尚東亞 趙紹華 謝雪平

動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性病變，補體活化在動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用［1］。補體系統(tǒng)由補體固有成分、補體調(diào)節(jié)蛋白及補體受體組成，多種內(nèi)源或外源性物質(zhì)可激活補體，而補體調(diào)節(jié)蛋白可抑制補體活化。老年人群高血脂的發(fā)生率較高，而高脂血癥是動脈粥樣硬化的重要危險因素。本研究旨在探討高脂血癥患者補體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59 與踝臂指數(shù)(ABI)的關系。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2009 年10 月至2011 年5 月我院門診及住院高脂血癥患者243 例為高脂血癥組，其中男127 例，女116 例，年齡61 ～87 歲，平均(68.6 ±6.3)歲，合并高血壓108 例，穩(wěn)定型心絞痛103 例。高脂血癥診斷標準參照我國血脂異常防治建議［2］，血清總膽固醇(TC)≥5.72 mmol/L 和(或)三酰甘油(TG)≥1.70 mmol/L 作為入選條件，血脂水平應有2 次結果達標方可確診。排除標準:肝腎疾病以及甲狀腺功能低下和糖尿病等內(nèi)分泌疾病引起的繼發(fā)性高脂血癥，自身免疫性疾病，近期(＜1 月)有嚴重感染、手術和外傷史，以及半年內(nèi)有急性心腦血管事件發(fā)生者，就診時已使用他汀類藥物治療者(不包括已使用他汀類藥物但在就診時已停用＞2 月)。正常對照組60 例，均來自我院門診健康體檢者，男36 例，女24 例，年齡61 ～84 歲，平均(69.3 ±5.2)歲。記錄入選對象的年齡、身高、體質(zhì)量、腰圍、臀圍、吸煙指數(shù)、血壓、血糖，通過公式計算體質(zhì)量指數(shù)［BMI = 體質(zhì)量(kg)/身高(m)2］，腰臀比=腰圍/臀圍。

1.2 方法

1.2.1 標本采集:所有觀察對象空腹＞12 h，于清晨8時取肘靜脈血6 ml 于真空抗凝或促凝管中。

1.2.2 血脂測定:采用酶法，取當日所采血清，用美國Beckman Coulter 公司LX20 型全自動生化分析儀測定。

1.2.3 白細胞補體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59 檢測:采用全血流式細胞法，用美國Coulter EPICS XL 流式細胞儀測定?？崭谷≈忪o脈血2 ml，置含依地酸二鈉的真空采血器，取血后30 min 內(nèi)開始測定。將鼠抗人CD55-R-PE、CD59-FITC 單克隆抗體及陰性對照抗體10 μl 分別加入不同試管中，每管中加入100 μl 新鮮抗凝全血，震蕩混勻后室溫避光反應15 min，每管加紅細胞裂解液溶解紅細胞后，上機檢測CD 分子平均熒光強度。

1.2.4 高敏C 反應蛋白(hsCRP)測定:hsCRP(血清)采用ELISA 法測定，試劑盒購自美國BioCheck 公司。

1.2.5 ABI 檢測方法:按美國心臟病學會(AHA)推薦的測算方法［3］:室溫21 ℃左右，囑其取仰臥位，安靜休息5 min，置12 cm × 40 cm 的袖帶縛于上臂，Doppler 探頭置于動脈搏動處，調(diào)整探頭直到清晰聞及動脈音，不斷打氣，在動脈音消失后再將水銀面提高20 ～30 mmHg，然后以2 ～4 mmHg/s 的下降速度放氣，再次聽到動脈音時的血壓即為收縮壓。先測量雙側肱動脈的收縮期血壓，同一部位重復測量2 次，每次間隔3 s 至2 min 并取其平均值，若兩側血壓差＞10 mmHg則以高值作為肱動脈收縮期血壓;再測同側脛后動脈和足背動脈收縮期血壓，取其中的高值作為踝部收縮壓;最后用選定的踝部收縮壓除以選定的肱部收縮壓計算ABI。ABI 的正常值為1.0 ～1.4，ABI ＞1.4 為動脈鈣化不可壓縮而出現(xiàn)的假陰性結果，從研究中剔除。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 12.0 軟件進行統(tǒng)計分析。數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，2 組間比較用獨立樣本t 檢驗，變量之間的關系用直線相關分析及多元回歸，P ＜0.05 為有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 一般臨床資料 高脂血癥組BMI、腰圍、腰臀比、收縮壓、血糖、TC、TG、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、hsCRP 較正常對照組明顯升高(P ＜0.01)，有顯著性差異，高脂血癥組ABI 較正常對照組降低(P ＜0.05)，有顯著性差異，2 組體質(zhì)量、臀圍、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、舒張壓無明顯差異。見表1。

表1 2 組臨床資料及ABI 的比較(±s)

表1 2 組臨床資料及ABI 的比較(±s)

注:與對照組比較，* P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

項目正常對照組(n=60)高脂血癥組(n=243)69.3 ±5.268.6 ±6.3 BMI22.5 ±2.324.1 ±3.3＊＊腰圍(cm)80.4 ±8.587.3 ±9.6＊＊臀圍(cm)96.7 ±5.898.6 ±6.6腰臀比0.83 ±0.070.88 ±0.08＊＊收縮壓(mmHg)123.9 ±10.5134.6 ±17.3＊＊舒張壓(mmHg)75.6 ±8.279.4 ±11.2空腹血糖(mmol/L)4.90 ±0.516.62 ±2.73＊＊吸煙指數(shù)585 ±389599 ±534 TC(mmol/l)4.59 ±0.625.73 ±1.53＊＊TG(mmol/l)1.24 ±0.542.19 ±1.77＊＊LDL-C(mmol/l)3.04 ±0.723.67 ±1.23＊＊HDL-C(mmol/l)1.21 ±0.211.35 ±0.55 hsCRP(mg/L)2.55 ±2.445.11 ±8.28＊＊ABI1.21 ±0.111.12 ±0.15年齡(歲)*

2.2 2 組血清白細胞補體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59 的表達比較 高脂血癥組CD55 陽性淋巴細胞平均熒光強度及百分率均較正常對照組明顯降低(P ＜0.05)，2 組間CD59 表達水平差異無統(tǒng)計學意義(P ＞0.05)。見表2。

表2 2 組補體調(diào)節(jié)蛋白CD55 表達的比較(±s)

表2 2 組補體調(diào)節(jié)蛋白CD55 表達的比較(±s)

注:與對照組比較，* P ＜0.05

組別平均熒光強度(道數(shù))單核細胞粒細胞淋巴細胞單核細胞粒細胞百分率(%)淋巴細胞正常對照組(n=60)2.33 ±0.384.17 ±2.082.45 ±0.7041.77 ±12.688 9.76 ±13.4383.29 ±14.28高脂血癥組(n=243)2.07 ±0.26*3.58 ±1.262.29 ±0.6835.26 ±13.38*82.56 ±15.7882.03 ±13.67

2.3 補體調(diào)節(jié)蛋白CD55、CD59 影響因素分析CD55 陽性淋巴細胞平均熒光強度與腰臀比、腰圍、BMI 呈負相關(r =－0.343、－0.241、－0.183，P 均＜0.05)，多元線性回歸分析腰圍進入回歸方程，CD55陽性淋巴細胞平均熒光強度=3.460－1.403 ×腰圍。CD59 與上述指標無相關性。

2.4 ABI 影響因素分析 直線相關分析顯示，ABI 與年齡、hsCRP、TC、收縮壓、BMI 呈負相關(r =－0.243、－0.330、－0.276、－0.228、－0.257，P 均＜0.05)，ABI 與CD55 陽性淋巴細胞平均熒光強度呈正相關(r=0.308，P ＜0.05)，多元回歸分析發(fā)現(xiàn)，hsCRP、CD55陽性淋巴細胞平均熒光強度、年齡進入回歸方程，回歸方程為:ABI =1.287－0.006 ×hsCRP +0.073 ×CD55陽性淋巴細胞平均熒光強度－0.167 ×年齡。

3 討論

動脈粥樣硬化導致的心腦血管疾病已成為現(xiàn)代社會威脅人們健康及生命的最常見原因［4］，目前認為動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥，以動脈管壁單核細胞、淋巴細胞浸潤、泡沫細胞形成、脂質(zhì)沉積和鈣化為特點。補體系統(tǒng)是固有免疫的組成部分，是炎癥反應的重要介質(zhì)和效應分子。補體參與動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的整個過程，補體活化也是缺血再灌注損傷和糖尿病大小血管并發(fā)癥的重要原因［1，5］。補體活化受補體調(diào)節(jié)蛋白的調(diào)控，CD55(衰變加速因子)和CD59(膜保護素)是重要的補體調(diào)節(jié)蛋白，能防止補體活化對自身組織的損傷。CD55 通過阻斷補體C3/C5 轉化酶的組裝并促進其衰變而抑制補體激活;CD59 通過抑制膜攻擊復合物C5b-9 的形成而防止細胞溶解。

本研究顯示，高脂血癥患者CD55 陽性淋巴細胞平均熒光強度及百分率均較正常對照組明顯降低，CD55表達下調(diào)，降低了機體對補體活化的抑制作用，有利于動脈粥樣硬化的形成。相關分析顯示CD55 陽性淋巴細胞平均熒光強度與腰臀比、腰圍、BMI 呈負相關，與劉永銘等［6］研究結果一致，提示肥胖或脂肪組織增加可導致補體調(diào)節(jié)蛋白表達下調(diào)。補體活化產(chǎn)物有多種致動脈粥樣硬化的特性，因此，CD55 表達下調(diào)可能是高脂血癥患者動脈粥樣硬化易感性的機制之一。

ABI 通常用于外周動脈疾病的診斷，反映患肢缺血程度的輕重，但近年來ABI 作為動脈粥樣硬化的一種測量手段，正受到越來越多的關注。2007 年ESH/ES 也明確指出，ABI 降低是反映動脈粥樣硬化性疾病與總體心血管危險增加的指標。國內(nèi)外多項研究表明［7-9］:ABI 異常是心血管事件的獨立危險因素，ABI降低則心血管意外的發(fā)生率增高，其對預測心血管事件的發(fā)生和死亡風險具有很高的價值。本研究發(fā)現(xiàn)高脂血癥組ABI 較正常對照組明顯降低，ABI 與年齡、hsCRP、高膽固醇、收縮壓、BMI 呈負相關，與國外報道一致［10-11］，多元回歸顯示hsCRP、CD55 陽性淋巴細胞平均熒光強度、年齡進入ABI 回歸方程，表明上述指標是動脈粥樣硬化的重要影響因素。補體系統(tǒng)組成的多樣性和補體調(diào)節(jié)蛋白的存在為動脈粥樣硬化的防治提供了多個潛在的干預靶點。

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