沈愛(ài)文

(廣州血液中心從化血站，廣東 廣州 510900)

獻(xiàn)血者血液檢測(cè)不合格后追蹤檢測(cè)的分析與應(yīng)用

沈愛(ài)文

(廣州血液中心從化血站，廣東 廣州 510900)

目的 對(duì)HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗體的ELISA單試劑檢測(cè)陽(yáng)性和ALT不合格的獻(xiàn)血者進(jìn)行追蹤檢測(cè)，判斷因檢測(cè)而非獻(xiàn)血者本身原因而暫時(shí)屏蔽的獻(xiàn)血者解除屏蔽的時(shí)間，擴(kuò)大無(wú)償獻(xiàn)血者隊(duì)伍。方法 2008年1月至2012年12月在我站無(wú)償獻(xiàn)血的682名無(wú)償獻(xiàn)血者，對(duì)HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗體單試劑檢測(cè)陽(yáng)性、或ALT不合格者，間隔六個(gè)月后再次抽血進(jìn)行重新追蹤檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，判斷與原來(lái)檢測(cè)結(jié)果的差異性。結(jié)果 追蹤檢測(cè)各項(xiàng)目合格率分別是：HBsAg 31.6% 、抗-HCV 40.1%、抗-HIV為61.1%、抗-TP 為14.2%，ALT為63.3%。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，各檢測(cè)項(xiàng)目追蹤檢測(cè)合格率有高度顯著性差異（P＜0.01）。結(jié)論 通過(guò)對(duì)單試劑檢測(cè)結(jié)果不合格或ALT不合格而暫時(shí)屏蔽的獻(xiàn)血者血液追蹤檢測(cè)，可以減少因HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP抗體的ELISA檢測(cè)假陽(yáng)性或非病理性原因引起的ALT暫時(shí)增高而不合理誤淘汰獻(xiàn)血者，對(duì)建立和擴(kuò)大固定獻(xiàn)血者隊(duì)伍，保護(hù)獻(xiàn)血者熱情，促進(jìn)無(wú)償獻(xiàn)血工作具有重要意義。

HBsAg；抗-HCV；抗-HIV；抗-TP抗體；ALT

根據(jù)我國(guó)目前獻(xiàn)血相關(guān)法律法規(guī)的規(guī)定，對(duì)每一個(gè)無(wú)償獻(xiàn)血者都要用兩種不同廠家的試劑分別進(jìn)行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP、轉(zhuǎn)氨酶（ALT）等傳染病標(biāo)志物及相關(guān)項(xiàng)目檢測(cè)，雙試劑陽(yáng)性獻(xiàn)血者血液直接淘汰，單試劑陽(yáng)性獻(xiàn)血者標(biāo)本則復(fù)檢測(cè)，雙孔復(fù)檢測(cè)陰性則獻(xiàn)血者合格，復(fù)檢測(cè)中只要有一孔呈陽(yáng)性反應(yīng)則淘汰該血[1,2]。對(duì)HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP雙試劑陽(yáng)性的獻(xiàn)血者屏蔽，以后不能獻(xiàn)血，而對(duì)單試劑陽(yáng)性者則在6個(gè)月后復(fù)查再?zèng)Q定是否屏蔽，終止獻(xiàn)血資格。本站從2008年開(kāi)始對(duì)ELISA單試劑陽(yáng)性和ALT 不合格的獻(xiàn)血者6個(gè)月后進(jìn)行復(fù)查，ELISA雙試劑陰性解除屏蔽，雙試劑陽(yáng)性則永久屏蔽。對(duì)ELISA檢測(cè)單試劑陽(yáng)性者6個(gè)月后再?gòu)?fù)查，兩次復(fù)查均陽(yáng)性則屏蔽。而ALT受多種因素影響，故ALT不合格的獻(xiàn)血者可進(jìn)行多次追蹤檢測(cè)，不永久屏蔽。本站自2008年1月至2012年12月期間對(duì)682例ELISA檢測(cè)單試劑陽(yáng)性或ALT不合格獻(xiàn)血者進(jìn)行追蹤檢測(cè)，結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

2008年1月至2012年12月我站無(wú)償獻(xiàn)血者682例，年齡18～55歲。經(jīng)ELISA檢測(cè)為HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP其中一項(xiàng)或一項(xiàng)以上單試劑陽(yáng)性，或ALT不合格者。

表1 ELISA單試劑陽(yáng)性或ALT不合格獻(xiàn)血者追蹤檢測(cè)結(jié)果

1.2 儀器和試劑

瑞士哈密頓公司ML-STAR和TECAN全自動(dòng)加樣儀；FAME 全自動(dòng)酶標(biāo)分析系統(tǒng)；日立7180生化分析儀；Anthos ht 3酶標(biāo)儀、科華酶標(biāo)儀；Itswell實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；HBsAg、抗-HCV ELISA試劑盒為雅培和科華生物工程公司生產(chǎn)，抗-HIV ELISA試劑盒為伯樂(lè)和科華生物工程公司生產(chǎn)，抗-TP ELISA試劑盒為萬(wàn)泰和科華生物工程公司生產(chǎn)，ALT速率法試劑盒為亞太和科華生物工程公司生產(chǎn)，全部試劑批批檢定合格，均在有效期范圍內(nèi)使用。

1.3 方法

682例追蹤檢測(cè)標(biāo)本按原檢測(cè)不合格項(xiàng)目分類檢測(cè)，HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的檢測(cè)用ML-STAR和TECAN全自動(dòng)加樣儀加樣，用FAME 全自動(dòng)酶標(biāo)分析系統(tǒng)進(jìn)行孵育、洗版、加試劑、比色等后處理，用日立7180生化分析儀進(jìn)行ALT檢測(cè)，所有數(shù)據(jù)用Itswell實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)進(jìn)行匯總。所有檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié) 果

ELISA檢測(cè)單試劑陽(yáng)性或ALT不合格獻(xiàn)血者6個(gè)月后追蹤檢測(cè)結(jié)果如表1。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，χ2=168.6，P＜0.01，各項(xiàng)目追蹤檢測(cè)的合格率有顯著性差異。

3 討 論

血液質(zhì)量最主要是指獻(xiàn)血者血液檢測(cè)的質(zhì)量，關(guān)系到獻(xiàn)血者的健康和受血者的輸血安全。根據(jù)衛(wèi)生部的血液檢測(cè)規(guī)定，對(duì)所有應(yīng)用于臨床輸注的獻(xiàn)血者血液的必須進(jìn)行輸血相關(guān)傳染病標(biāo)志物，包括HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP和ALT的檢測(cè)，病原體標(biāo)志物一般用ELISA法檢測(cè)，ALT用速率法或賴氏法檢測(cè)，每個(gè)項(xiàng)目要用兩個(gè)不同廠家的試劑同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性血視為不合格血，應(yīng)進(jìn)行消毒處理，不能用于臨床輸注。

是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)是20世紀(jì)70年代發(fā)明的一種檢測(cè)抗原抗體反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)方法，因其快速、靈敏、特異、簡(jiǎn)單等特點(diǎn)，發(fā)展十分迅速，已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域的檢測(cè)和應(yīng)用研究。但ELISA影響因素多，如試劑質(zhì)量、標(biāo)本因素、體內(nèi)某些內(nèi)源性物質(zhì)（酶）的影響、操作技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照、手工或全自動(dòng)酶免分析儀的運(yùn)行情況等均可影響檢測(cè)結(jié)果。因此，對(duì)于輸血相關(guān)傳染病標(biāo)志物（抗原和抗體）的檢測(cè)有時(shí)出現(xiàn)單試劑陽(yáng)性的情況，要具體問(wèn)題具體分析，不能簡(jiǎn)單將陽(yáng)性結(jié)果獻(xiàn)血者屏蔽或淘汰。單試劑檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果可能跟下面因素有關(guān)：一是獻(xiàn)血者感染病毒或病原體后產(chǎn)生抗體，檢測(cè)時(shí)由于儀器出現(xiàn)故障、或手工操作不當(dāng)或技術(shù)原因可造成檢驗(yàn)結(jié)果的假陽(yáng)性。二是ELISA試劑盒均采用基因工程或合成多肽抗原或抗體包被固相，由于病毒存在變異，尤其是HCV和HIV變異度很高，不同廠家選用的抗原或抗體組合不完全相同，來(lái)源和用量方面也有差異，就造成不同廠家的ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果有差異，經(jīng)常出現(xiàn)同一標(biāo)本這個(gè)廠家試劑做出來(lái)陽(yáng)性，另一廠家試劑做出來(lái)陰性的情況[3]，尤其是弱陽(yáng)性標(biāo)本，另外檢測(cè)原理不一致也可造成這種情況。三是由于假陽(yáng)性引起。標(biāo)本溶血、凝集不全等外源因素、或內(nèi)源性物質(zhì)如類風(fēng)濕因子、高濃度的非特異性免疫球蛋白、嗜靶抗原的自身抗體、類地高辛、類AFP樣物質(zhì)、重乳糜血清、膽紅素、血紅蛋白及血液黏度過(guò)大等均可引起假陽(yáng)性[3,4]。

本研究的追蹤檢測(cè)結(jié)果顯示，各傳染病標(biāo)志物項(xiàng)目單試劑檢測(cè)陽(yáng)性或ALT不合格的獻(xiàn)血者6個(gè)月后血液追蹤檢測(cè)，其合格率有顯著性差異，其中ALT的合格率最高，達(dá)63.3%，這是因?yàn)锳LT影響因素多，大多情況下是由非病理因素引起的，如劇烈運(yùn)動(dòng)、飲酒等。在正常情況下，ALT主要存在于各組織細(xì)胞中，以肝細(xì)胞含量最高，其次為腎臟、心肌、骨骼肌和其它器官，當(dāng)肝臟受損時(shí)，此酶即釋放于血清中，因此血清中含量增加。臨床上將ALT增高作為診斷肝炎的一個(gè)指標(biāo)，但它并不是肝炎的特異性指標(biāo)，一些非病理性因素也會(huì)引起ALT增高，如經(jīng)常大量飲酒，營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩引起肥胖，勞累、服藥、飲食不當(dāng)?shù)?，肌肉劇烈活?dòng)等均可使此酶活性增高[5]。如獻(xiàn)血者是因?yàn)榉遣±硇砸蛩匾鸬腁LT增高，當(dāng)消除該因素后，過(guò)6個(gè)月后再檢測(cè)則很多會(huì)轉(zhuǎn)變?yōu)楹细?。HBsAg、抗-HCV、抗-HIV分別是HBV、HCV、HIV的血清學(xué)標(biāo)志物，三者均為病毒，傳播途徑相同，抗體產(chǎn)生方式也大致相似，ELISA試劑盒檢測(cè)原理相似，均使用一遍進(jìn)口試劑和一遍國(guó)產(chǎn)試劑進(jìn)行檢測(cè)，單試劑陽(yáng)性者6個(gè)月后追蹤檢測(cè)其合格率無(wú)顯著性差異。抗-TP是梅毒螺旋體的抗體，6個(gè)月后追蹤檢測(cè)其合格率最低。

對(duì)于ELISA檢測(cè)單試劑陽(yáng)性的獻(xiàn)血者6個(gè)月后追蹤檢測(cè)仍為單試劑陽(yáng)性的情況，有多種原因：可能仍為假陽(yáng)性結(jié)果引起?；蚴谦I(xiàn)血者感染了弱病毒株[6]，一般情況下如獻(xiàn)血者感染病原體而出現(xiàn)ELISA單試劑陽(yáng)性時(shí)，6個(gè)月后檢測(cè)大多數(shù)仍為雙試劑陽(yáng)性反應(yīng)，但如感染了弱病毒株，則病程進(jìn)展緩慢，產(chǎn)生可檢測(cè)的抗原或抗體量少，6個(gè)月后檢測(cè)仍可能為單試劑陽(yáng)性，本研究中各個(gè)項(xiàng)目都有6個(gè)月后檢測(cè)仍為單試劑陽(yáng)性的情況。

通過(guò)對(duì)ELISA檢測(cè)單試劑陽(yáng)性或ALT不合格獻(xiàn)血者的追蹤檢測(cè)，可以減少因?yàn)镋LISA假陽(yáng)性或非病理性因素引起的ALT增高而被誤淘汰的獻(xiàn)血者，既保證了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，不漏檢任何一個(gè)陽(yáng)性標(biāo)本，保證用血者輸血安全，也不輕易誤淘汰任何一個(gè)熱情的獻(xiàn)血者，對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血工作具有重要意義。

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1671-8194（2013）20-0095-02