賴紅偉 曹宏梅 李文亮

目前化學(xué)振蕩作為一種檢測(cè)分析技術(shù)已得到廣泛應(yīng)用, 近年來在藥物檢測(cè)方面也有報(bào)道［1-6］?；瘜W(xué)振蕩法鑒定羅紅霉素(RXM)具有非常高的靈敏度, 其檢測(cè)限可低至10～12 mol/L［7］, 而且所用儀器和試劑成本低, 操作簡(jiǎn)單易行、實(shí)驗(yàn)耗時(shí)少。本文中利用傳統(tǒng)的B-Z振蕩體系, 對(duì)四個(gè)不同廠家的羅紅霉素藥物進(jìn)行了探討；根據(jù)周期和振幅的變化, 同時(shí)進(jìn)行聚類分析, 取得了較好的鑒定效果。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑 CHI760C電化學(xué)工作站(上海辰華儀器公司)； ZH-1C型超級(jí)恒溫水浴(南京多助科技發(fā)展有限公司)；HJ-1型磁力攪拌器(江蘇省金壇市榮華儀器制造有限公司)；232型甘汞電極(上海偉業(yè)儀器廠)；213型鉑電極(上海偉業(yè)儀器廠)；微量注射器(上海光正醫(yī)療儀器有限公司)。

羅紅霉素(湖南千金湘江藥業(yè)股份有限公司)；羅紅霉素(江蘇祥瑞藥業(yè)有限公司)；羅紅霉素(南京立業(yè)股份有限公司)；羅紅霉素(大同市云華藥業(yè)有限公司；丙二酸(天津匯英化學(xué)試劑有限公司, 分析純)；溴酸鉀(天津市津科精細(xì)化工研究所, 優(yōu)級(jí)純)；硫酸鈰銨(天津市瑞金特化學(xué)有限公司, 分析純)；濃硫酸(天津市大茂化學(xué)試劑廠, 分析純)；實(shí)驗(yàn)用水為超純水。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 在已恒溫［(35±0.1)℃］的連續(xù)攪拌反應(yīng)器中, 于攪拌條件下, 依次加入丙二酸、溴酸鉀和硫酸溶液各15ml；待混勻后, 再加入事先恒溫的15ml硫酸鈰銨溶液,混合液總體積為60ml。以鉑絲電極為工作電極, 217型甘汞電極為參比電極, 用CHI760C電化學(xué)工作站記錄振蕩體系的電位E(V)-時(shí)間t(s)的變化。待振蕩體系趨于穩(wěn)定后, 于鉑電極指示電位最低點(diǎn)加入相同體積(10ml)相同濃度(0.2 g/ml)的羅紅霉素固體溶液, 觀察它們對(duì)B-Z振蕩體系所產(chǎn)生的影響。

2 結(jié)果與分析

為保證B-Z振蕩體系的靈敏度和穩(wěn)定性,振蕩體系中各組分初始濃度依次為：丙二酸(0.45 mol/L)、溴酸鉀 (0.25 mol/L)、硫酸 (3 mol/L)和硫酸鈰銨(0.004 mol/L)。

2.1 羅紅霉素的B-Z振蕩反應(yīng) B-Z振蕩反應(yīng)達(dá)穩(wěn)定狀態(tài)后, 于第6(或7)個(gè)波谷處加入已配好的羅紅霉素溶液, 考察振蕩圖的變化規(guī)律, 四個(gè)廠家的羅紅霉素振蕩譜圖如圖1所示。通過分析, 可以看出：①在羅紅梅霉素加入后, B-Z振蕩體系受到的擾動(dòng)較小, 振蕩譜圖形狀均未發(fā)生明顯變化；②振幅變大, 周期延長(zhǎng), 但二者增幅均較小。③波峰、波谷電位均有降低。顯然, 羅紅霉素對(duì)B-Z體系產(chǎn)生了一定的影響, 但據(jù)此很難區(qū)分不同廠家的羅紅霉素。為此, 基于它們對(duì)振蕩體系周期和振幅的影響大小, 對(duì)其進(jìn)行聚類分析。

2.2 聚類分析

表1 不同廠家羅紅霉素對(duì)B-Z振蕩體的影響

聚類分析又稱集群分析, 它是研究“物以類聚”的一種數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法, 聚類分析可將一些觀察對(duì)象依據(jù)某些特征加以歸類, 在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)分類問題中有著廣泛的應(yīng)用。

本研究中首先對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化,以降低原始數(shù)據(jù)間數(shù)量級(jí)的差異。采用SPSS 18.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。以周期變化、振幅變化2個(gè)元素為變量, 對(duì)4個(gè)樣品數(shù)據(jù)進(jìn)行去R 型聚類, 并采用ward算法對(duì)羅紅霉素進(jìn)行聚類分析。圖2為系統(tǒng)聚類分析的樹形圖,直觀地顯示了整個(gè)聚類過程。由圖2可看出,南京立業(yè)、大同云華為一類, 江蘇祥瑞和湖南千金湘各自成一類。由此可見, 聚類分析圖能反映出樣品間的親疏遠(yuǎn)近關(guān)系, 對(duì)羅紅霉素的鑒別具有一定的理論意義和實(shí)用價(jià)值。

圖2 聚類譜系圖

3 討論

通過上述四個(gè)不同廠家羅紅霉素化學(xué)振蕩譜圖, 因它們所含主要成分相同, 僅從振蕩譜圖很難對(duì)其定性鑒別。引入聚類分析法, 依據(jù)它們對(duì)周期和振幅的擾動(dòng)變化規(guī)律, 可快速簡(jiǎn)便將它們進(jìn)行分類, 該研究為不同廠家羅紅霉素的鑒別提供了一種化學(xué)振蕩技術(shù)和聚類分析法相結(jié)合的新方法。

［1］原春蘭, 李宗孝.氨基酸化學(xué)振蕩反應(yīng)活性中心的研究.物理化學(xué)學(xué)報(bào), 1996,12(11):1041-1043.

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