胡英會，張 競，陶占領(lǐng)

（1.鄭州華信學(xué)院 醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 451100；2.鄭州安圖綠科生物工程有限公司，河南 鄭州 450016）

梅毒螺旋體抗體診斷試劑的臨床應(yīng)用

胡英會1，張 競1，陶占領(lǐng)2

（1.鄭州華信學(xué)院 醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 451100；2.鄭州安圖綠科生物工程有限公司，河南 鄭州 450016）

目的：同時用評價試劑和參比試劑檢測436例血清樣本，探討評價試劑與參比試劑檢測結(jié)果的符合率.方法：評價試劑采用化學(xué)發(fā)光法，參比試劑采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)；并通過卡方檢驗(yàn)來判斷兩試劑盒間有無顯著差異.結(jié)果：評價試劑和參比試劑陽性符合率為98.25％，陰性符合率為99.47％.兩種試劑通過卡方檢驗(yàn)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05).結(jié)論：評價試劑與參比試劑的檢測結(jié)果具有很好的一致性，評價試劑可以用于梅毒感染的輔助診斷.

化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）；梅毒螺旋體

梅毒螺旋體（Treponema Pallidum）是對人體有致病性的密螺旋體的一種，為梅毒的病原體，具有較強(qiáng)的傳染性和慢性復(fù)雜的病理，它幾乎可以引起全身所有系統(tǒng)的組織和臟器的損害及病變，導(dǎo)致功能失常，組織破壞，乃至死亡.梅毒螺旋體引起的梅毒是僅次于艾滋病的嚴(yán)重危害人民健康的性傳播疾病.1949年之前梅毒也曾在我國廣泛流行，50年代初期，梅毒在全國絕大部分地區(qū)基本絕跡.但在80年代后期，梅毒患者又陸續(xù)在全國各地出現(xiàn)，從沿海地區(qū)向內(nèi)地蔓延，近年來呈明顯上升趨勢.控制梅毒傳播，重點(diǎn)在于對傳染源的發(fā)現(xiàn)和控制，因此加強(qiáng)對梅毒的普查，已成為防止該疾病蔓延的重要手段.

評價試劑采用雙抗原夾心和化學(xué)發(fā)光技術(shù)相結(jié)合的方法，對人血清或血漿中梅毒螺旋體抗體進(jìn)行檢測.為了考核該試劑盒的各項(xiàng)性能，對其進(jìn)行臨床應(yīng)用評價.

1 材料與方法

1.1標(biāo)本來源

收集鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院門診或住院治療呼吸道感染的患者樣本436份，收集的樣本包括以下的人群：處于不同感染期的梅毒陽性樣本，健康人群樣本，孕婦樣本，樣本庫中保存的梅毒陽性標(biāo)本以及可能會對測定結(jié)果造成干擾的如風(fēng)濕患者、癌癥患者、非梅毒性病患者的樣本.記錄檢測對象的編號以及與梅毒相關(guān)的臨床診斷，按照說明書的要求收集樣本.

1.2試劑

評價試劑：鄭州安圖綠科生物工程有限公司的梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）（批號20051008）；參比試劑：上海科華生物工程股份有限公司的梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)（批號：20051102）.

1.3方法

436份樣本采用評價試劑與參比試劑進(jìn)行對照測定.評價試劑采用化學(xué)發(fā)光法，參比試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，兩種檢測測方法均嚴(yán)格按照試劑盒操作說明書步驟進(jìn)行.

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，比較兩試劑盒的差異程度.

2 結(jié)果

兩試劑盒檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)如表1.

表1

依據(jù)卡方檢驗(yàn)公式計(jì)算卡方值：χ2=0.50，ν=1，P＞0.05，說明兩試劑盒間無顯著差異.

3 討論

目前關(guān)于梅毒的臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要有：組織病理檢查；梅毒螺旋體檢查；梅毒血清學(xué)試驗(yàn)[1-6].而目前國內(nèi)外已批準(zhǔn)上市的梅毒實(shí)驗(yàn)室診斷方法有以下幾種：梅毒甲苯胺紅不加熱血清實(shí)驗(yàn)（TRUST），梅毒快速血漿反應(yīng)素實(shí)驗(yàn)（RPR），梅毒螺旋體抗體ELISA雙抗原夾心法，梅毒螺旋體抗體CLIA雙抗原夾心法（北京科美東雅），梅毒螺旋體血凝法(英國omega diagnostics)，梅毒螺旋體凝集法（日本Fujirebio），梅毒螺旋體抗體膠體金法.其中TRUST和RPR檢測的是標(biāo)本中的反應(yīng)素而不是梅毒螺旋體抗體，雖然操作簡便快速，但是靈敏度和特異性都較低，而且用肉眼觀測結(jié)果，有一定的主觀性；梅毒螺旋體血凝法和凝集法的靈敏度和特異性均較高，一般認(rèn)為是梅毒檢測的確認(rèn)方法，但是此類產(chǎn)品反應(yīng)時間長；化學(xué)發(fā)光法作為20世紀(jì)90年代才興起的一種新型檢測技術(shù)，除具有檢測方法簡單快速的優(yōu)點(diǎn)之外，還具有靈敏度高、檢測線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，因此越來越多的受到臨床診斷實(shí)驗(yàn)室的關(guān)注，是近年來該領(lǐng)域研究的熱點(diǎn). ELISA雙抗原夾心法和CLIA雙抗原夾心法均采用基因重組抗原作為主要原材料，靈敏度和特異性均達(dá)到了較高水平，而且操作方便，易于實(shí)現(xiàn)自動化和大量標(biāo)本的篩查，因此成為目前主要的檢測方法[8-10].

從兩試劑盒的比較結(jié)果可以看出，兩試劑盒具有較高的符合率，這與他們所使用的原材料（都是基因重組抗原）和方法（雙抗原夾心法）比較相似有很大的關(guān)系，兩家試劑盒檢出的56份陽性標(biāo)本經(jīng)臨床診斷和詢問患者病史，其中有8例為早期梅毒，21例為一期梅毒，12例為二期梅毒，15例為治療后檢測.通過對不同人群的比較，發(fā)現(xiàn)20歲以下人群的陽性率最低，70歲以上年齡組陽性率偏高，孕婦和癌癥患者與一般人群并無區(qū)別[7].對于一些早期感染的患者，沒有明顯的癥狀，通過梅毒螺旋體抗體檢測，對梅毒感染的發(fā)現(xiàn)和及時治療有很大意義.

兩試劑盒中共有3份標(biāo)本測得不同結(jié)果，均在臨界值附近，對這3份標(biāo)本用日本富士公司的TPPA試劑盒復(fù)測，結(jié)果均為陰性.結(jié)合臨床診斷和生活史，排除了梅毒感染的可能，應(yīng)為假陽性.根據(jù)臨床診斷，這3份標(biāo)本并無特殊疾病，對于具體的干擾原因還無法確定.

綜上所述，梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）具有較高靈敏度高，特異性強(qiáng)，可以用于臨床梅毒感染的輔助診斷.

〔1〕傅均星,周瀟,曾鐵兵.基因重組抗原ELISA法在梅毒螺旋體抗體檢測中的評價[J].南華大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2004，32（3）：306-314.

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