朱 樵 李 亞 章力勤 浙江省臨安市人民醫(yī)院 臨安311300

宋劍鋒 浙江省衢州市食品藥品檢驗所

·藥學園地·

野生於術與栽培白術化學成分比較研究

朱 樵 李 亞 章力勤 浙江省臨安市人民醫(yī)院 臨安311300

宋劍鋒 浙江省衢州市食品藥品檢驗所

野生於術 栽培白術 化學成分

白術Atractylodes macrocephala Koidz，又稱為天薊、山姜、乞力伽、山精、山連。具有健脾益氣、燥濕利水、止汗、安胎功效。用于脾虛食少，腹脹泄瀉，痰飲眩悸，水腫，自汗，胎動不安。主產區(qū)主要分布在浙江、安徽、湖南、江西等地。其中產于浙江臨安的白術由于品質獨特，稱之為於術，有南術北參的稱謂[1-2]。於術是浙江臨安的道地藥材，關于野生於術與栽培白術之間成分的比較研究較少。筆者采用HPLC法對野生於術和栽培白術的成分進行比較研究，發(fā)現(xiàn)一種野生於術中的特異性成分。利用聚酰胺柱色譜、硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜和制備HPLC等分離手段和經詳細的波譜學鑒定特異性成分為香草醛，為於術道地藥材的特性研究打下物質基礎。

1 實驗材料

1.1藥 材 野生於術采自浙江臨安天目山，種植白術購自浙江磐安，經衢州市藥檢所宋劍鋒副主任中藥師鑒定為白術Atractylodes macrocephala Koidz的根莖。野生於術：取原藥材，除去雜質，陰干，潤軟后，切段，干燥備用。栽培白術：取原藥材潤軟后，切段，干燥備用。

1.2儀 器 LC-2010A型高效液相色譜儀，包括：UV檢測器、CLASS-VP工作站（日本島津公司）；INOVA-500核磁共振儀，TMS為內標；薄層色譜硅膠GF254和柱色譜用硅膠（100-200目，160-200目，200-300目）均為青島海洋化工廠產品；聚酰胺（60-90目）為臨江化工有限公司產品；葡聚糖凝膠Sephadex LH-20為 Pharmacia公司產品；Agilent 1100和Shimadzu LC-6AD高效液相色譜儀（YMC公司Pack ODS-A C18制備柱，20×250mm，10μm）；凝膠樹脂Toyopearl HW-40 C（50-100μm）為Tosoh公司產品。

2 方法及結果

2.1色譜條件 色譜柱：SinoChrom ODS-BP柱（4.6mm×150mm，5μm）；流動相：乙腈-0.2%磷酸水溶液，梯度洗脫（表1）；檢測波長：230nm；流速：1.0mL/ min；柱溫：30℃。

2.2樣品制備 野生於術和栽培白術研細，取約0.05g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇100mL，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率50kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液，即得。在210nm檢測波長條件下，實驗結果顯示栽培白術和野生於術主要成分類似，見圖1，其中compound A明顯是野生於術區(qū)別于栽培白術的特異性成分，見圖2。

圖1 栽培白術成分色譜圖

圖2 野生於術成分色譜圖

2.3特異性成分分離 野生於術200g，粉碎后用70%乙醇回流提取3次，分別提取2、1.5、1h，①減壓濃縮至無醇味，加水稀釋，用乙酸乙酯萃取3次，濃縮得到乙酸乙酯部分浸膏。乙酸乙酯部分通過聚酰胺柱，分別用水、30%乙醇、60%乙醇、95%乙醇洗脫。其中水洗脫部分經硅膠柱色譜粗分為1～4四個部分，第3部分經硅膠柱色譜，得到14流分，其中流分5經Toyopearl HW-40 C柱色譜、制備液相色譜純化得到含有compound A的粗品，再經Sephadex LH-20柱色譜、制備液相色譜純化得到化合物compound A（3mg），見圖3。

2.4Compound A的結構鑒定 分離得到的特異性成分compound A經過詳細的一維NMR實驗分析，對比已有化合物數(shù)據(jù)，鑒定該成分的結構為香草醛（Vanillin;4-Hydroxy-3-methoxybenzaldehyde）。化合物A白色粉末。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：9.807（s，OH），7.41（1H，d，J=8.0Hz，H-2），7.03（1H，d，J= 8.0Hz，H-3），6.46（1H，s，H-6），3.94（3H，s，OCH3）。13C-NMR（CDCl3，125MHz）δ：191.3（CH0），152.0（C-3），147.4（C-4），130.0（C-1），127.8（C-2），14.6（C-3），109.0（C-6），56.3（OCH3）。根據(jù)文獻[3]確定化合物A為香草醛，見圖4。

圖3 Compound A的1 H NMR圖譜

圖4 Compound A的13C NMR圖譜

3 討 論

培育優(yōu)質的品種是最基本、最可靠、最經濟有效的中藥材可持續(xù)利用手段，是藥用植物品質（產量及藥用成分）的優(yōu)良性、保證中藥生產和中成藥療效的首要環(huán)節(jié)。通過該研究說明地道藥材於術與栽培白術有化學成分的差異。於術為野生品種，沒有經過系統(tǒng)的人工選擇，在生產上還沒有真正意義上的栽培品種。本實驗結果為於術選擇育種提供了參考，同時為於術的道地特異性研究打下基礎。

［1］孟建榮，吳志榮.地道藥材於術特異性考［J］.中藥材，1999，22（2）：98-100.

［2］馬全民，陳兆年.白術、於術中揮發(fā)油化學成分的研究［J］.現(xiàn)代應用藥學，1996，13（3）：11-13.

［3］賈紅梅，李寧，李銑.紅車軸草的化學成分研究［J］.中南藥學，2008，6（5）：534-536.

2013-03-23

浙江省臨安市醫(yī)療科研及重點?？茖２№椖浚∟o.20110833B55）

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