阮正英 陳 豪 羅 斌 浙江省臺(tái)州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 臺(tái)州317523

范廣民 浙江省臺(tái)州市中心醫(yī)院 應(yīng)香嵐 浙江省臺(tái)州市腫瘤醫(yī)院

生長(zhǎng)相關(guān)癌基因α與趨化素樣因子超家族2在胃癌組織的表達(dá)

阮正英 陳 豪 羅 斌 浙江省臺(tái)州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 臺(tái)州317523

范廣民 浙江省臺(tái)州市中心醫(yī)院 應(yīng)香嵐 浙江省臺(tái)州市腫瘤醫(yī)院

胃癌 趨化因子 生長(zhǎng)相關(guān)癌基因α 趨化素樣因子超家族2

研究表明，趨化因子及其受體可能在腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為中起著重要的作用[1-2]。趨化因子生長(zhǎng)相關(guān)癌基因（growth-related oncogene，GRO）和趨化素樣因子超家族（chemokine-like factor superfamily member，CKLFSF）可能參與了腫瘤的生物學(xué)行為[3]，但與胃癌的關(guān)系目前尚不清楚。本研究通過(guò)檢測(cè)胃癌組織GROα和CKLFSF2表達(dá)，探討其與胃癌的發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年3月—2012年8月在臺(tái)州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院、臺(tái)州市腫瘤醫(yī)院和臺(tái)州市中心醫(yī)院住院、術(shù)后經(jīng)病理確診胃癌患者63例，男40例，女23例，年齡48～89歲，平均（67.6±7.1）歲；其中低分化腺癌18例，乳頭狀腺癌13例，黏液腺癌和腺鱗癌各8例，管狀腺癌5例，未分化癌4例，鱗癌3例，印戒細(xì)胞癌和類(lèi)癌各2例。取胃癌組織為觀(guān)察組，癌旁正常胃黏膜組織為正常對(duì)照組。

1.2 試劑和方法 兔抗人免疫組化試劑GROα多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)Biomedical Technologies公司，抗人CKLFSF2多克隆抗體購(gòu)自上海天鴻生物科技有限公司，二抗山羊抗兔免疫組化試劑盒和DAB染色試劑均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司。免疫組化技術(shù)測(cè)定GROα和CKLFSF2表達(dá)，具體步驟參考文獻(xiàn)[4]方法。GROα和CKLFSF2的抗體稀釋濃度分別為1∶100和1∶25。

1.3 結(jié)果判定 胞漿呈現(xiàn)棕黃色表達(dá)判定為陽(yáng)性細(xì)胞，結(jié)構(gòu)清晰，著色明顯高于背景。每高倍視野陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜5%為陰性，≥5%為陽(yáng)性；～25%為（+），～50%為（++），～100%為（+++）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，GROα與CKLFSF2蛋白表達(dá)的相關(guān)性采用spearman等級(jí)相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 胃癌組織和正常胃黏膜組織GROα表達(dá) GROα蛋白主要表達(dá)于胃癌組織和正常胃黏膜組織的細(xì)胞漿內(nèi)，呈棕黃色。胃癌組GROα陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），見(jiàn)表1。伴有腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組GROα陽(yáng)性率顯著高于不伴有轉(zhuǎn)移者（P＜0.05)；其陽(yáng)性率與性別、年齡、腫塊大小、分化程度和臨床分期無(wú)明顯關(guān)系（P均＞0.05），見(jiàn)表2，圖1～2（封二）。

2.2 胃癌組織和正常胃黏膜組織CKLFSF2蛋白表達(dá) CKLFSF2蛋白主要表達(dá)于胃癌組織和正常胃組織的細(xì)胞漿內(nèi)，呈棕黃色。胃癌組CKLFSF2陽(yáng)性率顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），見(jiàn)表1。其陽(yáng)性率與性別、年齡、腫塊大小、分化程度、臨床分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特性無(wú)明顯關(guān)系（P均＞0.05），見(jiàn)表2，圖3～4（封二）。

2.3 胃癌組織GROα與CKLFSF2表達(dá)的相關(guān)性胃癌組 GROα與 CKLFSF2表達(dá)均為陽(yáng)性者占30.16%，其中CKLFSF2表達(dá)陰性組GROα的陽(yáng)性率78.79%，CKLFSF2表達(dá)陽(yáng)性組 GROα的陽(yáng)性率63.33%，GROα表達(dá)陰性組 CKLFSF2的陽(yáng)性率61.11%，GROα表達(dá)陽(yáng)性組 CKLFSF2的陽(yáng)性率33.33%。spearman等級(jí)相關(guān)分析顯示，兩者表達(dá)強(qiáng)度呈負(fù)相關(guān)（r=-0.480，P＜0.01），見(jiàn)表3。

表1 兩組胃黏膜組織GROα和CKLFSF2表達(dá)比較 例

表2 胃癌組GROα和CKLFSF2陽(yáng)性率與臨床病理特點(diǎn)的關(guān)系 例

表3 胃癌組GROα和CKLFSF2的等級(jí)相關(guān)性

3 討論

胃癌與幽門(mén)螺桿菌感染有關(guān)，趨化因子在此可能起到一定的作用，有證據(jù)顯示，胃癌患者血清中白細(xì)胞介素6與幽門(mén)螺桿菌感染相關(guān)[5]。趨化因子是一種小分子量的促炎癥因子，涉及到炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)、血管發(fā)生、血細(xì)胞生成、腫瘤及自身免疫性疾病。在腫瘤的生物學(xué)行為中，趨化因子及其受體表現(xiàn)出雙向調(diào)節(jié)作用，涉及到腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。不同的趨化因子所起的作用不同，有的趨化因子促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[6-7]，有的卻起著相反的作用[8]。

GROα屬于CXC趨化因子超家族成員，具有廣泛的促炎作用，還可能是一些慢性自身免疫性疾病新的治療靶點(diǎn)[9]。隨著研究的深入，越來(lái)越多的證據(jù)顯示其與惡性腫瘤存在一定的相關(guān)性，可能促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移[10-11]。本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組織GROα蛋白陽(yáng)性率明顯高于腫瘤周?chē)词苡绊懙恼ｐつそM織，與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，而與性別、年齡、腫塊大小、臨床分期和分化程度的生物學(xué)特性無(wú)相關(guān)性。提示GROα在胃癌組織表達(dá)增強(qiáng)，對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)可能有促進(jìn)作用，還可能與腫瘤的轉(zhuǎn)移有關(guān)。

CKLFSF作為一種新型的細(xì)胞因子，位于人16號(hào)染色體上，其表達(dá)譜較廣。該家族包括CKLF和CKLFSF1-8共9個(gè)基因，在免疫、生殖、造血、腫瘤的發(fā)生等發(fā)揮重要作用[10-11]。目前研究主要集中在CKLF-1的生物學(xué)特性方面，認(rèn)為它能通過(guò)下調(diào)Bax和Caspase-3及上調(diào)Bcl-2的途徑誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖及抑制凋亡[10]，促進(jìn)癌組織的生長(zhǎng)。相反，CKLFSF則可能起著抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。食管、賁門(mén)癌黏膜組織CMTM4和CMTM8蛋白陽(yáng)性表達(dá)率均低于癌旁正常黏膜組織[11]。以上說(shuō)明CKLFSF可能是潛在的抑癌因子，但CKLFSF2在胃癌的發(fā)生和發(fā)展中所起作用如何，則鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組CKLFSF2陽(yáng)性率明顯低于癌旁正常黏膜組織，提示其可能具有抑癌作用。研究還發(fā)現(xiàn)，CKLFSF2與患者的性別、年齡、腫塊大小、臨床分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)特性無(wú)相關(guān)性。

綜上所述，胃癌組織GROα表達(dá)增加，可能對(duì)胃癌組織的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，還與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移有關(guān)；而CKLFSF2表達(dá)下降，可能有抑制胃癌組織生長(zhǎng)作用。本研究顯示，趨化因子影響腫瘤的生長(zhǎng)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等生物學(xué)特性，檢測(cè)胃癌組織趨化因子GROα和CKLFSF2有助于判斷患者病情和預(yù)后。隨著研究的深入，以趨化因子及其受體為靶點(diǎn)可能有望成為一種新的治療方法。但其機(jī)制仍然不清，是否與組織學(xué)分型和幽門(mén)螺桿菌感染有關(guān)等，尚有待于進(jìn)一步研究。

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2013-04-11

浙江省溫嶺市科技局基金資助項(xiàng)目（No.2011-1-82）

通迅作者：羅斌，E-mail:luobinzg@163.com