孟 巍 陳 萍 許瑞利 （山東省棗莊市市中區(qū)畜牧獸醫(yī)局 277100）

劉書軍 （山東省棗莊市市中區(qū)西王莊鄉(xiāng)畜牧站）

邱兆民 （山東省棗莊市市中區(qū)齊村鎮(zhèn)畜牧站）

朱瑞良* 李奕芙 （山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 泰安）

棗莊市市中區(qū)牛羊布病流行病學(xué)調(diào)查

孟 巍 陳 萍 許瑞利 （山東省棗莊市市中區(qū)畜牧獸醫(yī)局 277100）

劉書軍 （山東省棗莊市市中區(qū)西王莊鄉(xiāng)畜牧站）

邱兆民 （山東省棗莊市市中區(qū)齊村鎮(zhèn)畜牧站）

朱瑞良*李奕芙 （山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院 泰安）

為全面了解棗莊市市中區(qū)牛羊布氏桿菌病的流行情況，為該病的預(yù)防和防治提供參考依據(jù)，開展了全區(qū)牛羊布氏桿菌病流行病學(xué)調(diào)查，采用虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)相結(jié)合的方式對(duì)棗莊市市中區(qū)采集870份(奶牛333份，羊537份)血清進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：奶牛333份血清中，檢出5份陽性，羊537份血清均為陰性，但通過調(diào)查問卷了解到，養(yǎng)殖戶對(duì)布氏桿菌病知識(shí)了解甚少，自我防護(hù)意識(shí)不到位，今后應(yīng)加強(qiáng)布氏桿菌病的宣傳和檢測(cè)工作，積極采取防控措施，以免造成病原從外流入本區(qū)。

布氏桿菌病是由布氏桿菌引起的一種人畜共患的傳染病，我國(guó)農(nóng)業(yè)部將其列為二類動(dòng)物疫病[1]，其特征是引起動(dòng)物的生殖器官和胎膜發(fā)炎，引起流產(chǎn)、早產(chǎn)、不孕、不育、胎盤滯留、睪丸炎、關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)損傷及各種組織的局部病灶，牛、羊、豬最易感[2]，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)和人類健康?；⒓t平板凝集試驗(yàn)與試管凝集試驗(yàn)是臨床上用于檢測(cè)布氏桿菌病的常用方法，虎紅平板凝集試驗(yàn)簡(jiǎn)便易行，方便快捷，常用于樣品的初步檢測(cè)，但其檢出陽性率較高，常有假陽性出現(xiàn)，在實(shí)際工作中，常采用虎紅平板凝集試驗(yàn)初檢，試管凝集試驗(yàn)復(fù)檢的方法，便可得出快速、準(zhǔn)確的結(jié)果[3]。

1 調(diào)查方法

1.1 問卷調(diào)查

設(shè)計(jì)牛、羊布氏桿菌病流行病學(xué)調(diào)查問卷，發(fā)放調(diào)查問卷62份，涉及全區(qū)6個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)。

1.2 血清學(xué)試驗(yàn)

1.2.1 血清的制備與保存 待血清析出時(shí)，分裝入離心管，放于4℃冰箱用于試驗(yàn)檢測(cè)，將其他備份血清放于-20℃冰箱凍存。

1.2.2 試劑 布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)和布氏桿菌病試管凝集試驗(yàn)抗原、陽性血清、陰性血清均購自青島易邦生物工程有限公司。

1.2.3 血清檢測(cè) 對(duì)采集的870份血清使用布氏桿菌病虎紅平板凝集試驗(yàn)初步檢測(cè)，待其出現(xiàn)疑似陽性結(jié)果，再使用試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行復(fù)檢。（1）虎紅平板凝集試驗(yàn)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)：參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T18646-2002動(dòng)物布氏桿菌診斷技術(shù)，在滅菌潔凈的玻璃板片上，分別吸取被檢血清30μL與虎紅平板凝集抗原30μL混合均勻，同時(shí)以陽、陰性血清作對(duì)照。在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象判為陽性，無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性。（2）試管凝集試驗(yàn)(SAT)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)：首先稀釋血清，稀釋度依次為1∶12.5、l∶25、1∶50、1∶100。加入等量稀釋后的抗原，混勻，則血清稀釋度依次為l∶25、1∶50、1∶100、1∶200。同時(shí)做陰性對(duì)照和陽性對(duì)照及抗原對(duì)照，并配制比濁管。將全部試管、對(duì)照管及比濁管充分振蕩后置37℃溫箱24h，取出檢查并記錄結(jié)果[4]。參照比濁管，按各試管上層液體亮度判讀，++++菌體完全凝集，100%下沉，上層液體100%清亮；+++菌體幾乎完全凝集，上層液體75%清亮；++菌體凝集顯著，液體50%清亮；+凝集物有沉淀，液體25%清亮；－凝集物無沉淀，液體均勻混濁。

2 結(jié)果與分析

2.1 調(diào)查問卷結(jié)果與分析

本次牛羊布氏桿菌病流行病學(xué)調(diào)查問卷結(jié)果匯總見表1。

表1 牛羊布氏桿菌病流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果

一共發(fā)放調(diào)查問卷62份，其中養(yǎng)奶牛31戶，養(yǎng)綿羊14戶，養(yǎng)山羊28戶，牛、羊混養(yǎng)2戶，綿羊、山羊混養(yǎng)9戶。養(yǎng)殖方式以圈養(yǎng)和圈養(yǎng)兼放養(yǎng)為主。77.4%養(yǎng)殖戶有3年以上的養(yǎng)殖經(jīng)驗(yàn)，只有48.4%的養(yǎng)殖戶對(duì)布病有所了解，51.6%的養(yǎng)殖戶不了解甚至不知道。有42戶從外地購買牛、羊，其中有檢疫證的34戶。對(duì)飼養(yǎng)場(chǎng)進(jìn)行定期消毒的戶為56戶，占總調(diào)查戶的90.3%。屢配不孕的共計(jì)24戶，流產(chǎn)率為9.0%，其中第一胎流產(chǎn)率為7.7%，對(duì)流產(chǎn)物進(jìn)行消毒的為30戶，占總調(diào)查人數(shù)的48.4%，進(jìn)行無害化處理的戶有34家，占總調(diào)查戶的54.8%。

2.2 血清學(xué)結(jié)果與分析

2.2.1 奶牛血清學(xué)結(jié)果與分析 奶牛布氏桿菌病初檢及可疑病例復(fù)檢結(jié)果，見表2。由表2可知，初檢結(jié)果7頭牛為陽性，經(jīng)試管凝集試驗(yàn)復(fù)檢，2支試管凝集物無沉淀，液體均勻混濁，為陰性，5支試管菌體幾乎完全凝集，上層液體75%清亮，判定為陽性。

表2 奶牛布氏桿菌病初檢及可疑病例復(fù)檢結(jié)果

2.2.2 羊血清學(xué)結(jié)果 羊布氏桿菌病初檢及可疑病例復(fù)檢結(jié)果，見表3。由表3可知，均為陰性。

表3 羊布氏桿菌病初檢及可疑病例復(fù)檢結(jié)果

3 討論

布氏桿菌病是人畜共患的傳染性疾病，由布氏桿菌引起。其臨床特點(diǎn)是長(zhǎng)期發(fā)熱、多汗、關(guān)節(jié)痛、睪丸炎、肝脾腫大等，同時(shí)可引起母畜流產(chǎn)[5]，給畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

通過這次調(diào)研發(fā)現(xiàn)，本區(qū)畜間布魯氏菌病感染率低。在采集的870份血樣中，僅有5份牛血清為陽性。對(duì)于呈陽性的牛采取及時(shí)撲殺，焚燒、深埋、消毒等無害化處理，并做好登記備案、消毒滅源等其它疫點(diǎn)拔除工作，達(dá)到凈化家畜布氏桿菌病的目的。

棗莊市中區(qū)作為布氏桿菌病無定義流行病區(qū)，對(duì)布氏桿菌病主要是以預(yù)防為主。在這次調(diào)研中發(fā)現(xiàn)：（1）仍有部分養(yǎng)殖戶不了解布病相關(guān)防治知識(shí)，必須加大布病防治知識(shí)的宣傳力度，使養(yǎng)殖戶真正具備自我防范布魯氏菌病的自覺性及技能性[6]。（2）畜間防制不足，無害化處理意識(shí)不強(qiáng)，應(yīng)嚴(yán)格按防治程序進(jìn)行無害化處理，定期消毒，減少畜間傳播機(jī)率。（3）魯氏菌布病防控措施沒有完全到位，在免疫、檢疫、監(jiān)測(cè)、淘汰陽性畜、消毒等各項(xiàng)防控措施中，都不同程度的存在一些問題，在今后需加強(qiáng)基層獸醫(yī)站的建設(shè)，增加防檢設(shè)備投入，提高業(yè)務(wù)人員素質(zhì)；加強(qiáng)檢疫督查，對(duì)牲畜交易市場(chǎng)、定點(diǎn)屠宰場(chǎng)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)加大檢疫督查力度，嚴(yán)禁未經(jīng)檢疫牲畜及產(chǎn)品進(jìn)入市場(chǎng)，對(duì)各種違法行為要嚴(yán)肅處理，將傳入風(fēng)險(xiǎn)降至最低。

近年來本區(qū)大力發(fā)展牛羊養(yǎng)殖業(yè)，從外省引進(jìn)大量牛、羊，因此各部門應(yīng)對(duì)布氏桿菌病引起足夠的重視；全面、準(zhǔn)確掌握疫情動(dòng)態(tài)，加強(qiáng)布氏桿菌病的檢測(cè)工作，積極采取防控措施，以免造成病原從外流入我區(qū)。

[1] 羅明星, 周碧君，王開功等. 貴州省家畜布氏桿菌病血清學(xué)檢測(cè)[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué), 2009, 37(1)∶ 109-110.

[2] 蔡一非. 奶牛布氏桿菌的分離鑒定、血清學(xué)檢測(cè)方法比較與流行病學(xué)調(diào)查[D]. 烏魯木齊∶ 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué), 2008.

[3] 田峰. 湖北省2005-2009年畜間布魯氏菌病血清學(xué)檢測(cè)分析[D]. 武漢∶ 華中農(nóng)業(yè)大學(xué), 2010.

[4] 胡登林, 馬長(zhǎng)麗，愛爾拜爾等. 塔城地區(qū)牛羊布魯氏桿菌病血清學(xué)調(diào)查與風(fēng)險(xiǎn)分析[J]. 湖北畜牧獸醫(yī), 2013, 34(1)∶ 26-27.

[5] 洛松西熱. 西藏自治區(qū)當(dāng)雄縣布氏桿菌病血清學(xué)調(diào)查與防治對(duì)策[D].揚(yáng)州∶ 揚(yáng)州大學(xué), 2010.

[6] 孫延星, 竇玉鳳, 劉建平等. 新疆兵團(tuán)農(nóng)五師地區(qū)牛羊布魯氏菌病流行病學(xué)調(diào)查及防制[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘, 2011, 44(8)∶ 70-71 .

S858.26

A

1007-1733(2013)10-0071-02

2013–07–17）

基金支持：本課題得到山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系羊產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(SATS-201226-3)和山東省畜牧獸醫(yī)局項(xiàng)目支持。

*通訊作者