羅俊霞，符建偉，王毅紅，郭智廣，袁小偉，趙建波

(1.鄭州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)流通中心，河南鄭州450006;2.鄭州市園藝工作站，河南鄭州450006)

無論是用氣相色譜、氣質(zhì)聯(lián)用還是液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定農(nóng)藥殘留時(shí)基質(zhì)效應(yīng)普遍存在.基質(zhì)效應(yīng)按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)的定義，是指樣品中除分析物以外的其他成分對(duì)待測(cè)物測(cè)定值的影響;按照歐盟農(nóng)殘分析質(zhì)量控制規(guī)程中的定義，是指樣品中的一種或幾種非儀器檢測(cè)組分對(duì)待測(cè)物濃度或質(zhì)量測(cè)定準(zhǔn)確度的影響［1］.基質(zhì)效應(yīng)的存在嚴(yán)重地影響著農(nóng)藥殘留的定量.劉莉等［2］認(rèn)為在做空白基質(zhì)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)時(shí)，如果用純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行計(jì)算，有些農(nóng)藥的計(jì)算結(jié)果可能比理論值高幾倍，用空白基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液計(jì)算往往能得到理想的結(jié)果;蘇紅等［3］認(rèn)為相同含量的待測(cè)物在實(shí)際樣品中要比在純?nèi)軇┲械捻憫?yīng)值高;黃義彬等［4］則在毒死蜱的測(cè)定中，用丙酮溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液和丙酮基質(zhì)溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)行校正，前者的回收率比后者高近30%.目前有關(guān)用氣質(zhì)聯(lián)用和液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定農(nóng)殘時(shí)基質(zhì)效應(yīng)的研究較多，而用氣相色譜法測(cè)定有機(jī)磷的基質(zhì)效應(yīng)方面的研究較少.本研究用氣相色譜FPD測(cè)定敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、久效磷、樂果、毒死蜱、磷胺、甲基對(duì)硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、水胺硫磷、三唑磷14種有機(jī)磷農(nóng)藥在不同的蔬菜基質(zhì)中的基質(zhì)效應(yīng)，以期對(duì)農(nóng)殘檢測(cè)提供一定的參考.

1 試驗(yàn)部分

1.1 材料與方法

1.1.1 試驗(yàn)儀器 島津2010，配 AOC-20i自動(dòng)進(jìn)樣器和FPD檢測(cè)器，其色譜柱為DB-1701，30 m ×0.53 mm，液膜厚 0.25 μm;WH-861型漩渦混合器;天孚牌電子計(jì)數(shù)天平(DT 500A);德國(guó)產(chǎn)Heidolph牌SilentCrusher M型均質(zhì)機(jī);美國(guó)產(chǎn)NEVAPTM-112型氮吹儀.

1.1.2 試劑 乙腈為美國(guó) Baker Analyzed生產(chǎn)(HPLC級(jí));丙酮為天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心生產(chǎn)的綠環(huán)牌試劑(HPLC級(jí));NaCl為天津市化學(xué)試劑三廠生產(chǎn)(分析純);農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、久效磷、樂果、毒死蜱、磷胺、甲基對(duì)硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、水胺硫磷、三唑磷，均為100 mg·kg-1，由農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所生產(chǎn);先將上述14種標(biāo)配成10 mg·kg-1的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，根據(jù)試驗(yàn)要求進(jìn)行稀釋.

1.1.3 測(cè)定項(xiàng)目 敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、久效磷、樂果、毒死蜱、磷胺、甲基對(duì)硫磷、殺螟硫磷、對(duì)硫磷、水胺硫磷、三唑磷14種農(nóng)藥.

1.1.4 供試蔬菜種類 黃瓜、番茄、白菜、蘿卜、上海青、西葫蘆、生菜、菠菜、油麥菜等均來自鄭州市郊區(qū)生產(chǎn)基地和市場(chǎng).

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 基質(zhì)制取方法 依照 NY/T 761—2008［5］的農(nóng)殘?zhí)崛》椒ㄌ幚順悠凡⑸蠙C(jī)測(cè)定，確定樣品中沒有1.1.3中所列的14種有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留，該樣品為干凈的樣品，其上機(jī)測(cè)定液為該樣品的基質(zhì).

1.2.2 氣相色譜條件 程序升溫:起始溫度110℃，保持0.5 min，以40℃· min-1升至210 ℃，保持6 min，以0.5℃· min-1升至 212℃，保持 0 min，以50℃· min-1升至240℃，保持5 min，以40℃· min-1升至250℃，保持8 min，以40℃·min-1升至260℃，保持11 min.進(jìn)樣口溫度220℃，檢測(cè)器溫度260℃;載氣、氫氣、空氣的流速分別為15，80，100 mL· min-1;不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1μL.

1.2.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 用上述不同蔬菜的干凈樣品基質(zhì)做溶液稀釋成 0.05，0.1，0.2 mg·L-1的標(biāo)樣(稱為基質(zhì)標(biāo)樣)，用丙酮(色譜純?cè)噭?做溶液配制成相同質(zhì)量濃度的標(biāo)樣(稱為試劑標(biāo)樣)，用帶有火焰光度檢測(cè)器氣相色譜儀進(jìn)行測(cè)定.其中每個(gè)蔬菜基質(zhì)的每個(gè)質(zhì)量濃度均為1個(gè)處理，每個(gè)處理3次重復(fù)，1次重復(fù)分別進(jìn)2針，分別記錄這14種農(nóng)藥峰面積，計(jì)算每種蔬菜樣品基質(zhì)的基質(zhì)效應(yīng).

基質(zhì)效應(yīng) =基質(zhì)標(biāo)樣峰面積/試劑標(biāo)樣峰面積.

試驗(yàn)使用帶有火焰光度檢測(cè)器的氣相色譜儀，進(jìn)樣口襯管用未硅烷化處理的，每次進(jìn)針之前先進(jìn)8～10針干凈的基質(zhì)樣品飽和襯管的活性點(diǎn)位，待出峰高度正常后依次進(jìn)溶劑標(biāo)樣和各處理的基質(zhì)標(biāo)樣，記錄峰面積，根據(jù)上述公式計(jì)算各種基質(zhì)的基質(zhì)效應(yīng).

1.2.4 數(shù)據(jù)處理 將不同質(zhì)量濃度下各個(gè)處理的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行比較，并采用新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析.

2 結(jié)果與分析

2.1 9種蔬菜基質(zhì)中14種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)

由表1可以看出，所測(cè)試的14種有機(jī)磷農(nóng)藥在不同的蔬菜基質(zhì)中都存在不同程度的基質(zhì)效應(yīng)，多數(shù)農(nóng)藥表現(xiàn)為基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，個(gè)別農(nóng)藥在一定的濃度水平下表現(xiàn)為基質(zhì)減弱效應(yīng).其中氧化樂果、甲胺磷、乙酰甲胺磷、久效磷、磷胺等農(nóng)藥在9種蔬菜基質(zhì)中均存在較強(qiáng)的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，氧化樂果在9種蔬菜中的基質(zhì)效應(yīng)最強(qiáng);毒死蜱、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷、殺螟硫磷在各種基質(zhì)中基質(zhì)效應(yīng)相對(duì)較弱，對(duì)硫磷、殺螟硫磷在一定的濃度條件下、在個(gè)別蔬菜基質(zhì)中表現(xiàn)為基質(zhì)減弱效應(yīng);基質(zhì)效應(yīng)的大小和待測(cè)物在基質(zhì)中的濃度存在一定關(guān)聯(lián)，這一點(diǎn)與黃寶勇［6］中的研究結(jié)果相似，而平新亮等［7］認(rèn)為在較寬的濃度范圍內(nèi)，基質(zhì)效應(yīng)依賴于待分析農(nóng)藥濃度與基質(zhì)濃度的比.因?yàn)楸狙芯克渲频臐舛扔邢蓿瑹o法進(jìn)行相關(guān)性分析，這有待于今后進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)研究.

表1 9種蔬菜基質(zhì)中14種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)Table1 The matrix effects of 14 kinds of organic phosphorus pesticides in 9 kinds of vegetables

續(xù)表 Continuing table

2.2 14種農(nóng)藥在9種蔬菜基質(zhì)中的基質(zhì)效應(yīng)比較

由表2顯示，氧化樂果、甲胺磷、樂果、水胺硫磷、甲基對(duì)硫磷、敵敵畏、對(duì)硫磷7種農(nóng)藥在9種不同的蔬菜基質(zhì)中的基質(zhì)效應(yīng)在不同的置信區(qū)間下存在著顯著性差異，而乙酰甲胺磷、久效磷、毒死蜱、磷胺、三唑磷、殺螟硫磷和甲拌磷7種農(nóng)藥在9種蔬菜基質(zhì)間的基質(zhì)效應(yīng)差異不顯著，所以在表2中沒有列出.但是，在方差分析中發(fā)現(xiàn)乙酰甲胺磷、久效磷、磷胺的基質(zhì)效應(yīng)在3個(gè)濃度水平之間存在顯著性差異，同時(shí)這幾種農(nóng)藥在所有的蔬菜基質(zhì)中基質(zhì)效應(yīng)均較強(qiáng).所以在日常的檢測(cè)工作中要考慮到基質(zhì)對(duì)這幾種農(nóng)藥定值的影響.乙酰甲胺磷、久效磷、磷胺、三唑磷、氧化樂果、樂果、甲胺磷、水胺硫磷等多數(shù)農(nóng)藥在番茄和白菜基質(zhì)中較在其它蔬菜基質(zhì)中稍強(qiáng)，而乙酰甲胺磷、磷胺、殺螟硫磷、甲拌磷、甲胺磷、樂果、水胺硫磷、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷等多種農(nóng)藥在西葫蘆和油麥菜基質(zhì)中較在其它蔬菜基質(zhì)中基質(zhì)效應(yīng)較弱，這同歐菊芳［8］的研究結(jié)果類似，同黃寶勇［9］的研究結(jié)果出現(xiàn)了偏差.基質(zhì)效應(yīng)與基質(zhì)的類型有很大關(guān)系［8］.也就是說，基質(zhì)不同對(duì)各種農(nóng)藥定量的影響不一樣，在進(jìn)行農(nóng)藥殘留的分析過程中番茄和白菜基質(zhì)對(duì)乙酰甲胺磷、久效磷、磷胺、三唑磷、氧化樂果、樂果、甲胺磷、水胺硫磷等多數(shù)農(nóng)藥的影響較大，而西葫蘆和油麥菜對(duì)乙酰甲胺磷、磷胺、殺螟硫磷、甲拌磷、甲胺磷、樂果、水胺硫磷、甲基對(duì)硫磷、對(duì)硫磷等多種農(nóng)藥的影響較小.

表2 7種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)在9種蔬菜基質(zhì)之間的差異性分析Table2 Difference analysis of matrix effects between 9 kinds of vegetables on 7 kinds of pesticides

2.3 相同的蔬菜基質(zhì)中14農(nóng)藥之間的基質(zhì)效應(yīng)的差異性分析

由表3顯示在9種蔬菜基質(zhì)中14種農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)存在著顯著性差異，在不同的基質(zhì)中差異不一樣.總體來講，氧化樂果、乙酰甲胺磷、久效磷、磷胺和甲胺磷在9種蔬菜基質(zhì)中基質(zhì)效應(yīng)均較其它農(nóng)藥顯著，且表現(xiàn)為基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，這同劉莉［2］、歐菊芳［8］、蘇紅［10］的研究結(jié)果一致，它們?cè)?9 種蔬菜中基質(zhì)效應(yīng)的平均值分別為 2.03，1.72，1.62，1.31，1.31;殺螟硫磷、敵敵畏、甲拌磷、毒死蜱、對(duì)硫磷在9種蔬菜中基質(zhì)效應(yīng)比較弱，它們的基質(zhì)效應(yīng)的平均值分別為 1.08，1.06，1.06，1.05，1.04，對(duì)硫磷則在西葫蘆和油麥菜基質(zhì)中表現(xiàn)為比較弱的基質(zhì)減弱效應(yīng).

表3 9種蔬菜基質(zhì)中14種農(nóng)藥之間的基質(zhì)效應(yīng)的顯著性分析Table3 Difference analysis of matrix effects between 14 kinds of pesticides in 9 kinds of vegetables

在進(jìn)行方差分析的過程中發(fā)現(xiàn)在黃瓜和西葫蘆基質(zhì)中，3個(gè)濃度水平下的基質(zhì)效應(yīng)存在極顯著的差異;在蘿卜和白菜基質(zhì)中3個(gè)濃度水平下的基質(zhì)效應(yīng)存在顯著性差異;在其余的5種蔬菜基質(zhì)中3個(gè)濃度水平下的基質(zhì)效應(yīng)不存在顯著性差異.

3 結(jié)論

在用氣相色譜—FPD測(cè)定有機(jī)磷農(nóng)藥殘留時(shí)基質(zhì)效應(yīng)普遍存在，多數(shù)農(nóng)藥表現(xiàn)出基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，個(gè)別農(nóng)藥表現(xiàn)出基質(zhì)減弱效應(yīng)，其絕對(duì)基質(zhì)效應(yīng)為0.84～6.8.基質(zhì)效應(yīng)的強(qiáng)弱和樣品的種類存在著很大的關(guān)系，還和農(nóng)藥的種類存在著很大的關(guān)系.同一種農(nóng)藥在不同的蔬菜基質(zhì)中基質(zhì)效應(yīng)的強(qiáng)弱不同，相同的蔬菜基質(zhì)中不同農(nóng)藥的基質(zhì)效應(yīng)也不一樣.基質(zhì)效應(yīng)的強(qiáng)弱和待測(cè)藥物的濃度之間存在著一定的相關(guān)性，這有待于今后進(jìn)行進(jìn)一步的研究.

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