韋瑞紅 伍麗群 任帶嬌

（深圳市福田人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 深圳 518033）

Cox-2和P-21蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及意義

韋瑞紅 伍麗群 任帶嬌

（深圳市福田人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 深圳 518033）

目的 探討子宮內(nèi)膜癌中P-21蛋白和環(huán)氧化酶-2 （Cyclooxygenase-2，COX-2）的表達(dá)和意義。方法 采用免疫組織化學(xué)中的SP法對(duì)對(duì)照組中20例正常的子宮內(nèi)膜組織患者、非典型增生組中的7例子宮內(nèi)膜出現(xiàn)非典型增生組織患者以及子宮內(nèi)膜癌組中的55例子宮內(nèi)膜癌組織患者中P-21蛋白及COX-2的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 與非典型增生組和子宮內(nèi)膜癌組相比，對(duì)照組中患者P-21蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率顯著較高（P＜0.05），而對(duì)照組中Cox-2的陽(yáng)性表達(dá)率顯著較非典型增生組和子宮內(nèi)膜癌組低（P＜0.05）；在手術(shù)-病理分期和分化程度，以及淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移等宮內(nèi)膜癌組織的相關(guān)方面，P-21蛋白的陽(yáng)性率具有明顯差異（P＜0.05）；Cox-2陽(yáng)性率在子宮內(nèi)膜癌組織的手術(shù)-病理分期、分化程度、肌層浸潤(rùn)方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），子宮內(nèi)膜癌組織P-21蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與Cox-2陽(yáng)性呈負(fù)相關(guān)（r=-0.498，P=0.000）。結(jié)論 P-21蛋白和Cox-2異常表達(dá)可能在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。

子宮內(nèi)膜癌；P-21蛋白；Cox-2

在婦科，子宮內(nèi)膜癌屬于常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在女性全身的惡性腫瘤中約占7%，在女性生殖道的惡性腫瘤疾病中占20%～30%，其發(fā)病率近年來(lái)一直呈現(xiàn)出升高的趨勢(shì)[1]。腫瘤的出現(xiàn)是多基因且多步驟的，其過(guò)程十分復(fù)雜，正常子的宮內(nèi)膜細(xì)胞出現(xiàn)惡性轉(zhuǎn)化，發(fā)生、發(fā)展成為子宮內(nèi)膜癌可由多種因素早成，例如激活癌基因、細(xì)胞周期出現(xiàn)調(diào)節(jié)紊亂及抑癌基因的失活等[2-3]。近年研究發(fā)現(xiàn)，COX-2參與了多種腫瘤的細(xì)胞增殖、抗凋亡和血管生成，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān)[4]。P21蛋白與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及生物學(xué)行為密切相關(guān)，并且在基因治療方面有著廣闊的應(yīng)用前景。因此本研究探討環(huán)氧化酶-2 （Cyclooxygenase-2, COX-2）與P21蛋白表達(dá)在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展，對(duì)該病的治療及其預(yù)后之間的相關(guān)性，其結(jié)果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文選擇了自2001年10月至2011年10月來(lái)我院婦產(chǎn)科治療的55例子宮內(nèi)膜癌病人，將其作為子宮內(nèi)膜癌組，其年齡為35～72 歲,平均為（52 ±8）歲，患者在術(shù)前未接受放、化療和激素治療，在術(shù)后經(jīng)組織病理證實(shí)患有子宮內(nèi)膜樣腺癌。20例患者為高分化腺癌，21例患者為中分化腺癌，14例患者為低分化腺癌；在手術(shù)-病理分期方面，40例患者為Ⅰ～Ⅱ期，15例為Ⅲ～Ⅳ期；癌組織的肌層浸潤(rùn)深度：32例患者為肌層浸潤(rùn)≤1/2，23例患者為肌層浸潤(rùn)＞1/2。51例患者術(shù)中接受盆腔淋巴結(jié)清掃手術(shù)，42例未出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，7例出現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移，未做盆腔淋巴清掃患者4例。選擇同期門(mén)診20 例正常子宮內(nèi)膜行刮宮的患者作為對(duì)照組，其年齡為（50±5）歲；7例子宮內(nèi)膜出現(xiàn)非典型增生患者作為非典型增生組，其平均年齡為（51±8）歲。本文中所選患者在年齡等其他相關(guān)因素方面存在的差異，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 對(duì)免疫組織的化學(xué)檢測(cè)：本次研究中COX 2為即用型鼠抗人單克隆抗體、SP試劑盒以及鼠抗p21蛋白均由福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司提供，全部樣品均用含量為10%的中性福爾馬林進(jìn)行固定，將常規(guī)脫水石蠟進(jìn)行包埋切片4μm，將載玻片涂上多聚賴(lài)氨酸并將切片貼上，常規(guī)進(jìn)行烘片脫蠟，并梯度乙醇直至蒸餾水化,用免疫組織的化學(xué)微波對(duì)切片予以修復(fù)，操作參考試劑盒說(shuō)明。將已知的陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS替代一亢作為陰性對(duì)照。

表1 3組 Cox-2和P21蛋白表達(dá)情況

表2 P21蛋白和Cox-2表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的臨床病理關(guān)系

1.2.2 結(jié)果判定：當(dāng)腫瘤細(xì)胞漿呈現(xiàn)出棕黃色顆粒時(shí)，則COX 2為陽(yáng)性，當(dāng)細(xì)胞漿內(nèi)和膜上呈現(xiàn)出棕黃色細(xì)顆粒時(shí)，p21蛋白染色為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

研究中所得數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包SPSS15.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)方面的分析，所有組間數(shù)據(jù)應(yīng)用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)數(shù)據(jù)以均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差（）表示。以P＜0.05代表差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組 Cox-2和P21 蛋白的表達(dá)情況

本次研究顯示，與非典型增生組和子宮內(nèi)膜癌組相比，對(duì)照組中患者P-21蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率顯著較高（P＜0.05），而對(duì)照組中Cox-2的陽(yáng)性表達(dá)率顯著較非典型增生組和子宮內(nèi)膜癌組低（P＜0.05），如表1所示。

2.2 P21蛋白及Cox-2 表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌的臨床病理關(guān)系

在手術(shù)-病理分期和分化程度，以及淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移等宮內(nèi)膜癌組織的相關(guān)方面，P-21蛋白的陽(yáng)性率具有明顯差異（P＜0.05）；Cox-2陽(yáng)性率在子宮內(nèi)膜癌組織的手術(shù)-病理分期、分化程度、肌層浸潤(rùn)方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.3 P21 蛋白與 Cox-2關(guān)系

子宮內(nèi)膜癌組P-21陽(yáng)性中Cox-2蛋白表達(dá)陽(yáng)性者為43%，P-21蛋白陰性中Cox-2表達(dá)陽(yáng)性者92%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。P-21蛋白陽(yáng)性表達(dá)率與Cox-2陽(yáng)性表達(dá)率呈負(fù)相關(guān)（r=-0.498，P=000）。

3 討 論

3.1 P21位于人6號(hào)染色體短臂上，均長(zhǎng)約2.1kb，編碼區(qū)共有495個(gè)核昔酸，系由164個(gè)氨基酸組成的相對(duì)分子質(zhì)量為21KD的蛋白質(zhì)，故又稱(chēng)P21基因，P21蛋白即為P21基因的表達(dá)產(chǎn)物。目前P21蛋白是臨床已知的激酶抑制活性最為廣泛的細(xì)胞周期性抑制蛋白，其主要是在細(xì)胞周期調(diào)節(jié)中起到參與作用，對(duì)異常細(xì)胞的增生起到抑制功效，協(xié)調(diào)細(xì)胞完成對(duì)DNA損傷的修復(fù)。有學(xué)者研究指出[5]P21表達(dá)在子宮內(nèi)膜增生及在子宮內(nèi)膜增生內(nèi)會(huì)出現(xiàn)減少或不表達(dá)現(xiàn)象，羅雪慧等報(bào)道在正常外陰、外陰尖銳濕疣、外陰癌的P21表達(dá)分別為75%、27.5%、26.5%。[6]從本次研究中可看出，對(duì)照組中的P21 蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率顯著較非典型增生組和子宮內(nèi)膜癌組高，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與以上學(xué)者的研究一致。由此表明在子宮內(nèi)膜自良性到惡性的發(fā)展過(guò)程中，P21蛋白表達(dá)在非典型增生這一階段很可能已出現(xiàn)了變化，如果是形態(tài)學(xué)意義上的非典型增生伴隨P21蛋白表達(dá)減少，很可能就會(huì)發(fā)展成為子宮內(nèi)膜癌。P21蛋白陽(yáng)性率在子宮內(nèi)膜癌組織的手術(shù)-病理分期、分化程度等方面差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但在肌層浸潤(rùn)方面的差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。腺癌的陽(yáng)性表達(dá)率在患病早期和高分化時(shí)較高，但隨著分期的提高和分化程度的不斷降低，腺癌的陽(yáng)性表達(dá)率隨之下降。王瓊書(shū)等[7]研究指出，子宮內(nèi)膜癌的細(xì)胞分化和P21的表達(dá)具有密切關(guān)系，這說(shuō)明基因表達(dá)減弱引起細(xì)胞增殖，進(jìn)而失去了有效監(jiān)控，使得腫瘤生長(zhǎng)迅速。

3.2 環(huán)氧化酶-2（COX-2）是炎癥過(guò)程中催化前列腺素合成的一個(gè)關(guān)鍵誘導(dǎo)酶。是前列腺素合成過(guò)程中的重要限速酶。COX-2在大多數(shù)正常組織中不表達(dá)，但在細(xì)胞受到各種刺激如炎癥因子、生長(zhǎng)因子、促癌劑等的誘導(dǎo)下迅速合成，參與炎癥過(guò)程和腫瘤的發(fā)生，對(duì)照組中Cox-2的陽(yáng)性表達(dá)率顯著較非典型增生組和子宮內(nèi)膜癌組低（P＜0.05），這說(shuō)明COX-2可能參與腫瘤發(fā)生的起始階段。Lambropoulou等[8]的研究發(fā)現(xiàn)，COX-2在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)與FIGO分期密切相關(guān)，Ⅲ、Ⅳ期顯著高于Ⅰ、Ⅱ期；中低分化者顯著高于高分化者，伴有深肌層浸潤(rùn)者顯著高于無(wú)肌層浸潤(rùn)或僅淺肌層浸潤(rùn)者。本次研究結(jié)果指出，在手術(shù)-病理分期和分化程度，以及淋巴結(jié)出現(xiàn)轉(zhuǎn)移等宮內(nèi)膜癌組織的相關(guān)方面，COX-2的陽(yáng)性率具有明顯差異（P＜0.05）；與文獻(xiàn)相符。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者相比稍高，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，（P＞0.05），也不能完全排除與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性的病例數(shù)較少有關(guān)。本次研究結(jié)果顯示，P21蛋白和COX-2的表達(dá)出現(xiàn)異常和子宮內(nèi)膜腺癌的產(chǎn)生關(guān)系密切，并在發(fā)展過(guò)程中始終存在。P21蛋白和COX-2的表達(dá)存在相關(guān)性，呈現(xiàn)出負(fù)相關(guān)的關(guān)系，P21蛋白表達(dá)低的患者COX-2的表達(dá)高，并且細(xì)胞增殖的能力也高；這說(shuō)明腫瘤細(xì)胞的增殖能力較強(qiáng)，這可能是和缺少P21蛋白有關(guān)，后者經(jīng)直接或是間接作用提高了癌細(xì)胞具有的增殖活性。所以對(duì)P21蛋白與COX-2表達(dá)的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)掌握子宮內(nèi)膜癌所具有的生物學(xué)行為和對(duì)預(yù)后的判斷具有重要的參考價(jià)值。

[1] 樂(lè)杰.婦產(chǎn)科學(xué) [M].7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:272.

[2] Ioahinee.Immunohistochemical tumour markers in endometrial carcinoma[J].Eur J Gynaecol Oncol,2005,26(4):363-371.

[3] 姜展紅,楊麗,崔娣,等.癌相關(guān)基因蛋白在子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志,2010,24(6):569-571.

[4] Moran EM. Epidemiological and clinical aspects of nonsteroidal antiinflammatory drugs and cancer risks [J].J Environ Pathol Toxicol Oncol,2002 ,21(2):193-220.

[5] Palzzo JP,Mercer WE,Kovatich AJ,et al. Imanohistochemical localization of p21Cipi/Waflin normal, hyperplastic, and uterine tissues[J]. Hum Pathol,1997,28(1):60-66.

[6] 羅雪慧,范余娟,楊開(kāi)選,等.FHIF蛋白和P21蛋白在外陰癌和外陰尖銳濕疣中表達(dá)的研究[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2010,27(1):29-31

[7] 王瓊書(shū),杜鵑,史玉霞,等.子宮內(nèi)膜癌中p21Cipi/Wafl和PCNA蛋白表達(dá)及意義[J ].華南國(guó)防醫(yī)學(xué)雜志,2004,18(6):3-5.

[8] Lambropoulou M, Alexiadis G, Limberis V, et al. Clinicopathologic and prognostic significance of cyclooxygenase-2 expression in endometrial carcinoma[J]. HistolHistopathol, 2005,20(3):753-759.

Expression and significance of Cyclooxygenase-2 and p-21 protein in endometrial cancer

WEI Rui-hong, WU Li-qun, REN Dai-jiao
(Department of Obstetrics and Gynecology, Futian People’s Hospital, Shenzhan 518033, China)

Objective To explore the expression and significance of p-21 and Cyclooxygenase-2 protein in endometrial cancer. Methods Immunohistoche mical SP method was used to detect the expressions of p-21 and Cox-2 protein in 20 cases of normal endometrium (control group ), 9 cases of endometrial atypical hyperplasia (atypical hyperplasia group) and 57 cases of endometrial carcinoma (endometrial cancer group) Results The positive rate of p-21 protein was obviously higher in control group than that in the other group(P＜0.05). The positive rate of Cox-2 protein in control group was obviously lower than that in the other groups(P＜0.05).The positive rate of p-21 protein was significantly different in operation stage ,pathology stage, differentiation degree and lymph metastasis(P＜0.05).The positive rate of Cox-2 protein was significantly different in operation stage, pathology stage, differentiation degree and Myometrial invasion(P＜0.05)In endometrial carcinoma group, the positive rate of p-21 protein was negatively correlated with the high proliferation rate of Cox-2 (r=-0.498, P=0.000) Conclusion The abnormal expressions of p-21 and Cox-2 protein may play an important role in carcinogenesis and development of endometrial cancer.

Endometrial cancer ; p-21 protein ; Cyclooxygenase-2

R737.33

B

1671-8194（2013）22-0046-03