朱穎 文昱婷 楊旸 楊健 張秀偉

近年來，肺癌的發(fā)病率居高不下，惡性胸腔積液主要是由腫瘤侵犯胸膜所致，故及時診斷并治療十分重要，然而對于臨床醫(yī)師來說，惡性胸腔積液的診斷仍是棘手的難題。早期診斷與肺癌的治療及預后關系密切，且不同的病理類型對治療的反應各不相同。尋找胸腔積液中高敏感性、高準確性的標志物來早期診斷良惡性胸水仍然是臨床研究的熱點。本研究聯(lián)合檢測胸水中血管內皮生長因子(VEGF)、細胞角蛋白片段21-1(CYFRA21-1)和癌胚抗原(CEA)水平，初步探討其在非小細胞肺癌(NSCLC)早期診斷中的臨床價值。

1 材料和方法

1.1 一般資料 選取2011年1月至2012年6月在我院確診惡性胸腔積液48例，其中男32例，女16例，年齡51～89歲，平均(68.1±3.5)歲，均經胸腔積液脫落細胞學、纖維支氣管鏡病理活檢或經皮肺穿刺細胞學等方法得到病理學證實。組織學分型:腺癌41例，鱗癌7例。均為初診患者。所有病例排除其他癌癥，采取標本之前未行抗癌治療。

1.2 試劑和儀器 VEGF試劑盒購自美國ADL公司;CYFRA21-1試劑盒購自芬蘭Wallac AB公司;CEA試劑盒為瑞典IDL Biotech AB公司產品。酶標儀為美國Biotek synergy2多功能酶標儀。

1.3 方法 常規(guī)無菌條件下穿刺抽取NSCLC患者胸水，留取樣本10 ml，1500 r/min離心10 min，分離上清液，置于－40℃冰箱保存待測。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定胸水中 VEGF、CYFRA21-1、CEA水平，具體操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.4 統(tǒng)計學分析 本組數(shù)據(jù)統(tǒng)計使用SPSS 16.0，計數(shù)資料采用卡方檢驗或Fisher精確概率法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 48例NSCLC患者中，胸水中VEGF、CYFRA21-1和CEA水平檢測陽性率分別為52.1%(25/48)、31.3%(15/48)和66.7%(32/48)。

2.2 聯(lián)合檢測胸水VEGF、CYFRA21-1和CEA陽性表達情況與NSCLC患者臨床病理關系 48例NSCLC患者胸水中，VEGF單陽性表達在不同年齡、性別和細胞分化程度的患者中無統(tǒng)計學差異，但是與腫瘤臨床分期、是否發(fā)生淋巴結轉移和遠處轉移有關(P＜0.05)。VEGF+CYFRA21-1或VEGF+CEA聯(lián)合檢測陽性率則與腫瘤細胞分化程度、臨床分期及有無淋巴結轉移和遠處轉移等方面均有顯著相關性(P＜0.05或P＜0.01)。見表1。

表1 VEGF、CYFRA21-1和CEA聯(lián)合檢測陽性率比較(n，%)

3 討論

惡性胸腔積液是由惡性腫瘤胸膜轉移或原發(fā)于胸膜的惡性腫瘤所致，是NSCLC常見的并發(fā)癥之一。胸水細胞學檢查對其診斷特異性較高，但敏感性低，陽性率在30%左右［1］，胸膜活檢存在創(chuàng)傷性，具有較大的盲目性，陽性率一般為40% ～75%［2］，而胸腔鏡檢查創(chuàng)傷大，且對胸腔積液的早期診斷價值還有待商榷，均不能滿足臨床的需要［3-4］。惡性胸腔積液的產生，通常意味著疾病的嚴重性和患者較短的生存期，因此，盡早明確診斷可為治療贏得時間。CEA是常用的腫瘤標記物，在臨床廣泛應用，但也存在敏感性較低的缺點，研究和尋找有關惡性胸腔積液診斷新的手段和方法已成為當前腫瘤臨床和基礎研究的重點。

腫瘤血管新生是腫瘤生長和轉移的基礎，血管通透性的增加是胸腔積液形成的主要機制之一，VEGF是腫瘤組織中促進血管病理性形成的介導物，具有強大的促進血管內皮細胞分化、增殖，誘導新生血管形成，并可促進微血管通透性增強，與腫瘤細胞的分化、生長及浸潤密切相關，其水平越高，提示腫瘤越趨于惡性［5］?，F(xiàn)已經證實，在肺癌等多種腫瘤組織中有VEGF及其受體的表達，瘤體組織VEGF表達水平與其微血管密度及惡性程度成正相關，并明顯高于非腫瘤組織。VEGF與肺癌的血管形成、癌細胞增殖、病變侵襲程度、遠處轉移及預后關系密切［6］。對多種腫瘤的研究已表明，有VEGF mRNA高表達的病人5年存活率低，認為與多種組織類型的腫瘤細胞分泌VEGF，通過旁分泌生長刺激來引發(fā)內皮細胞增殖及血管形成，使得腫瘤進展有關［7］。

細胞角蛋白(CKs)是分布于上皮細胞的中間纖維，其表達方式反映了上皮細胞分化的不同途徑，主要應用于胃腸道、乳腺、前列腺及肺的惡性腫瘤。近年來，CKs作為檢測循環(huán)癌細胞的指標，越來越得到人們的重視。CYFRA21-1是細胞角蛋白19的片段，為細胞骨架標記物，當腫瘤細胞發(fā)生溶解或壞死時，將細胞角蛋白釋放入體中，其濃度及敏感性隨病情進展而升高。在NSCLC患者中，各種類型的肺癌CYFRA21-1均可升高，尤其是鱗癌升高更顯著［8-9］。

本文研究結果顯示，NSCLC患者胸水中VEGF、CYFRA21-1和CEA的陽性檢出率分別為52.1%、31.3% 和 66.7% ，與國內外報道接近［6，8］。

相關研究表明，在肺癌組織中 VEGF和 CYFRA21-1均高表達，與肺癌臨床分期有關，可作為預測肺癌預后的一項指標。在胸腔積液中，VEGF與CYFRA21-1表達也相應增高，但兩者聯(lián)合檢測對NSCLC惡性胸腔積液的臨床研究較少。本研究通過VEGF聯(lián)合CYFRA21-1、CEA檢測在NSCLC患者胸水中的表達，發(fā)現(xiàn)其陽性表達率在NSCLC患者的不同細胞分化程度、臨床分期及淋巴結轉移和遠處轉移等方面均有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，為臨床尋找新的快速、有效的診斷指標，為提高NSCLC惡性胸腔積液的早期診斷和病情判斷提供了參考，同時進一步證明了這些指標單一和聯(lián)合應用時與NSCLC臨床分期及預后的相關性。

［1］Woenckhaus M，Grepmeier U，Werner B，et al.Microastillite analysis of pleural supernatants could increase sensitivity of pleural fluid cytology［J］.Mol Diagn，2005，7(4):517-524.

［2］陸再英，鐘南山.內科學［M］.7版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2008:110-116.

［3］Blanc FX，Atassi K，Bignon J，et al.Diagnostic value of medicai thoracoscopy in pleural disease:a 6-year retrospective study［J］.Chest，2002，121(5):1677-1683.

［4］Brims FJ，Arif M，Chauhan AJ，et al.Outcomes and complications following medical thoracoscopy［J］.Clin Respir J，2012，6(3):144-149.

［5］Yano S，Herbst RS，Shinohara H，et al.Treatment for malignant pleural effusion of human lung adenocarcinoma by inhibition of vascular endothelial growth factor receptor tyrosine kinas phosphorylation［J］.Clin Cancer Res，2000，6(3):957-965.

［6］Shimanuki Y，Takahashi K，Cui R，et al.Role of serum vascular endothelial growth factor in the prediction of angiogenesis and prognosis for non-small cell lung cancer［J］.Lung，2005，183(1):29-42.

［7］Zhan P，Wang J，Lv XJ，et al.Prognostic value of vascular endothelial growth factor expression in patients with lung cancer:a systematic review with meta-analysis［J］.J Thorac Oncol，2009，4(9):1094-1103.

［8］Molina R，Auge JM，Bosch X，et al.Usefulness of serum turmor markers，including progastrin-releasing peptide，in patients with lung cancer:correlation with histology［J］.Tumor Biol，2009，30(3):12l-129.

［9］Gu P，Huang G，Chen Y，et al.Diagnostic utility of pleural fluid carcinoembryonic antigen and CYFRA 21-1 in patients with pleural effusion:a systematic review and meta-analysis［J］.Clin Lab Anal，2007，21(6):398-405.