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        幼貂抗犬瘟熱病毒母源抗體消長規(guī)律的測定

        2013-06-05 15:23:59張力燕謝之景山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院泰安271018
        山東畜牧獸醫(yī) 2013年9期
        關(guān)鍵詞:犬瘟熱水貂中和

        張力燕 陳 晨 李 鵬 謝之景 (山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 泰安 271018)

        幼貂抗犬瘟熱病毒母源抗體消長規(guī)律的測定

        張力燕 陳 晨 李 鵬 謝之景*(山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 泰安 271018)

        本試驗(yàn)采用20只未進(jìn)行免疫接種的健康幼貂,分別在30、45、60日齡進(jìn)行頸靜脈采血,制備血清,測定抗CDV的中和抗體滴度。結(jié)果表明,30日齡絕大多數(shù)幼貂抗CDV母源中和抗體效價(jià)在1:30.0以上,45日齡母源抗體均較低,血清抗CDV中和抗體效價(jià)小于1:20.0。60日齡母源抗體基本消失,血清抗CDV中和抗體效價(jià)等于或小于1:8.0。所以45日齡對(duì)幼貂進(jìn)行CD免疫接種較好。

        水貂 犬瘟熱病毒 母源抗體

        犬瘟熱(Canine Distemper, CD)是由犬瘟熱病毒(Canine Distemper virus, CDV)引起犬科、鼬科、和浣熊科等動(dòng)物的一種急性、高度接觸性傳染性疾病[1]。CDV是副粘病毒科麻疹病毒屬的成員,病毒粒子呈多形性,多數(shù)呈球形,直徑大多數(shù)在150~300nm之間,為負(fù)鏈單股不分節(jié)的RNA病毒,只有一個(gè)血清型。目前CDV自然感染的動(dòng)物范圍在不斷擴(kuò)大,除犬科外,人們又發(fā)現(xiàn)了許多CDV的新宿主,例如鼬科的雪貂、水貂,浣熊科的小熊貓、浣熊,貓科的貓、獅、孟加拉虎、豹,大熊貓科的大熊貓,偶蹄目豬科的豬,日本獼猴和人等。CD在世界各地均有分布,所有養(yǎng)犬和經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的國家均有CD的發(fā)生。CD疫苗的應(yīng)用在一定程度上控制了CDV的流行[2,3],但是在實(shí)際生產(chǎn)過程中仍有許多疑似CDV感染的病例。CD在我國廣泛存在,我國部分省市的皮毛動(dòng)物特別是水貂飼養(yǎng)場不斷有CD病例的出現(xiàn),給養(yǎng)殖戶造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。造成免疫失敗的原因較多,但其確切原因尚不清楚,但抗CDV母源抗體的干擾是造成免疫失敗的一個(gè)重要原因。為此對(duì)幼貂的抗CDV母源中和抗體進(jìn)行測定,找出其消長規(guī)律,為選擇CD初次免疫接種的時(shí)機(jī)提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。本研究具有重要的理論意義和生產(chǎn)實(shí)踐意義,為保證養(yǎng)貂業(yè)的健康發(fā)展具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

        1 材料和方法

        1.1 毒株與細(xì)胞

        CDV-M1本實(shí)驗(yàn)室分離鑒定保存,MDCK細(xì)胞由遼寧出入境檢驗(yàn)檢疫局胡傳偉副研究員惠贈(zèng)。

        1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

        從濰坊諸城5個(gè)養(yǎng)貂場隨即抽取20只未進(jìn)行免疫接種的健康幼貂。

        1.3 方法

        1.3.1 中和抗體效價(jià)的測定 分別在30、45、60日齡對(duì)20只試驗(yàn)幼貂進(jìn)行頸靜脈采血,制備血清,將血清置56℃水浴30 min進(jìn)行滅活,置-20℃凍存,待檢。采用血清微量中和試驗(yàn)測定血清抗CDV中和抗體效價(jià)。采用固定病毒—稀釋血清法[4],測定血清抗CDV的中和抗體滴度。

        1.3.2 對(duì)病死水貂的綜合診斷 對(duì)在試驗(yàn)過程中死亡的水貂從臨床癥狀、剖檢變化、病理組織學(xué)、病毒形態(tài)學(xué)觀察等方面對(duì)病死水貂作出綜合診斷。

        2 結(jié)果

        2.1 中和抗體效價(jià)

        幼貂在30日齡抗CDV母源中和抗體效價(jià)較高,效價(jià)等于或大于1:18.6;幼貂在45日齡母源抗體均較低,血清抗CDV中和抗體效價(jià)等于或小于1:19.1;幼貂在60日齡抗CDV母源中和抗體基本消失,血清抗CDV中和抗體效價(jià)等于或小于1:8.0。母源抗體隨著日齡的增加逐漸下降,甚至消失。見表1。

        表1 幼貂抗CDV母源中和抗體 (log2)

        2.2 對(duì)死亡水貂的診斷結(jié)果

        6、15、16及19號(hào)幼貂在試驗(yàn)過程中死亡,出現(xiàn)CDV感染的典型臨床癥狀,病初鼻鏡發(fā)干,流漿液性鼻涕,眼結(jié)膜充血潮紅,淌眼淚,伴有輕度的咳嗽,體溫升高。隨著病程的發(fā)展,鼻鏡出現(xiàn)龜裂,流膿性鼻涕,咳喘加重,有膿性眼屎。

        對(duì)病死水貂進(jìn)行解剖,氣管黏膜有出血,肺部有米粒大圓點(diǎn)樣出血,甚者發(fā)生實(shí)變;胃底部有彌漫性出血,十二指腸、空腸前段點(diǎn)狀或彌漫性出血,回盲口有潰瘍,甚者整個(gè)腸道彌漫性出血;肝臟有點(diǎn)狀出血;膀胱黏膜點(diǎn)狀或彌漫性出血,腎臟實(shí)質(zhì)點(diǎn)狀出血;有神經(jīng)癥狀的病死犬解剖腦膜點(diǎn)狀出血及腦實(shí)質(zhì)點(diǎn)狀出血。在氣管黏膜上皮細(xì)胞和膀胱粘膜上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)和核內(nèi)見到包涵體。對(duì)病料進(jìn)行處理后,用0.5%磷鎢酸進(jìn)行負(fù)染,電鏡觀察。能夠觀察到CDV病毒粒子。診斷結(jié)果表明這4只幼貂是感染CDV而發(fā)病死亡。

        3 討論

        母源抗體的被動(dòng)免疫對(duì)新生動(dòng)物是十分重要的,然而對(duì)疫苗的接種也帶來一定的影響,若免疫接種時(shí)間過早,母源抗體的干擾易造成CD免疫失敗,嚴(yán)重影響免疫效果,若免疫接種時(shí)間過晚,則動(dòng)物易出現(xiàn)CD免疫空白期,動(dòng)物易于感染CDV。為此,弄清幼貂抗CDV母源中和抗體的消長規(guī)律有很重要的意義。對(duì)20只未進(jìn)行免疫接種的健康幼貂的檢測結(jié)果,在30日齡絕大多數(shù)幼貂抗CDV母源中和抗體效價(jià)在1:30.0以上,僅有2只幼貂的抗CDV的母源中和抗體效價(jià)小于1:30.0,這表明絕大多數(shù)幼貂在30日齡抗CDV的母源中和抗體效價(jià)較高,如此時(shí)對(duì)幼貂進(jìn)行CD免疫,母源抗體會(huì)嚴(yán)重干擾CD的免疫效果,易造成免疫失敗;幼貂在45日齡母源抗體均較低,血清抗CDV中和抗體效價(jià)小于1:20.0,盡管此時(shí)母源抗體也會(huì)影響CD的免疫,但是免疫能夠獲得成功;幼貂在60日齡母源抗體基本消失,血清抗CDV中和抗體效價(jià)等于或小于1:8.0,若此時(shí)進(jìn)行免疫能獲得良好的免疫效果,但是一些幼貂在60日齡前會(huì)有一段免疫空白期,在免疫空白期幼貂易于感染CDV而發(fā)病,這可能是4、15、16及19號(hào)幼貂感染CDV發(fā)病死亡的原因。根據(jù)上述分析,在45日齡對(duì)幼貂進(jìn)行CD免疫接種較好,此時(shí)進(jìn)行CD免疫接種能夠避免免疫空白期的出現(xiàn),同時(shí)又能獲得較好的免疫效果,這與幼狐的抗CDV母源抗體消長規(guī)律基本相似[4]。

        [1] Gassen U, Collins FM, Duprex WP, et al. Establishment of a rescue system for canine distemper virus. J Virol 2000 Nov;74(22): 10737-44.

        [2] Franke-V; Matern-B; Ackermann-O; et al.The prevention of distemper in zoo animals. Berl-Munch-Tierarztl-Wochenschr. 1989 Feb 1; 102(2): 56-8.

        [3] Tizard-I. Grease, anthraxgate, and kennel cough: a revisionist history of early veterinary vaccines. Adv-Vet-Med. 1999; 41: 7-24.

        [4] 楊篤寶, 雷留真, 謝之景等. 幼狐犬瘟熱母源抗體消長規(guī)律的測定[J]. 山東畜牧獸醫(yī). 2009, 8: 9-10.

        S858.92

        A

        1007-1733(2013)09-0010-02

        2013–06–13)

        *通訊作者

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