崔萬麗 曲極冰

1.吉林醫(yī)藥學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，吉林 吉林 132013

2.吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，吉林 長春 132000

茶多糖是由茶葉中提取的一類水溶性復(fù)合多糖，文獻(xiàn)顯示，具有降血脂、增強(qiáng)免疫力以及降血糖等作用［1,2］。但在STZ聯(lián)合高脂飲食復(fù)制2型糖尿病模型上未見報(bào)道。因此本文采用STZ聯(lián)合高脂飲食復(fù)制2型糖尿病小鼠模型，用茶多糖灌胃治療4周，測定小鼠血糖、血脂以及血清胰島素等指標(biāo)。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1. 材料與方法

1.1動(dòng)物 清潔級(jí)雄性ICR小鼠，體重20～22g，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供

1.2試劑 鏈脲佐菌素由美國Sigma公司提供。血糖試劑盒、甘油三酯、總膽固醇由北京北化康泰臨床試劑有限公司提供。胰島素試劑盒由天津九鼎生物技術(shù)有限公司提供。

1.3方法

1.3.1 模型制備

100只雄性ICR小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，隨機(jī)抽取10只作為正常對照組，正常對照組喂基礎(chǔ)飼料，余下90糖尿病模型組小鼠喂高脂飲食，飼料由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心提供。喂養(yǎng)四周后注射STZ，注射前禁食12h，自由飲水，模型組按100mg/Kg計(jì)量腹腔注射STZ，正常對照組注射等體積的枸櫞酸緩沖液。注射后，正常對照組喂普通飼料；模型組繼續(xù)給予高脂飲食。4周后測小鼠空腹血糖，將血糖值在7.8～18mmol/L之間的小鼠按血糖高低隨機(jī)分成5組，模型組、茶多糖高劑量組、茶多糖中劑量組、茶多糖低劑量組、陽性對照組。

1.3.2 給藥

治療組按照高中低2 0 0 m g/K g.d、1 0 0 m g/Kg.d、50mg/Kg.d的計(jì)量灌胃治療，陽性藥按127.5mg/Kg治療持續(xù)4周。正常對照組和模型組小鼠給予等體積的蒸餾水灌胃。

1.3.3 小鼠糖耐量試驗(yàn)

治療4周后，小鼠禁食12h，自由飲水。眼內(nèi)眥靜脈叢取血，3000rpm/min離心15min，收取血清樣品，作為0h時(shí)血糖。之后將葡萄糖溶液按2g/Kg體重灌胃，對照組給予生理鹽水灌胃，分別檢測灌胃后05h，1h，2h的血糖變化。

1.3.4 小鼠血糖及相關(guān)指標(biāo)的檢測

測定前小鼠禁食12h,自由飲水，小鼠眼球取血，分離血清，試劑盒測定小鼠血糖、總膽固醇、甘油三酯。放射免疫法測定小鼠血清胰島素。

1.3.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果以 x±SE 表示，兩組間比較采用 t 檢驗(yàn)；P＜0.05 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2. 結(jié)果

2.1茶多糖對小鼠空腹血糖、血清胰島素、總膽固醇以及甘油三酯的影響

由表1可知，與正常對照組比較，模型組小鼠空腹血糖值明顯升高，血清胰島素水平顯著下降。而灌胃治療4周后，與模型組比較，給藥組小鼠空腹血糖下降，血清胰島素含量增加。結(jié)果表明，茶多糖能夠改善空腹血糖水平，增加胰島素的分泌。

與正常對照組相比，模型組小鼠血清總膽固醇、甘油三酯水平明顯升高，而給予茶多糖治療4周后，顯著降低了小鼠血清總膽固醇以及甘油三酯的水平，說明茶多糖具有降血脂的作用，能夠改善糖尿病小鼠的高脂狀態(tài)。

2.2茶多糖對小鼠口服葡萄糖耐量的影響

由圖表2可知，正常小鼠灌胃葡萄糖后，在0.5h時(shí)的血糖值較高，隨著時(shí)間推移，1h、2h時(shí)的血糖值逐漸下降，并趨于平穩(wěn)。而模型組小鼠血糖在1h、2h后仍保持較高水平，說明模型組出現(xiàn)了明顯的葡萄糖不耐受。茶多糖中劑量組和高劑量組對1h和2h血糖升高有抑制作用（P＜0.05),高劑量組對1h和2h血糖升高都有抑制作用(P＜0.05或P＜0.01)?？梢姡瓒嗵蔷哂懈纳破咸烟悄土康淖饔?。

3 結(jié)語

2型糖尿病的主要特征為胰島素抵抗和胰島素分泌絕對或相對不足，由此導(dǎo)致糖、蛋白質(zhì)和脂肪代謝紊亂，嚴(yán)重威脅人類的健康，但目前并無有效的治愈方法。而從天然植物中尋求有效的降糖成分為糖尿病的治療提供了新方法。

STZ是一種含亞硝基的化合物，進(jìn)入體內(nèi)后可以選擇性的破壞胰島β細(xì)胞［3］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，茶多糖具有降低STZ聯(lián)合高脂飲食制備的2型糖尿病小鼠空腹血糖的作用，并且具有量效關(guān)系。在降低空腹血糖的同時(shí)，也能夠改善血清胰島素水平，并且改善小鼠的糖耐量，這說明茶多糖對2型糖尿病小鼠具有較好的降糖作用，其降糖機(jī)制可能是茶多糖能夠減弱STZ對胰島β細(xì)胞的損傷或者改善受損β細(xì)胞的功能，從而刺激胰島素的分泌以及葡萄糖的代謝。

脂類代謝紊亂引起的動(dòng)脈粥樣硬化是糖尿病嚴(yán)重的并發(fā)癥。本研究證明茶多糖能夠降低血清總膽固醇以及甘油三酯的水平，改善脂類代謝。提示其作用機(jī)理可能與增加胰島素的敏感性有關(guān)［4］。茶多糖降低血糖的作用機(jī)制、應(yīng)用前景以及純化和結(jié)構(gòu)分析有待于進(jìn)一步研究。

表1 茶多糖對糖尿病小鼠血糖、胰島素、甘油三酯以及總膽固醇的影響( ±SE, n=10)

表2 茶多糖對糖尿病小鼠糖耐量的影響( ±SE, n=10)

[1]陳海霞, 謝筆鈞. 茶多糖對小鼠實(shí)驗(yàn)性糖尿病的防治作用[J]. 營養(yǎng)學(xué)報(bào), 2002, 24(1): 85-86.

[2]蕭偉祥, 蕭慧. 茶多糖生物活性與結(jié)構(gòu)的研究進(jìn)展[J]. 中國茶葉, 2002, 24(1): 14-15.

[3]Cunha J M, Funez M I, Cunha F Q, et al. Streptozotocin-induced mechanical hypernociception is not dependent on hyperglycemia[J]. Brazilian Journal of Medical and Biological Research, 2009, 42(2): 197-206.

[4]Marlett J A, McBurney M I, Slavin J L. Position of the American Dietetic Association: health implications of dietary fiber[J]. Journal of the American Dietetic Association, 2002, 102(7): 993-1000.