林玉甜，陳斌鋒（廣東省惠州市中心人民醫(yī)院輸血科 516001）

ABO血型抗體的減弱或消失多見于新生兒、老年人、免疫抑制疾病或免疫低下的患者［1］。日前作者發(fā)現(xiàn)1例因“支氣管擴張癥并雙肺感染”O(jiān)型患者因大量輸注抗生素導(dǎo)致抗－A、抗－B嚴(yán)重減弱并暫時消失，停止靜脈輸液3d后重抽標(biāo)本檢測，用傳統(tǒng)試管法抗體加強試驗4℃下30min后觀察結(jié)果，抗－A（＋）、抗－B（＋），現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 患者，女，14歲，無月經(jīng)及輸血史?；颊哂?年前出現(xiàn)無明顯誘因反復(fù)咳嗽，曾多次在當(dāng)?shù)卦\所及本院治療，CT示“支氣管擴張癥并發(fā)雙肺感染”，1周前受涼后“因反復(fù)咳嗽、咳痰1年余，伴發(fā)熱1周”于2012年4月1日入住本院呼吸內(nèi)科，實驗室檢查白細胞：25.7×109/L，IgG含量降低，給予吸氧、經(jīng)驗性抗感染（噻嗎靈）解痙、平喘等治療14d后轉(zhuǎn)心胸外科擬“左下肺葉切除術(shù)”手術(shù)治療，術(shù)前行血型鑒定交叉配血時發(fā)現(xiàn)患者ABO血型正、反定型不符，正定型為O型，反定型為AB型。

1.2 儀器與試劑 Labofuge 300離心機（德國索福－賀利）、ID－Centrifuge 12sⅡ 離心 機、ID－lncabator37SI孵育 器、Liss/coombs、ID－DiaCell ABO及ABO正反定型卡/RhD定型卡（瑞士達亞美），ABO、RhD血型定型檢測卡及配套的離心機（長春博訊），單克隆抗－A、抗－B、抗－H血清（上海血液生物醫(yī)藥有限公司），放散試驗用6%牛血清清蛋白（上海澤龍生物工程有限公司），Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗篩細胞（瑞士達亞美），Oc本科室自制。

1.3 方法 （1）微柱凝膠法采用達亞美卡和博訊卡兩種血型卡檢測。達亞美卡血型鑒定：50μL、0.8%A1、B反定細胞加入A1、B管中，再分別加入50μL血漿到A1、B管中；正定－A、－B、－D、clt4孔分別各加入10μL、5%紅細胞懸液，離心10min后判讀結(jié)果；博訊卡血型鑒定：50μL、0.8%A1、B反定細胞加入A1、B管中，再分別加入50μL血漿到A1、B管中；正定－A、－B、－D、clt4孔分別各加入50μL、1%紅細胞懸液，離心10min判讀結(jié)果。（2）試管法試驗：分別在4℃、室溫、37℃3種條件下同時進行試驗。

2 結(jié) 果

2.1 患者ABO血型正、反定型結(jié)果顯示，正定O型，反定AB型，結(jié)果見表1、2。

表1 微柱凝膠法ABO正、反定型結(jié)果

2.2 由于血型正、反定型不相符，不能確定患者血型，繼續(xù)做吸收放散試驗，方法按文獻［2］操作。經(jīng)吸收放散試驗后，結(jié)果患者紅細胞上未檢出A、B抗原，正定為O型。

表2 試管法ABO正、反定型結(jié)果

2.3 考慮患者因疾病用藥而導(dǎo)致免疫低下的特殊性，建議患者停止靜脈補液3d后再重抽標(biāo)本。3d后重抽患者乙二胺四乙酸二鉀抗凝血3mL重復(fù)上述表1、2的試驗，微柱凝膠試驗（即卡式法）結(jié)果無改變，試管法4℃下抗體加強30min觀察結(jié)果，反定抗－A（＋），抗－B（＋），根據(jù)以上血清學(xué)試驗結(jié)果，患者血型正、反相符定為O型，與O型紅細胞4U行微柱凝膠交叉配血主次均無凝集，抗篩Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全陰性。

3 討 論

ABO血型鑒定會受到多種因素的干擾，當(dāng)出現(xiàn)正、反不一致時，應(yīng)當(dāng)排除人為或試劑因素的干擾，再考慮以下幾種情況：（1）生理性因素；（2）臨床治療的影響；（3）疾病影響引起的血漿抗體異常［3］。從本例的血型血清學(xué)檢查及放散試驗結(jié)果分析，患者應(yīng)為抗體減弱，造成這一結(jié)果的原因在于：（1）感染本身會加重免疫抑制，IgG含量降低，而患者因感染每天大量使用抗生素（噻嗎靈），引起機體免疫力下降，干擾ABO反定型；（2）患者每天大量輸液，造成ABO抗體稀釋，結(jié)果造成抗體嚴(yán)重減弱并暫時消失，這一結(jié)論可以從患者停止補液和使用抗生素3d后抗體出現(xiàn)得出。從以上試驗方法可以看出，微柱凝膠技術(shù)血型正定型具有檢測敏感性高，特異性強，結(jié)果準(zhǔn)確、易于觀察、影響因素少等特點，特別是對抗原性較弱的嬰兒紅細胞抗原檢測更表現(xiàn)其優(yōu)越性［4］，尤其是瑞士達亞美的血型卡，對ABO亞型更有它的優(yōu)越性。而在檢查抗體減弱方面與傳統(tǒng)的試管法有它的局限性，因其方法所用的血漿量少，即時離心看結(jié)果，當(dāng)出現(xiàn)抗原/抗體水平減弱時，就容易造成假陰性，表1結(jié)果證明了這一點。因此，當(dāng)出現(xiàn)上述情況時，可以用經(jīng)典的試管法，通過延長樣本反應(yīng)時間，增加劑量和降低反應(yīng)溫度的方法做進一步鑒定，但一定要同時做Oc和自身C對照。因本例患者是擇期手術(shù)備血，有充裕的時間去鑒定最終的血型。如在搶救用血的情況下，患者因病情危急不能等待血型結(jié)果配血，則啟用緊急用血程序及規(guī)定，由臨床醫(yī)生申請，輸O型紅細胞，在血漿制品上，選擇AB型血漿、冷沉淀、冰凍機采血小板。

［1］ 鄧永福，楊明清.臨床輸血實用技術(shù)［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，200726.

［2］ 李勇，楊貴貞.人類紅細胞血型學(xué)實用理論與實驗技術(shù)［M］.北京：中國科學(xué)技術(shù)出版社，1999：267－270.

［3］ 蘭炯采，贠中橋，陳靜嫻.輸血免疫血液學(xué)實驗技術(shù)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2011：132－135.4 楊志誠，羅光禮，李萌.微柱凝膠技術(shù)在臨床血型鑒定和交叉配血中的應(yīng)用［J］.浙江臨床醫(yī)學(xué)，2008，10（12）：1612－1613.