長，提高油菜的產(chǎn)量和品質(zhì)，從而獲得較高的經(jīng)濟效益。

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Effects of Different Concentrations of Actinomyces Bio-control Agent on Growth of Rape(Brassica napusL.)

ZHANG Liqiong1,2
(1.College of Agriculture and Life Science,Ankang University,Shaanxi 725000; 2.Research and Development Center of Agricultual Science and Technology,Ankang University)

After using bacteria powder with different mixed ratios of actinomyces and plant ash to coat rape seeds,we analyzed the effects of different concentrations of bio-control actinomyces agent on seed germination,seedling height,root length,chlorophyll content and vitamin C content of rape,to provide references for rape cultivation and disease control. The results showed that,coating with actinomyces could promote the germination of rape seed,and the higher the actinomyces concentration,the higher the germination rate.Low concentrations of actinomyces(2%and 4%)inhibited the growth of rape seedlings,but 10%actinomyces agent promoted the growth of rape seedlings.As the concentration increased,the photosynthesis ability and antioxidant capacity of rape seedlings enhanced gradually.Coating agents with different ratios of actinomyces and plant ash had different effects on rape growth.On controlling rape sclerotinia rot,we should choose appropriate concentration of actinomyces,so as not to inhibit the growth of rape.

Rape;Bio-control actinomyces;Growth effect

S565.4

A

1001-3547（2013）22-0068-04

10.3865/j.issn.1001-3547.2013.22.024

陜西省教育廳科研計劃項目資助（11JK0650），陜西省安康市科技研究發(fā)展計劃項目（11AK04-03），陜西省科學(xué)技術(shù)研究發(fā)展計劃項目（2013K02-07），安康學(xué)院招標(biāo)項目（2007AKXY003）

張麗瓊（1979-），女，博士，講師，研究方向為土壤物質(zhì)循環(huán)，電話：13909158066，E-mail：yryzlq@163.com

2013-09-09