吳群英，李伯林，李景云

（1.桂林醫(yī)學(xué)院 生物技術(shù)學(xué)院，廣西 桂林541004；2.廣西師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，廣西 桂林541004；3.廣西中醫(yī)藥大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，廣西 南寧530001）

1 引言

羅 漢 果 （Siraitia grosvenorii （Swingle）C.Jeffrey）為葫蘆科（Cucurbitaceae）羅漢果屬植物，是廣西特有的藥用和甜料植物[1]。羅漢果果實(shí)性涼味甘，有潤(rùn)肺止咳、涼血、潤(rùn)腸，通便的功效，在治療百日咳、慢性支氣管炎、胃腸疾病等方面療效顯著，為歷代藥典所收載，是國(guó)家衛(wèi)生部和國(guó)家中醫(yī)藥管理局列為第一批藥食同源名單的重要品種，被譽(yù)為“東方神果”[2～4]。近年來(lái)，隨著羅漢果功效的不斷驗(yàn)證，市場(chǎng)對(duì)羅漢果的需求日益增加，羅漢果已廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品及食品領(lǐng)域[5]。傳統(tǒng)的羅漢果繁殖主要采用塊根和壓蔓進(jìn)行無(wú)性繁殖，不僅繁殖系數(shù)低，而且隨著無(wú)性繁殖代數(shù)增加，病毒通過(guò)垂直傳播代代相傳，導(dǎo)致病毒積累和種質(zhì)嚴(yán)重退化[6]，利用莖尖脫毒技術(shù)培育脫毒苗是解決病毒危害、實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的重要措施[7]。羅漢果脫毒的研究始于20世紀(jì)90年代，目前僅有3篇報(bào)道[8～10]，但迄今為止，尚無(wú)脫毒苗大田生產(chǎn)性能的報(bào)道。本研究以羅漢果脫毒苗和常規(guī)組培苗為材料，探討了脫毒苗的生產(chǎn)性狀，為脫毒苗在生產(chǎn)上的應(yīng)用提供參考。

2 材料與方法

將從永?？h龍江鄉(xiāng)采摘的羅漢果青皮品種的莖段作為外植體，建立無(wú)菌體系，以繼代的組培苗作為常規(guī)組培苗（簡(jiǎn)稱(chēng)組培苗，以下同）；以常規(guī)組培苗為材料進(jìn)行脫毒處理[10]，得到脫毒組培苗（簡(jiǎn)稱(chēng)脫毒苗，以下同）。將高約3cm的脫毒苗和常規(guī)組培苗，分別接入1/2MS＋1.0mg/L IBA ＋0.1%活性炭＋1.5%蔗糖的生根培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。移栽試驗(yàn)在廣西師范大學(xué)生物園試驗(yàn)基地大棚內(nèi)進(jìn)行。

大田移栽于5月21日將脫毒苗和常規(guī)苗各41株，移栽至廣西桂林市臨川縣藍(lán)田鄉(xiāng)進(jìn)行大田種植，并對(duì)脫毒苗和常規(guī)苗的生長(zhǎng)情況進(jìn)行觀(guān)察和記錄。9月2日統(tǒng)計(jì)組培苗掛果情況。所有栽培管理技術(shù)參照當(dāng)?shù)毓r(nóng)種植習(xí)慣。

3 結(jié)果與分析

3.1 組培苗大田性狀

從長(zhǎng)勢(shì)看，脫毒苗生長(zhǎng)迅速，平均比對(duì)照苗抽出新葉的時(shí)間短，能夠很好地適應(yīng)外界環(huán)境條件。將脫毒苗和常規(guī)苗移栽入大田生長(zhǎng)40d后，脫毒苗和常規(guī)苗的生長(zhǎng)情況如表1所示。由表1可見(jiàn)，脫毒苗與常規(guī)苗相比，脫毒生長(zhǎng)旺盛，葉片數(shù)多，節(jié)間長(zhǎng)，植株抽長(zhǎng)迅速，葉片寬大呈心形，先端急尖，葉色濃綠，無(wú)花葉病病癥（圖1）。對(duì)照苗長(zhǎng)勢(shì)弱，葉片褪綠，葉片上有點(diǎn)樣深綠皰斑，與脫毒苗有很大差別（圖2）。

表1 脫毒苗與常規(guī)苗外觀(guān)形態(tài)的比較

3.2 羅漢果組培苗的產(chǎn)量

將組培苗移栽至大田后，其存活率和開(kāi)花掛果情況如表2所示，常規(guī)苗的存活率為85.36%，脫毒苗僅為73.17%，存活的常規(guī)苗在種植第一年開(kāi)花和掛果率均為零，而存活的脫毒苗雖然移載至大田種植時(shí)間比較短，但仍有12株當(dāng)年就開(kāi)花并掛果，單株產(chǎn)量多達(dá)100只，大果多，均勻（圖3、圖4）。

圖1 羅漢果花葉病癥，花葉，皺縮

圖2 羅漢果脫毒苗葉片

表2 羅漢果種植第一年掛果情況

圖3 羅漢果脫毒苗掛果情況（示掛果數(shù)量多）

圖4 羅漢果脫毒苗掛果情況（示大果）

4 結(jié)語(yǔ)

羅漢果一般于每年的3～4月種植，9～11月成熟。傳統(tǒng)生產(chǎn)的羅漢果是兩年以上植株掛果。本次試驗(yàn)于5月21日將脫毒苗和常規(guī)苗移栽至大田，此時(shí)種植時(shí)間已比羅漢果正常種植時(shí)期晚了將近2個(gè)月，但由于進(jìn)行了脫毒處理，消除了病毒引起的組織代謝異常，脫毒苗植株生長(zhǎng)迅速，在生產(chǎn)上表現(xiàn)出長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)、葉片增大，葉色濃綠，提前進(jìn)入結(jié)果期的優(yōu)勢(shì)，單株產(chǎn)量多達(dá)100只，果形大，數(shù)量多，充分顯示了脫毒苗增產(chǎn)復(fù)壯的效果。

羅漢果脫毒苗移栽至大田后成活率偏低其原因是多方面的，一方面，可能是由于脫毒苗在誘導(dǎo)分化產(chǎn)生大量叢生芽過(guò)程中出現(xiàn)了玻璃苗，移栽至大田后玻璃苗光合與吸收功能不全，導(dǎo)致成活率偏低；另一方面，在種植過(guò)程中各種人為因素的影響也是應(yīng)該考慮的。羅漢果脫毒苗種植大田后，是否更容易感染病毒？栽培上應(yīng)怎樣成分發(fā)揮脫毒苗的增產(chǎn)潛力？都有待于進(jìn)一步的試驗(yàn)研究。

[1]李典鵬，張厚瑞.廣西特產(chǎn)植物羅漢果的研究與應(yīng)用[J].廣西植物，2000，20（3）：270～276.

[2]廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳.廣西中藥志：第二輯[M].南寧：廣西壯族自治區(qū)人民出版社.1983.

[3]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005.

[4]范繼善.實(shí)用食品添加劑[M].天津：天津科學(xué)技術(shù)出版社，1993.

[5]曾祥林.廣西特產(chǎn)植物羅漢果研究進(jìn)展[J].廣西醫(yī)學(xué)，2009，31（8）：1182～1185.

[6]付長(zhǎng)亮，馬小軍，白隆華.羅漢果組織培養(yǎng)研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志，2005，30（5）：25～328.

[7]林 緯，黎起秦，彭好文，等.羅漢果組培苗種植存在問(wèn)題及解決措施[J].廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003（4）：74～75.

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[10]吳群英，李伯林，李景云.羅漢果組培苗脫毒方法研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，39（24）：18～20.