王笑田,劉鳴韜

（1.河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453002；2.河南科技學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453003）

代森錳鋅和烯酰嗎啉對黃瓜霜霉病菌的藥劑敏感性測定

王笑田1,劉鳴韜2

（1.河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453002；2.河南科技學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453003）

測定了代森錳鋅、烯酰嗎啉及其不同配比對黃瓜霜霉病菌的敏感性.結(jié)果表明：各藥劑處理對黃瓜霜霉病菌的孢子囊萌發(fā)均有一定的抑制作用,且隨濃度升高抑制效果愈加顯著.各配方組合的共毒系數(shù)均大于100,兩者組合具有增效作用,其中以60%代森錳鋅+9%烯酰嗎啉組合效果最佳,增效作用明顯,EC50達到42.57mg/L.

代森錳鋅；烯酰嗎啉；黃瓜霜霉病菌；藥劑敏感性

黃瓜霜霉病是一種世界性病害.我國各地都有發(fā)生,露地和保護地栽培的黃瓜均受害嚴(yán)重.該病害由古巴假霜霉菌[Pseudoperonospora cubensis]引起[1-3].長期以來化學(xué)防治一直作為控制該病害的重要措施,但由于以甲霜靈為代表的酰胺類內(nèi)吸性殺菌劑長期大量使用和農(nóng)藥濫用,導(dǎo)致田間霜霉病菌的抗性菌株和殘留普遍存在[4-6].

代森錳鋅（mancozeb）是廣譜的保護性殺菌劑,主要用于多種作物的真菌性葉部病害防治,常與內(nèi)吸殺菌劑混配,以延緩抗藥性的產(chǎn)生,僅有來自土耳其南部溫室蔬菜上的幾株灰霉菌產(chǎn)生明顯抗性[7-8].烯酰嗎啉（dimethomorph）由G.Albert1988年首次報道后,1993年殼牌公司首先推向市場,主要用于蔬菜真菌病害的防治,具有良好的保護作用和抗孢子形成活性,能夠抑制卵菌綱真菌細胞壁的形成[9-11].本文測定了黃瓜霜霉病菌對代森錳鋅、烯酰嗎啉及其不同配比的藥劑敏感性,以期篩選出適合的配方組合,為黃瓜霜霉病的化學(xué)防治提供參考.

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

98.5 %代森錳鋅原藥,95%烯酰嗎啉原藥,均由河南銀田精細化工有限公司提供.

1.2 供試菌種及其制備

供試菌種為黃瓜霜霉病菌（古巴假霜霉菌）.在試驗地采集新鮮黃瓜霜霉病病葉,用清水充分沖洗,并經(jīng)組織表面消毒后,置于20℃恒溫箱中保濕培養(yǎng)36 h,使其產(chǎn)生大量的孢子囊.然后用4℃的無菌水將黃瓜病葉上的孢子囊洗脫,配制成每mL含1×105個孢子囊的懸浮液.黃瓜品種為新世紀(jì)（市售）.

1.3 試驗設(shè)置

供試原藥均以丙酮為溶劑配制成質(zhì)量濃度為1×104mg/L的母液,儲存于4℃冰箱中備用.然后用無菌水稀釋至所需質(zhì)量濃度.在預(yù)備試驗的基礎(chǔ)上,供試藥劑均按有效成分設(shè)5個劑量.其中,代森錳鋅設(shè)：50、100、200、400、800mg/L 5個質(zhì)量濃度,烯酰嗎啉設(shè)5、10、20、40、80mg/L 5個質(zhì)量濃度.代森錳鋅和烯酰嗎啉混配設(shè)5個不同的配方：①代森錳鋅∶烯酰嗎啉=66%∶3%；②代森錳鋅∶烯酰嗎啉=63%∶6%；③代森錳鋅∶烯酰嗎啉=60%∶9%；④代森錳鋅∶烯酰嗎啉=57%∶12%；⑤代森錳鋅∶烯酰嗎啉=54%∶15%.5個配方均配成10、20、40、80、160mg/L 5個質(zhì)量濃度.并以蒸餾水為空白對照.

1.4 試驗方法

將配制好的各處理試驗藥劑10mL分別倒入培養(yǎng)皿中,加入孢子囊懸浮液,置于20℃恒溫箱中培養(yǎng)24 h.攪動孢子懸浮藥液,取1滴孢子懸浮藥液于載玻片上,加蓋玻片,在顯微鏡下隨機觀察10個視野,每視野隨機檢查10個孢子囊（100個）,記載孢子囊數(shù)、萌發(fā)孢子囊數(shù)和未萌發(fā)孢子囊數(shù).重復(fù)3次,計算校正抑制率.

1.5 數(shù)據(jù)處理

將藥劑濃度轉(zhuǎn)換成劑量對數(shù),作為自變量（X）,將相應(yīng)的校正抑制率轉(zhuǎn)換成機率值,作為依變量（Y）,用最小二乘法建立回歸方程.求出毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)和EC50、EC90等.按孫云沛等[12]的方法以代森錳鋅為標(biāo)準(zhǔn)藥劑,計算單劑的毒力指數(shù)和混劑的共毒系數(shù).

2 結(jié)果與分析

2.1 兩種單劑對黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)的抑制作用

將代森錳鋅和烯酰嗎啉兩種單劑的質(zhì)量濃度轉(zhuǎn)換為濃度對數(shù),校正抑制率轉(zhuǎn)換為機率值,求其毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)和EC50、EC90等.兩種單劑對黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)抑制作用的回歸分析見表1和表2.

表1 代森錳鋅不同劑量抑制孢子囊萌發(fā)效果及回歸分析Tab.1 Inhibiting effectofdifferentdosesofmancozeb to sporangium germination and regression analysis

表2 烯酰嗎啉不同劑量抑制孢子囊萌發(fā)效果及回歸分析Tab.2 Inhibitingeffectofdifferentdosesofdimethomorph to sporangium germination and regression analysis

由表1和表2可知,代森錳鋅和烯酰嗎啉抑制黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)的EC50分別為148.98mg/L和15.19mg/L,EC90分別為457.94mg/L和55.27mg/L,代森錳鋅對黃瓜霜霉病菌的抑制作用要明顯優(yōu)于烯酰嗎啉.

2.2 兩種單劑混配對黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)的抑制作用

代森錳鋅和烯酰嗎啉按不同比例混配后對黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)抑制作用的回歸分析見表3.

表3 不同配方抑制孢子囊萌發(fā)效果及回歸分析Tab.3 Inhibitingeffectofdifferent formulation to sporangium germination and regression analysis

由表3可知,代森錳鋅和烯酰嗎啉按不同配方混配后,對黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)的抑制作用存在明顯差異,配方⑤抑制作用最強,EC50為40.26mg/L,配方①抑制作用最弱,EC50為78.84mg/L.混劑對黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)的抑制作用隨著烯酰嗎啉比例的增大而逐漸增強.

2.3 不同配方的共毒系數(shù)

以代森錳鋅為標(biāo)準(zhǔn)藥劑,計算各配方的實際毒力指數(shù)、理論毒力指數(shù)和共毒系數(shù),結(jié)果見表4.

表4 不同配方的共毒系數(shù)Tab.4 Co-toxicity coefficientsofeach treatment

由表4可知,各配方組合的共毒系數(shù)均大于100,說明代森錳鋅和烯酰嗎啉的不同組合均具有增效作用.其中,以配方③（60%代森錳鋅+9%烯酰嗎啉）共毒系數(shù)最大,增效作用最明顯,其對黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)的EC50為42.57mg/L,為最優(yōu)配方.

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果表明,代森錳鋅、烯酰嗎啉及其各個配方組合對黃瓜霜霉病菌的孢子囊萌發(fā)均有一定的抑制作用,各配方組合的共毒系數(shù)均大于100,兩者組合具有增效作用,其中以60%代森錳鋅+9%烯酰嗎啉組合效果最佳,增效作用最為明顯,其對黃瓜霜霉病菌孢子囊萌發(fā)的EC50達到42.57mg/L.關(guān)于其在田間的藥效及使用劑量等尚需進一步試驗.

代森錳鋅和烯酰嗎啉是菜田常用的殺菌劑品種,農(nóng)藥殘留問題在許多蔬菜中普遍存在,在實際使用中要注意用藥劑量和安全間隔期.同時注意不同作用機理的殺菌劑交替使用,以延緩抗藥性的產(chǎn)生.

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（責(zé)任編輯：鄧天福）

Drug sensitivity ofmancozeb and dimethomorph to Pseudoperonospora cubensis

Wang Xiaotian1,Liu Mingtao2
（1.Collegeof Life Science,Henan NormalUniversity,Xinxiang453002,China；2.Henan Instituteof Scienceand Technology,Xinxiang453003,China）

The sensitivity ofmancozeb,dimethomorph and their different formulations to Pseudoperonospora cubensis was determined.The results showed that the various chemical treatments on germination of sporangia have a certain inhibition and the inhibiting effect can be even more significant as the concentration increases.The co-toxicity coefficients of each formulation are above 100,and the combination of these two drugs has synergism,and the combination of 60%mancozeb and 9%dimethomorph is the best,EC50can reach 42.57mg/L.

mancozeb；dimethomorph；Pseudoperonospora cubensis；sensitivity to fungicides

S436.421.1+1

A

1008-7516（2013）04-0026-04

10.3969/j.issn.1008-7516.2013.04.007

2013-06-25

河南省科技攻關(guān)項目(122102110114）

王笑田(1991-）,女,河南獲嘉人.主要從事微生物學(xué)研究.

劉鳴韜(1966-）,男,河南獲嘉人,教授,碩士生導(dǎo)師.主要從事植物病害綜合治理研究.