肖 明 趙學堂

（壽光市皮膚病醫(yī)院，山東 壽光 262700）

CyclinD1在皮膚鱗狀細胞癌中的表達及意義

肖 明 趙學堂

（壽光市皮膚病醫(yī)院，山東 壽光 262700）

目的 探討 cyclinD1 在皮膚鱗狀細胞癌中的異常表達及與生物學行為的關系。方法 應用免疫組化 PV9000 法檢測 52 例皮膚鱗狀細胞癌中 p16 和 cyclinD1 的表達水平。結果 52 例皮膚鱗狀細胞癌中 cyclinD 的陽性表達率為 67.3%。結論 cyclinD1 的異常表達在皮膚鱗狀細胞癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，可作為判斷惡性程度，評估預后的指標。

鱗狀細胞癌；免疫組織化學；cyclinD1

皮膚鱗狀細胞癌是皮膚科常見惡性腫瘤。腫瘤的發(fā)生發(fā)展是一個多步驟的過程，是多種癌基因的激活和抑癌基因的失活或缺失、細胞凋亡基因表達的紊亂導致的。CyclinD1是作為細胞周期重要的正調控因子，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用[1]本研究采用免疫組化技術，本研究采用免疫組化PV9000法檢測皮膚鱗狀細胞癌組織和正常皮膚組中CyclinD1表達情況，試圖探討其表達與臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2006年～2011年壽光市皮膚病醫(yī)院病理科保存的活檢或手術石蠟標本，經(jīng)2名病理醫(yī)師HE染色確定為皮膚鱗狀細胞癌。共46例，其中男20例，女26例；年齡41～70歲，平均60.3歲。按Broders 病理分級法將其分為：G1是13例、G2是24例、G3是15例。對照組是15例正常的皮膚組織，來自皮膚活檢術或者是外科手術中皮損皮膚的切除部分。

1.2 方法

1.21 使用的主要試劑有：鼠抗人單克隆CyclinD1抗體、PV9000免疫組化試劑盒、EAB顯色試劑盒、PBS緩沖液均購于北京中杉金橋生物試劑公司。

1.2.2 免疫組織化學方法：嚴格按照PV9000試劑盒的步驟順序進行。實驗時用已經(jīng)明確知道的CyclinD1陽性的前列腺的組織切片作為實驗時的陽性對照，而用PBS作為實驗的陰性對照。

1.2.3 結果判斷的標準：觀察細胞的細胞核內(nèi)如果出現(xiàn)綜褐色或者是棕黃色的顆粒就可以判斷為陽性。

1.2.4 判斷的標準主要有：隨機選擇顯微鏡下的5個獨立的高倍視野，觀察視野內(nèi)陽性的細胞所占的比例進行判斷，其中①無表達，即全部細胞都沒有著色，用（-）表示；②低表達，即染色的陽性細胞所占的百分比N＜25%，用（+）表示；③中度表達，即染色的陽性細胞所占的百分數(shù)N，25%＜N＜50%，用（+ +）；④高表達，即染色的陽性細胞所占的百分數(shù)N＞50%，用（+++）表示。3對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計：采用SPSS17統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計，P值＜0.05差別具有統(tǒng)計學意義。結果CyclinD1在正常的細胞染色比較淺，陽性表達為17%；CyclinD1在鱗癌組織細胞中染成棕黃色，陽性表達為25%，陽性細胞散在的分布在組織中?？梢姡珻yclinD1在正常細胞中的表達遠遠少于在鱗癌細胞中的表達，差異具有統(tǒng)計學的意義。CyclinD1在鱗癌組織中的表達與年齡無關，與不同病理分級有關，隨著病理分級的逐漸升高，著色強度增加，陽性表達率升高。見表1所示。

表1 CyclinD1在正常皮膚及皮膚鱗癌組織中的表達

3 討 論

cyclinD1 是一種細胞周期素D，它的作用是可以與CDK4相結合，活化CDK4。而被活化以后的CDK4能夠使Rb蛋白發(fā)生磷酸化，從而能夠進一步促使轉錄基因E2F發(fā)生解離，讓細胞由G1期進入S期[2]。本研究顯示CyclinD1主要在皮膚鱗癌組織的細胞核中表達，其陽性表達率較正常對照組高，差異有統(tǒng)計學意義，表明CyclinD1在皮膚鱗癌組織中有促進細胞增殖惡化作用，與皮膚鱗癌的發(fā)生相關。CyclinD1作為細胞周期中重要的調控因子，其基因多態(tài)性的不同對腫瘤的形成有不同的影響[3,4]。通過本次研究得出以下結果：cyclinD1在正常的組織細胞中是低表達，細胞著色比較淺；而在鱗癌組織中表達明顯增加，著色較深。這說明：cyclinD1對于鱗癌的形成具有一定的促進作用。在病理上cyclinD1表達的分級在G1、G2、G3間有顯著性差異（P＜0.05），低分化鱗癌（93.3%）明顯高于高分化鱗癌（46.2%）及中分化鱗癌（66.7%），研究與沈金翠等[5]研究結果一致。本研究提示cyclinD1異常表達可作為腫瘤分化程度和預后的評價指標之一。

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[5]沈金翠,李靈.PTEN,Ki-67和CyclinD1在皮膚鱗狀細胞癌中的表達及意義[J].中國皮膚性病學雜志,2012,26(8):674-678.

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