李穎華 ，馬玉樊 ，王 熒 ，張志剛 ，張 宏 ，盧婷利 ，陳 濤 ，3

(1.西北工業(yè)大學(xué)明德學(xué)院，陜西 西安 710124;2.西北工業(yè)大學(xué)生命學(xué)院，陜西 西安 710072;3.陜西脂質(zhì)體工程技術(shù)研究中心，陜西 西安 710075)

青霉素鈉、頭孢唑林鈉是臨床常用的抗生素，使用時(shí)大多以葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液等溶劑進(jìn)行溶解，且以葡萄糖注射液為主，因其除起溶劑作用外還能為患者提供能量。但一些危重患者對(duì)葡糖糖的代謝機(jī)能受損，持續(xù)滴注葡糖糖注射液會(huì)造成高血糖癥，甚至酸中毒[1]。脂肪乳注射液是一種胃腸外能量補(bǔ)給劑，具有良好的生物相容性，且對(duì)于危重患者能被優(yōu)先吸收利用[2]。它以大豆油為主要成分，以精制卵磷脂為乳化劑、甘油為等滲劑，經(jīng)高壓均質(zhì)而成[3]，臨床上廣泛用于危重患者手術(shù)前后的能量供給、營(yíng)養(yǎng)支持及改善腫瘤患者對(duì)化學(xué)治療、放射治療的耐受性[4－6]?；谥救榈闹T多臨床優(yōu)點(diǎn)，若其可與抗生素配伍使用，則既具有效兼顧治療和防治感染又能提供身體恢復(fù)所需營(yíng)養(yǎng)和能量的雙重功效，更好地滿足臨床上一些危重患者的需求。因此，本試驗(yàn)中模擬臨床用法，建立了檢則這兩種常用抗生素分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍時(shí)含量的方法，同時(shí)考察了配伍后24 h內(nèi)兩種抗生素的含量變化，結(jié)果其配伍后穩(wěn)定性良好，粒徑、電位與pH均不發(fā)生改變，對(duì)體內(nèi)外抑菌效果也無(wú)影響[7－8]，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Waters 2695型高效液相色譜儀;Waters 2996型紫外檢測(cè)器;Waters 717型自動(dòng)進(jìn)樣器;Waters Millennium色譜工作站;TG16A－WS型臺(tái)式高速離心機(jī);德國(guó)Sartorius pH計(jì)。注射用青霉素鈉(華北制藥有限公司，批號(hào)為S0911316);注射用頭孢唑林鈉(石藥集團(tuán)中諾藥業(yè)＜石家莊＞有限公司，批號(hào)為100208018);10%，20%，30%脂肪乳(西安力邦制藥有限公司，批號(hào)分別為1003171，1003083，0910093);乙腈為色譜純，磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈉、枸櫞酸均為分析純，水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

青霉素鈉:色譜柱為Agilent HC C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相為 0.1 moL/L 磷酸二氫鉀溶液(pH=2.5)－乙腈(70 ∶30)，流速 1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為 225 nm，柱溫為 25 ℃，進(jìn)樣量為 20 μL。

頭孢唑林鈉:色譜柱為Agilent HC C18柱(250 mm ×4.6 mm，5μm)，流動(dòng)相國(guó)磷酸氫二鈉－枸櫞酸水溶液(各3.8×10－3mol/L)－乙腈(88 ∶12)，流速為 1.0 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)為 254 nm，柱溫為25 ℃，進(jìn)樣量為 10 μL。

2.2 干擾試驗(yàn)

青霉素鈉:將注射用青霉素鈉按擬訂的流動(dòng)相稀釋成質(zhì)量濃度為0.2 g/mL的供試品溶液，用0.22 μm的濾膜過(guò)濾后待用。分別精密吸取10%，20%，30%脂肪乳注射液100 μL，置1 mL的離心管中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻后置離心機(jī)中8000 r/min離心30 min，取下層澄清溶液用0.22 μm濾膜過(guò)濾，備用。將注射用青霉素鈉分別與10%，20%，30%的脂肪乳配伍，質(zhì)量濃度為1 g/L。將配伍后的溶液各精密吸取100 μL，置1 mL的離心管中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻后置離心機(jī)中8 000 r/min下離心30 min，取下層澄清溶液用0.22 μm濾膜過(guò)濾，備用。將上述待測(cè)液按擬訂色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果青霉素鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍后的色譜圖相同;10%、，20%，30%脂肪乳的色譜圖相同。其中青霉素鈉、10%脂肪乳及青霉素鈉與10%脂肪乳配伍后的色譜圖見(jiàn)圖1?？梢?jiàn)，10%，20%，30%脂肪乳對(duì)脂肪乳中青霉素鈉的檢測(cè)無(wú)干擾。

圖1 青霉素鈉干擾試驗(yàn)高效液相色譜圖

頭孢唑林鈉:將注射用頭孢唑林鈉按擬訂的流動(dòng)相稀釋成質(zhì)量濃度為0.1 g/L的供試品溶液，0.22 μm濾膜過(guò)濾后待用。分別精密吸取10%，20%，30%脂肪乳注射液100 μL，置1 mL的離心管中，加2.1.2項(xiàng)下的流動(dòng)相至刻度，搖勻后置離心機(jī)中8 000 r/min離心30 min，取下層澄清溶液用0.22 μm濾膜過(guò)濾，備用。將注射用頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍，質(zhì)量濃度為1 g/L。將配伍后的溶液各精密吸取100 μL，置1 mL的離心管中，加擬訂的流動(dòng)相至刻度，搖勻后置離心機(jī)中8 000 r/min離心30 min，取下層澄清溶液用0.22 μm濾膜過(guò)濾，備用。將上述待測(cè)液按擬訂色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍后的色譜圖相同;10%，20%，30%脂肪乳的色譜圖相同。其中頭孢唑林鈉、10%脂肪乳及頭孢唑林鈉與10%脂肪乳配伍后的色譜圖見(jiàn)圖2?？梢?jiàn)，10%，20%，30%脂肪乳對(duì)頭孢唑林鈉的檢測(cè)無(wú)干擾。

圖2 頭孢唑林鈉干擾試驗(yàn)高效液相色譜圖

2.3 線性關(guān)系考察

青霉素鈉:精密稱取注射用青霉素鈉9.6 mg，用流動(dòng)相溶解并制成質(zhì)量濃度為 9.6，4.8，2.4，1.2，0.6，0.3，0.15，0.07 5，0.037 5，0.018 7 g/L 的溶液，進(jìn)樣測(cè)定，將峰面積(A)與藥物濃度(C)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 A=177 490 C+11 142，r=0.999 8。結(jié)果表明，青霉素鈉質(zhì)量濃度在 0.075 ～4.8 g/L 范圍與峰面積呈良好線性關(guān)系。

頭孢唑林鈉:精密稱取頭孢唑林鈉16 mg，用流動(dòng)相溶解并制成質(zhì)量濃度為 16，8，4，2，1，0.5，0.25，0.125，0.062 5，0.031 3，0.015 6，0.007 8，0.003 9，0.001 9 g/L 的溶液，進(jìn)樣測(cè)定，將峰面積(A)與藥物質(zhì)量濃度(C)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為 A=1×106C －98 555，r=0.999 8。結(jié)果表明，頭孢唑林鈉質(zhì)量濃度在0.007 8～8.0 g/L范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系。

2.4 加樣回收試驗(yàn)

精密量取已知含量的各配伍液，準(zhǔn)確加入高、中、低3種不同質(zhì)量濃度的各溶液，測(cè)定峰面積(A)，分別代人各自回歸方程計(jì)算含量。結(jié)果見(jiàn)表1和表2。結(jié)果表明，青霉素鈉及頭孢唑林鈉的檢測(cè)方法準(zhǔn)確可靠。

2.5 精密度試驗(yàn)

分別取1.0 g/L青霉素鈉溶液及1.0 g/L頭孢唑林鈉溶液，按擬訂色譜條件和方法，連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣6次，以峰面積考察進(jìn)樣精密度。結(jié)果青霉素鈉平均峰面積為188 412，頭孢唑林鈉平均峰面積為1 432，表明進(jìn)樣精密度良好。

青霉素鈉:取青霉素鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳的配伍液，在 4 ℃和 25 ℃條件下，分別于 0，2，4，6，24 h 時(shí)取樣，按擬訂項(xiàng)下色譜條件檢測(cè)并記錄峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算青霉素鈉的含量，其含量及隨時(shí)間變化情況見(jiàn)表3。經(jīng)SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)分析，這些含量間的變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 青霉素鈉加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

表2 頭孢唑林鈉加樣回收試驗(yàn)結(jié)果(n=6)

表3 青霉素鈉與脂肪乳配伍后24 h內(nèi)的含量變化(%)

頭孢唑林鈉:取頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳的配伍液，在 4℃和 25℃條件下，分別于 0，2，4，6，24 h時(shí)取樣，按擬訂色譜條件檢測(cè)并記錄峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算頭孢唑林鈉的含量，其含量及隨時(shí)間變化情況見(jiàn)表4。經(jīng)SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)分析，這些含量間的變化并差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表4 頭孢唑林鈉與脂肪乳配伍后24 h內(nèi)的含量變化(%)

3 討論

注射用青霉素鈉、注射用頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍后24 h內(nèi)配伍液的外觀、pH及粒徑均無(wú)明顯變化，表明青霉素鈉、注射用頭孢唑林鈉與脂肪乳配伍不會(huì)引起脂肪乳變性，配伍后24 h內(nèi)未出現(xiàn)漂油和破乳現(xiàn)象。經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)藥物含量沒(méi)有因?yàn)榕c脂肪乳配伍而產(chǎn)生變化，并未出現(xiàn)其他吸收峰，表明抗生素沒(méi)有發(fā)生降解。配伍后脂肪乳和藥物都非常穩(wěn)定。體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明，青霉素鈉與頭孢唑林鈉分別與10%，20%，30%脂肪乳配伍后對(duì)藥物的抑菌作用均無(wú)影響[7－8]。

本研究為脂肪乳的應(yīng)用提供了一個(gè)新思路，其既保持了本身的補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)功能又能用作抗生素的溶劑。這樣，既可避免葡萄糖注射液溶解抗生素用于危重患者所帶來(lái)的副作用，還可為患者提供足夠的營(yíng)養(yǎng)支持，改善患者的淋巴細(xì)胞活性，有助于患者康復(fù)。

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