付天靈楊炳烈

（1 內(nèi)蒙古赤峰紅山中醫(yī)院，內(nèi)蒙古 赤峰 024000；2 內(nèi)蒙古赤峰65655部隊(duì)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

青天葵提取液脫色工藝的研究

付天靈1楊炳烈2

（1 內(nèi)蒙古赤峰紅山中醫(yī)院，內(nèi)蒙古 赤峰 024000；2 內(nèi)蒙古赤峰65655部隊(duì)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 赤峰 024000）

青天葵提取液中通常含有較多有色物質(zhì)，使得溶液顏色較深，為后續(xù)純化操作帶來(lái)不便。因此有必要對(duì)青天葵提取液進(jìn)行脫色。通常用于中藥提取液脫色的是粉末狀活性炭，可以將溶液中的有色物質(zhì)吸附在其表面，從而達(dá)到脫色的目的。本文采用活性炭對(duì)青天葵提取液進(jìn)行了脫色研究，考察了活性炭用量、pH值、脫色溫度、脫色時(shí)間等工藝條件對(duì)脫色效果的影響，并用正交實(shí)驗(yàn)考察其最佳脫色條件。確立了最佳的工藝條件為活性炭加入量1.0g/100mL，脫色溫度40℃，提取液pH值為3.0，脫色時(shí)間為30min。

青天葵；脫色；活性炭

青天葵為蘭科植物毛唇芋蘭Nervilia fordii（Hance）Schhr，的干燥全草或塊莖[1]。性平，味苦、甘，歸心、肺、肝經(jīng)。能潤(rùn)肺止咳，清熱解毒，散瘀止痛。主治肺癆咯血，肺熱咳嗽，口腔炎，咽喉腫痛，瘰疬，瘡瘍腫毒，跌打損傷。分布于廣東、廣西、四川、云南等地，在廣東、廣西、港澳及東南亞地區(qū)應(yīng)用較多，也是我國(guó)出口創(chuàng)匯的主要藥材[2-4]。

青天葵中總氨基酸成分為青天葵解熱、抗炎、鎮(zhèn)痛、止咳平喘和提高免疫力等作用的有效成分[5-6]。因此，對(duì)青天葵的氨基酸類成分進(jìn)行研究，對(duì)進(jìn)一步研究其藥理藥效具有重要的意義。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用水提取青天葵所含的氨基酸時(shí)，常伴隨有大量色素物質(zhì)，這些色素的存在，影響氨基酸的進(jìn)一步純化，使其在工業(yè)中的應(yīng)用受到了限制。因此，在提取過(guò)程中須將色素除去?；钚蕴渴鞘称饭I(yè)中廣泛使用的吸附劑。本實(shí)驗(yàn)研究了活性炭對(duì)青天葵提取液脫色效果的影響，并找到了較為理想的工藝參數(shù)。這一研究結(jié)果無(wú)論對(duì)提高青天葵氨基酸的品質(zhì)，還是為其提取液脫色的大規(guī)模應(yīng)用都有一定的意義。

1 儀器與試藥

青天葵藥材為蘭科植物毛唇芋蘭青天葵Nervilia fordii（Hance）Schltr.的全草，干燥、粉碎，過(guò)二號(hào)篩；亮氨酸對(duì)照品；茚三酮（分析純）；Sartorius BP110S 電子天平（德國(guó)）；SartoriusCP225D 電子天平（德國(guó)）；Thermo electron corporation紫外分光光度計(jì)（英國(guó)）；高速中藥粉碎機(jī)；乙醇（分析純）；活性炭（分析純）

2 脫色原理與分析方法

2.1 脫色原理

通常用于中藥提取液脫色的是粉末狀活性炭，具有很強(qiáng)的吸附能力，可以將溶液中的有色物質(zhì)吸附在表面，從而達(dá)到脫色的目的。

2.2 分析方法

①色素含量的測(cè)定及色素除去率的計(jì)算：從脫色前液體和脫色后液體中各取1.00mL，定容至5.00mL，用紫外分光光度計(jì)在色素的最大光吸收處（波長(zhǎng)268nm）測(cè)定其光吸收值。

色素除去率=（脫色前色素吸光度—脫色后色素吸光度）/脫色前色素吸光度（%）。②氨基酸含量的測(cè)定及氨基酸損失率的計(jì)算：從脫色前溶液和脫色后溶液中，分別取2.00mL溶液到25mL容量瓶，再加1.00mLpH 5.0醋酸鈉緩沖液、1.00mL蒸餾水和2.00mL2%茚三酮，100℃水浴加熱19min，用紫外分光光度計(jì)在氨基酸的最大光吸收處（波長(zhǎng)568nm）測(cè)定其光吸收值。氨基酸損失率=（脫色前氨基酸含量—脫色后氨基酸含量）/脫色前氨基酸含量（%）。

3 結(jié)果與討論

3.1 正交試驗(yàn)

根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇脫色pH、活性炭用量、脫色時(shí)間、脫色溫度4項(xiàng)為考察因素，各取3個(gè)水平，進(jìn)行正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)設(shè)定正交實(shí)驗(yàn)的水平和因素，其因素和水平見(jiàn)表1。其中：A為pH；B為活性炭加入量，g；C為脫色時(shí)間，min；D為脫色溫度，℃。其實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2，方差表見(jiàn)表3和4。

各因素的極差R值如表2所示，對(duì)于氨基酸損失率正交表，通過(guò)比較R值的大小可以得出影響氨基酸損失率的因素順序?yàn)椋簆H，活性炭用量，脫色溫度，脫色時(shí)間。經(jīng)方差分析得，因素A和B具有顯著性差異，表明pH和活性炭用量對(duì)青天葵中氨基酸損失率有顯著影響；對(duì)于脫色率正交表，影響色素除去率的因素的順序?yàn)椋簆H，脫色時(shí)間，活性炭用量，脫色溫度。經(jīng)方差分析得，因素A、B和C具有顯著性差異，表明pH、活性炭用量和脫色時(shí)間對(duì)青天葵中氨基酸的提取液的脫色溫度有顯著性影響。

3.2 印證試驗(yàn)

上述各因素水平對(duì)脫色率和氨基酸損失率的影響趨勢(shì)，從直觀分析我們確定脫色最佳工藝條件為A2B2C2D1，即在pH 3.0的條件下，活性炭用量為1.0g/100mL，在40℃脫色30min。按照此實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行脫色實(shí)驗(yàn)，考察脫色條件。活性炭脫色印證實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5所示。

3.3 討論與小結(jié)

實(shí)驗(yàn)分析了脫色溶液pH、活性炭用量、脫色時(shí)間、脫色溫度對(duì)青天葵提取液脫色效果的影響，并通過(guò)正交試驗(yàn)分析得出影響氨基酸損失率的因素順序?yàn)椋簆H，活性炭用量，脫色溫度，脫色時(shí)間；色素除去率的因素的順序?yàn)椋簆H，脫色時(shí)間，活性炭用量，脫色溫度；綜合考慮二因素，最佳的脫色工藝為：脫色pH3.0，活性炭用量1.0g/100mL，脫色溫度40℃，脫色時(shí)間30min。

[1] 國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草,第8冊(cè)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1999:740.

表1 正交試驗(yàn)因素水平表

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 氨基酸損失率方差表

表4 脫色率方差分析

表5 活性炭脫色印證試驗(yàn)

[2] 陳蔚文,徐鴻華.嶺南道地藥材研究[M].廣州:廣東科技出版社, 2007:326-351.

[3] 畢殿洲.藥劑學(xué)[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1999.

[4] 謝月英,譚小明,吳慶華,等.廣西青天葵野生資源現(xiàn)狀[J].廣西植物,2009,29(6):783-787.

[5] 杜勤,葉木榮,王振華,等.青天葵鎮(zhèn)咳、平喘藥理作用研究[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2006,23(1):45-47.

[6] 甄漢深,周燕園,袁口飛,等.青天葵活性部位的體內(nèi)抗腫瘤作用研究[J].中藥材,2007,30(9):1095-1098.

R282.710.3

B

1671-8194（2013）27-0054-02