葉 斌王西川雷 蕾游莉斯

（1 成都市第六人民醫(yī)院腫瘤科，四川 成都 610051；2 成都市第六人民醫(yī)院病理科，四川 成都 610051）

p53和Ki67在胃癌中的表達及其臨床意義

葉 斌1王西川2雷 蕾1游莉斯1

（1 成都市第六人民醫(yī)院腫瘤科，四川 成都 610051；2 成都市第六人民醫(yī)院病理科，四川 成都 610051）

目的 探討p53蛋白、Ki67在慢性胃炎和胃癌中的表達及意義。方法 采用免疫組化法分別對58例胃癌，20例胃炎，進行了p53蛋白和Ki67的檢測。結(jié)果 ①胃癌組織中p53蛋白、Ki67的陽性表達率分別為31.03%（18/58）、70.69%（41/58），均顯著高于胃炎組織，差異均有統(tǒng)計學意義（P=0.042，P=0.005）。②在胃癌組織中p53蛋白的陽性表達與胃癌的臨床分期、浸潤深度、和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關（P＜0.05），與組織學分化程度無關(P ＞0.05)；胃癌中Ki67的表達陽性率與胃癌的臨床分期和浸潤深度有關（P＜0.05），與組織學分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(P＞0.05)。③p53蛋白和Ki67共同陽性者14例，共同陰性者14例，相關性分析顯示，二者之間呈正相關（r=0.372，P =0.004）。結(jié)論 p53蛋白和Ki67在胃癌中的表達明顯升高，可作為判斷胃癌惡性程度及預后的重要參考指標。

胃癌；p53蛋白；Ki67

胃癌是最常見的惡性腫瘤之一。胃癌標志物的檢測可反映腫瘤的生物學特性，對診斷、治療及預后具有重要意義。p53基因是重要的抑瘤基因，分為野生和突變兩種亞型，是細胞增生的主要負調(diào)控子，該基因的突變或缺失是導致許多腫瘤發(fā)生的原因。Ki67是1種細胞增殖核抗原，其表達與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移有關。本研究采用免疫組化方法檢測慢性胃炎和胃癌組織中p53蛋白和Ki67表達情況，以探討其臨床意義。

表2 胃癌組織中p53和Ki67蛋白表達與臨床病理特征的關系[n（%）]

表1 胃癌組織和胃炎組織中p53和Ki67蛋白的表達[n（%）]

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院普外科2007年4月至2012年4月的58例胃癌手術標本，其中男性33例，女性 25例，年齡32～84歲，中位年齡60歲；同時收集慢性胃炎手術標本20例用于對照，其中男性11例，女性9例，年齡37～81歲，中位年齡63歲。標本均經(jīng)組織病理確診；患者術前均未接受過放化療。胃癌患者臨床分期按2007版AJCC頒布的胃癌TNM分期標準：Ⅰ期9例，Ⅱ期20例，Ⅲ期22例，Ⅳ期7例。胃癌分化程度：高分化腺癌5例，中分化腺癌19例，低分化腺癌34例。胃癌浸潤深度：浸潤達漿膜層者28例，浸潤未達漿膜層者30例。周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況：發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者39例，未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者19例。

1.2 方法

采用免疫組化PV-9000法。所有抗體均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。石蠟包埋，制成4μm厚的切片。脫蠟、水化組織切片；高壓鍋抗原熱修復；3%H2O2去離子水孵育以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶；滴加一抗，4℃過夜；PBS沖洗，滴加聚合酶輔助劑，37℃孵育20 min；PBS沖洗后滴加辣根酶標記山羊抗小鼠IgG多聚體，37℃孵育30 min；應用DAB溶液顯色；自來水沖洗、復染、脫水、透明、封片。

1.3 結(jié)果判斷

于顯微鏡下觀察，每例觀察2張切片，每張切片隨機選擇10個高倍視野，每個視野計數(shù)100個腫瘤細胞，取其平均值為細胞的陽性率。p53的結(jié)果判斷：細胞核呈現(xiàn)清晰的棕黃色顆粒為陽性，按陽性細胞所占的比例及顯色深度分為，陽性細胞數(shù)所占比例＜10 %為陰性(-)；10 %～25 %為弱陽性(+)，顯色淺，顆粒細；26%～50%為中度陽性(++)，顯色較深；＞50%為強陽性(+++)，顯色深，顆粒粗。Ki67的結(jié)果判斷：與p53同。

1.4 統(tǒng)計處理

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗和相關性分析。

2 結(jié) 果

2.1 癌組織與胃炎組織中p53和Ki67的表達及比較

免疫組化結(jié)果顯示，p53蛋白和Ki67主要表達于細胞核。 58例胃癌標本中p53蛋白和Ki67表達陽性率分別為31.03%（18/58）和70.69%（41/58）；20例慢性胃炎標本中p53蛋白和Ki67表達陽性率分別為5.0%（1/20）和35.0%（7/20）；兩者比較，差異有統(tǒng)計學意義（表1）。

2.2 胃癌組織中p53和Ki67蛋白表達與臨床病理特征的關系

58例胃癌中，p53蛋白的陽性表達與臨床分期、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關（P＜0.05），與組織學分化程度無關（P＞0.05）。Ki67的陽性表達與組織學分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關（P＞0.05）；但與臨床分期和浸潤深度有關（P＜0.05）（表2）。

2.3 胃癌組織中p53和Ki67蛋白表達之間的關系

58例胃癌中，p53和Ki67蛋白同為陽性者14例，同為陰性者14例，二者之間呈顯著相關（r=0.372，P=0.004），見表3。

表3 p53和Ki67在胃癌組織中表達的相關性分析(例)

3 討 論

P53基因是1個非常重要的抑癌基因。它與細胞周期蛋白（cyclins）結(jié)合形成復合體，抑制依賴細胞周期蛋白的相關激酶（CDKs）活性，使細胞停滯在G1期或引起細胞程序性死亡[1]。P53基因大約有50%[2]的突變率，當P53基因發(fā)生突變時，可導致穩(wěn)定的蛋白質(zhì)不能完成抑制細胞增殖的作用，并且促進細胞惡性轉(zhuǎn)化，使P53基因由抑癌基因轉(zhuǎn)為原癌基因[3]。Kamal等[4]研究發(fā)現(xiàn)，突變型P53的表達與患者的預后有關。

本研究結(jié)果顯示，P53蛋白在胃癌組織的陽性表達率為31.03%，明顯高于胃炎組織，結(jié)果與古吉敏等[5]相符。陸曉峰等[6]報道，P53蛋白與腫瘤的浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈不同程度的正相關（P＜0.05），本研究結(jié)果與上述報道相符。而且蛋白P53在Ⅲ、Ⅳ期的陽性表達顯著高于Ⅰ期和Ⅱ期(P＜0.05)。上述結(jié)果提示P53突變與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，惡性細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關。

Ki67是應用最廣泛的增殖細胞標志之一，在細胞凋亡中S、G2、M期均有表達，主要定位于細胞核，在有絲分裂中起著維持DNA結(jié)構的重要作用[7]。Ki67與胃癌細胞凋亡和增殖相關，可作為胃癌患者一個獨立的預后因素，Ki67高表達的胃癌患者存活率較低[8]。

本組病例中，結(jié)直腸腺癌Ki67的陽性表達率高于胃炎（P ＜0.05）。Ki67的陽性表達在不同臨床分期和浸潤深度的胃癌標本中差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。而在胃癌的不同組織學類型組、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。提示Ki67對鑒別診斷腺癌和胃炎有重大意義。有學者研究指出：癌細胞分化程度越低，以及伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Ki67表達越強[9,10]。本結(jié)果似有不同，有待進一步研究。

綜上所述，胃癌中P53及Ki67基因表達上調(diào)，與胃癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關，將兩者作為生物標志物進行聯(lián)合檢測，有利于對胃癌患者惡性程度及預后的評估。

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Expression of p53, Ki67 in Gastric Carcinoma and Clinical Significances

YE Bin1, WANG Xi-chuan2, LEI Lei1, YOU Li-si1
(
1 Department of Oncology, Sixth People's Hospital of Chengdu, Chengdu 610051, China; 2 Department of Pathology, Sixth People's Hospital of Chengdu, Chengdu 610051, China)

Objective To investigate the expression of protein p53 and Ki67 in gastric carcinoma and its prognostic significance. Methods The expression of p53 and Ki67 in gastric carcinoma of 58 cases and chronic gastritis of 20 cases were detected through immunohistochemistry, respectively. Results ①The expression rate of protein p53 and Ki67 in 58 cases of gastric carcinoma were 31.03%(18/58)and 70.69%(41/58), respectively, which were significantly higher than that in chronic gastritis.(P=0.042, P=0.005). ②Ingastric carcinoma, the expression of protein p53 was significantly associated with the.depth of invasion(P=0.000), lymph node metastasis(P=0.018) and clinical staging(P=0.001). It was not associated with the degree of differentiation(P＞0.05). The expression of Ki67 was significantly associated with the depth of invasion(P=0.015) and clinical staging(P=0.043). But it was not associated with the degree of differentiation and lymph node metastasis(P＞0.05). ③The positive expression of protein p53 and Ki67 were 31.03% and 70.69%, respectively, in which co-positive in 14 cases and the co-negative in 14 cases. The protein p53 was correlated with the Ki67 expression(r=0.372, P=0.004). Conclution The expression of p53 and Ki67 were higher in the gastric carcinoma than that in chronic gastritis. Therefore, the detection of protein p53 and Ki67 expression could be used as biomarkers to predict the degree of malignancy and prognosis of gastric carcinoma.

Gastric carcinoma; Protein p53; Ki67

R735.2

B

1671-8194（2013）20-0069-03