孫 蕊，劉雅娟，孫紅茜，秦 毅，楊銳英

高血壓(EH)是一種嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的常見(jiàn)病、多發(fā)病，而左心室肥厚和擴(kuò)大是EH心室重構(gòu)的主要表現(xiàn)。脂聯(lián)素(APN)是由白色脂肪細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，可以與心肌組織上分布的APN受體結(jié)合，發(fā)揮其增敏胰島素、預(yù)防心肌細(xì)胞肥大、抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用[1-2]。本研究旨在觀(guān)察自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)血清APN及心肌脂聯(lián)素受體1(AdipoR1)的表達(dá)，探討APN及其受體與EH及EH心室重構(gòu)之間的關(guān)系，為APN預(yù)防或延緩EH以及其靶器官損害的發(fā)生、發(fā)展提供理論依據(jù)。

1 動(dòng)物與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 22周齡雄性SHR大鼠(SHR組)及其同系正常對(duì)照Wistar-Kyoto(WKY)大鼠(WKY組)各8只，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證編號(hào)SCXK(京)2012-0001。普通光照環(huán)境中飼養(yǎng)，自由進(jìn)食水。

1.2 標(biāo)本收集 處死動(dòng)物前1 d禁食水12 h，電子秤稱(chēng)體質(zhì)量(BW)，采用北京軟隆公司BP-98A智能無(wú)創(chuàng)血壓計(jì)測(cè)量尾動(dòng)脈收縮壓(SBP)。次日清晨，尾尖采血測(cè)定空腹血糖(FBG)。腹腔注射10%水合氯醛以麻醉大鼠，迅速開(kāi)胸，由腹主動(dòng)脈穿刺取血5 ml，2 h內(nèi)以3 000 r/min離心10 min，分離血清。迅速取出心臟，稱(chēng)全心重量(HW)；保留大鼠左心室游離壁和室間隔作為左心室重量(LVW)。取部分心肌組織，置于4%多聚甲醛中固定，以備做組織形態(tài)學(xué)檢查，剩余組織立即轉(zhuǎn)存于-80 ℃冰箱，用以做實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)檢測(cè)。

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生化指標(biāo)測(cè)定 FBG測(cè)定，采用強(qiáng)生One Touch Ultra系列血糖儀測(cè)定；空腹胰島素(FINS)測(cè)定，采用放射免疫法，試劑盒購(gòu)于北京原子高科股份有限公司；計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)=(FBG×FINS)/22.5。

1.3.2 心室肥厚指標(biāo)測(cè)定 計(jì)算心臟重量指數(shù)(HWI)和左心室重量指數(shù)(LVWI)，HWI=HW/BW，LVWI=LVW/BW，以HWI和LVWI作為判斷心室肥厚的指標(biāo)。

1.3.3 心肌組織形態(tài)學(xué)觀(guān)察 將固定好的心肌組織標(biāo)本進(jìn)行石蠟包埋，HE染色，光鏡下觀(guān)察心肌細(xì)胞形態(tài)。

1.3.4 血清學(xué)指標(biāo)測(cè)定 血清APN測(cè)定采用酶聯(lián)免疫法，試劑盒購(gòu)于美國(guó)R&D公司。

1.3.5 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)心肌AdipoR1分布及蛋白表達(dá) 將心肌組織石蠟切片在二甲苯及降序梯度乙醇溶液中常規(guī)脫蠟至水，過(guò)氧化氫(H2O2)滅活內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，然后用兔血清封閉液封閉，加AdipoR1單克隆抗體(購(gòu)于美國(guó)Abcam公司)及生物素化二抗，用DAB顯色劑顯色。免疫組化法結(jié)果判定：心肌AdipoR1陽(yáng)性顯色為棕黃色，在400倍物鏡下，用醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，每張切片檢測(cè)10個(gè)視野，以平均積分光密度值代表蛋白相對(duì)量。

1.3.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)心肌AdipoR1 mRNA表達(dá) 在NCBI GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢(xún)AdipoR1(NM_207587.1)，采用Primer Premier 5.0軟件設(shè)計(jì)引物。目的基因及引物序列見(jiàn)表1。

用美國(guó)AXYGEN公司RNA提取試劑盒提取標(biāo)本總RNA，測(cè)定總RNA濃度，以O(shè)D260/OD280在1.8～2.0的RNA做后續(xù)實(shí)驗(yàn)。用北京全式金公司逆轉(zhuǎn)錄試劑盒逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。取1 μl逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，按北京全式金公司熒光定量PCR試劑盒說(shuō)明，以25 μl體系，按以下條件進(jìn)行PCR：95 ℃預(yù)變性10 min，94 ℃變性15 s，52 ℃退火30 s，72 ℃延長(zhǎng)30 s，擴(kuò)增40個(gè)循環(huán)。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀進(jìn)行分析。根據(jù)目的基因的相對(duì)量=2-△△Ct計(jì)算結(jié)果，△△Ct=〔CtGI(待測(cè)樣本)-CtGAPDH(待測(cè)樣本)〕-〔CtGI(校正樣本)-CtGAPDH(校正樣本)〕。

表1 目的基因及引物序列

2 結(jié)果

2.1 一般情況 與同周齡WKY組相比，SHR組BW減低，SBP、HW、LVW、HWI、LVWI、FINS及HOMA-IR增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);兩組FBG差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見(jiàn)表2)。

2.2 心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀(guān)察 在光鏡下可見(jiàn)，WKY組心肌纖維走行較規(guī)整，細(xì)胞核呈圓形，間質(zhì)及微血管形態(tài)正常。而SHR組心肌纖維走行紊亂，心肌細(xì)胞存在不同程度的變性，細(xì)胞間界限不清，細(xì)胞核增大，心肌細(xì)胞間質(zhì)成纖維細(xì)胞增生，見(jiàn)圖1。

2.3 血清APN表達(dá) 與WKY組相比，SHR組血清APN表達(dá)降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表3)。

2.4 心肌AdipoR1分布及蛋白表達(dá) 心肌AdipoR1陽(yáng)性染色結(jié)果呈棕黃色顆粒，主要分布于心肌細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。SHR組心肌AdipoR1陽(yáng)性染色減少，與WKY組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表3、圖2)。

2.5 心肌AdipoR1 mRNA表達(dá) SHR組心肌AdipoR1 mRNA表達(dá)低于WKY組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表3、圖3)。

2.6 大鼠SBP與各指標(biāo)的相關(guān)性及危險(xiǎn)因素分析 Pearson直線(xiàn)相關(guān)顯示，大鼠SBP與血清APN、AdipoR1、AdipoR1 mRNA呈負(fù)相關(guān)，與HWI、LVWI、HOMA-IR呈正相關(guān)，見(jiàn)表4；以SBP為因變量，以上述測(cè)量指標(biāo)為自變量進(jìn)行多元線(xiàn)性逐步回歸分析顯示，血清APN和HOMA-IR是大鼠SBP的影響因素，見(jiàn)表5。

表2 兩組大鼠一般情況比較

注：SBP=收縮壓，BW=體質(zhì)量，HW=全心重量，LVW=左心室重量，HWI=全心重量指數(shù)，LVWI=左心室重量指數(shù)，F(xiàn)BG=空腹血糖，F(xiàn)INS=空腹胰島素，HOMA-IR=胰島素抵抗指數(shù);HWI=HW/BW，LVWI=LVW/BW，HOMA-IR=(FBG×FINS)/22.5

Table3 Expression of serum APN and myocardial AdipoR1 between two groups

檢測(cè)指標(biāo)WKY組SHR組t值P值血清APN(mg/L)8 74±0 514 32±0 3819 5860 000AdipoR10 66±0 040 20±0 0225 8130 000AdipoR1mRNA0 89±0 060 14±0 0624 8100 000

注：APN=脂聯(lián)素

表4 SBP與各指標(biāo)的直線(xiàn)相關(guān)關(guān)系

表5 SBP與各指標(biāo)多元線(xiàn)性逐步回歸分析結(jié)果

Table5 Multivariate linear stepwise regression analysis result between SBP and each index

變量bβt值P值常數(shù)項(xiàng) 210 489 - 9 9810 000APN-11 139-0 663-6 0720 000HOMA-IR 8 869 0 323 2 9550 006

2.7 大鼠LVWI與各指標(biāo)的相關(guān)性及危險(xiǎn)因素分析 Pearson直線(xiàn)相關(guān)顯示，大鼠LVWI與血清APN、AdipoR1、AdipoR1 mRNA呈負(fù)相關(guān)，與SBP、HWI、HOMA-IR呈正相關(guān)，見(jiàn)表6；以L(fǎng)VWI為應(yīng)變量，以上述測(cè)量指標(biāo)為自變量進(jìn)行多元線(xiàn)性逐步回歸分析顯示，心肌AdipoR1、心肌AdipoR1 mRNA、HWI、SBP是大鼠LVWI的影響因素，見(jiàn)表7。

表6 LVWI與各指標(biāo)的直線(xiàn)相關(guān)關(guān)系

表7 LVWI與各指標(biāo)多元線(xiàn)性逐步回歸分析結(jié)果

Table7 Multivariate linear stepwise regression analysis result between LVWI and each index

變量bβt值P值常數(shù)項(xiàng) 1 455- 3 4810 000AdipoR1-0 300-0 293-2 1580 027AdipoR1mRNA-0 302-0 242-1 8170 032HWI 0 374 0 434 4 2980 000SBP 0 001 0 042 0 3300 004

圖1 兩組大鼠心肌細(xì)胞HE染色(SP×400)

圖2 心肌AdipoR1的表達(dá)(SP×400)

圖3 心肌AdipoR1熒光定量PCR擴(kuò)增曲線(xiàn)

Figure3 Amplification plot of myocardium AdipoR1 fluorescent quantitation PCR

3 討論

3.1 SHR的基本特性 本研究結(jié)果顯示，與WKY組相比，SHR組SBP水平均可達(dá)180 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)以上、HOMA-IR增大，HWI及LVWI增加，心肌纖維走行紊亂、心肌細(xì)胞增生肥大。提示：22周齡SHR SBP升高并相對(duì)穩(wěn)定，同時(shí)伴有胰島素抵抗(IR)，本研究高血壓模型選擇成功；22周齡SHR已出現(xiàn)心肌肥厚和心肌間質(zhì)纖維化，發(fā)生了心室重構(gòu)。

SHR因其發(fā)病機(jī)制、EH心血管并發(fā)癥等都與人類(lèi)EH患者相似，是目前國(guó)際公認(rèn)最接近于人類(lèi)EH的動(dòng)物模型，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究中。有研究表明，SHR大鼠4～6周時(shí)SBP開(kāi)始升高，6個(gè)月左右SBP上升到最高水平并趨于穩(wěn)定，可出現(xiàn)EH中后期靶器官損害的特征性表現(xiàn)，如心肌肥大、心力衰竭、腎功能不全等[3]。本研究結(jié)果同樣證實(shí)該模型的以上生理學(xué)特征。有研究表明，EH患者中約半數(shù)存在IR現(xiàn)象，而動(dòng)物實(shí)驗(yàn)同樣發(fā)現(xiàn)，SHR存在明顯IR和高胰島素血癥[4]，這與本研究結(jié)果一致。本研究對(duì)大鼠SBP相關(guān)因素進(jìn)行多元逐步回歸分析后發(fā)現(xiàn)，HOMA-IR是影響SBP的重要因素。作為EH的重要發(fā)病機(jī)制之一，IR可能通過(guò)以下途徑促使血壓升高：(1)使電解質(zhì)代謝發(fā)生障礙，Na+-K+ATP酶激活使細(xì)胞內(nèi)鈉增加，導(dǎo)致鈉潴留；(2)使血管對(duì)體內(nèi)升壓物質(zhì)反應(yīng)增強(qiáng)，影響血管舒張功能。目前EH心臟重構(gòu)機(jī)制尚不十分清楚，多數(shù)觀(guān)點(diǎn)認(rèn)為：(l)血流動(dòng)力學(xué)負(fù)荷過(guò)重，即機(jī)械應(yīng)力增加是引起心臟肥大的主要原因；(2)神經(jīng)內(nèi)分泌因子激活和釋放，主要是交感神經(jīng)激活釋放兒茶酚胺、腎素血管緊張素系統(tǒng)(RAS)激活產(chǎn)生腎素、血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)和醛固酮，以及其他神經(jīng)內(nèi)分泌因素如內(nèi)皮素、心房尿鈉肽、緩激肽、前列腺素等。近年發(fā)現(xiàn)，一種新的脂肪因子APN也與EH心室重構(gòu)發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。

3.2 APN表達(dá)水平與EH的關(guān)系 本研究結(jié)果顯示，與WKY組相比，SHR組血清APN水平下降，心肌AdipoR1及AdipoR1 mRNA表達(dá)降低，表明SHR存在低APN血癥。Adamczak等[5]報(bào)道，EH患者較正常對(duì)照者血漿APN水平明顯降低，認(rèn)為APN可能在EH的發(fā)病中起一定作用。Iwashima等[6]研究了446例EH患者和312例血壓正常者，同樣發(fā)現(xiàn)EH組血漿APN水平明顯降低，經(jīng)校正年齡、體質(zhì)指數(shù)(BMI)及總膽固醇等影響因素后，EH組較血壓正常組血漿APN水平仍明顯降低。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)同樣發(fā)現(xiàn)，SHR血清APN濃度降低且AdipoR1在SHR大鼠心臟的表達(dá)降低[7]，以上結(jié)果與本研究一致。然而亦有不同結(jié)論，Mallamaci等[8]則認(rèn)為，中年男性EH患者血漿APN明顯升高，同時(shí)肌酐清除率比正常對(duì)照組低。造成這種異同結(jié)論的原因可能為在EH初期APN水平降低，但當(dāng)EH后期出現(xiàn)靶器官損害時(shí)，腎功能受損，腎臟對(duì)APN的清除率下降，APN水平升高。

本研究結(jié)果顯示，大鼠SBP與血清APN、心肌AdipoR1、心肌AdipoR1 mRNA呈負(fù)相關(guān)，對(duì)大鼠SBP相關(guān)因素進(jìn)行多元逐步回歸分析后發(fā)現(xiàn)，血清APN是影響SBP的重要因素。目前APN水平的高低與血壓的相關(guān)性仍有爭(zhēng)議。但近年多數(shù)學(xué)者的觀(guān)點(diǎn)認(rèn)為，血壓水平與APN呈負(fù)相關(guān)[9]，低脂聯(lián)素血癥是EH重要的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子[10]，該結(jié)論與本研究結(jié)果一致。目前支持EH與APN存在相關(guān)性的學(xué)者認(rèn)為APN與血壓呈負(fù)相關(guān)的可能機(jī)制為：(1)低脂聯(lián)素血癥可加重血管內(nèi)皮的炎癥反應(yīng)和血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移，使血管阻力增高，血壓升高[11-12]；(2)低脂聯(lián)素血癥與兒茶酚胺水平的增高可能存在某種聯(lián)系，使交感神經(jīng)活性亢進(jìn)，血壓增高[13]；(3)低脂聯(lián)素血癥使機(jī)體糖脂代謝失衡，IR加重，繼發(fā)性高胰島素血癥使腎臟水鈉重吸收增強(qiáng)，血壓升高[6]；(4)低脂聯(lián)素血癥誘發(fā)脂肪組織中RAS活化，AngⅡ抑制脂肪細(xì)胞分化，促使三酰甘油在細(xì)胞內(nèi)聚集，細(xì)胞體積變大，導(dǎo)致脂肪含量增加，脂肪組織中RAS組分增加，血壓升高[14]；(5)低脂聯(lián)素血癥可能在尚無(wú)IR 的早期階段即參與 EH 的發(fā)生、發(fā)展[6]。由此可見(jiàn)，APN在EH發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用，將有利于評(píng)估EH患病風(fēng)險(xiǎn)及療效，并為臨床EH的有效預(yù)防和進(jìn)一步治療提供重要的理論指導(dǎo)和新的更有效的途徑。

3.3 血清APN、心肌AdipoR1與心室重構(gòu)的關(guān)系 本研究結(jié)果顯示，大鼠LVWI與血清APN、心肌AdipoR1呈負(fù)相關(guān)；對(duì)大鼠LVWI相關(guān)因素進(jìn)行多元逐步回歸分析后發(fā)現(xiàn)，心肌AdipoR1是影響左心室重構(gòu)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，APN水平的下降和左心室心肌肥大而引發(fā)的舒張功能不全密切相關(guān)。Kozakova等[15]在正常人群中研究發(fā)現(xiàn)循環(huán)中APN獨(dú)立于年齡和代謝因素與左心室體積和室壁厚度具有負(fù)相關(guān)性。Koichi等[16]在APN基因敲除的小鼠和過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-α(PPAR-α)基因敲除的小鼠研究中發(fā)現(xiàn)，APN可通過(guò)激活依賴(lài)腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的PPAR-α而起到抑制AngⅡ誘導(dǎo)的心肌纖維化，抑制心臟重構(gòu)。目前認(rèn)為，APN對(duì)心肌具有保護(hù)作用，而這種保護(hù)作用主要依賴(lài)于與心肌中的AdipoR結(jié)合來(lái)發(fā)揮。實(shí)驗(yàn)表明心室肌細(xì)胞既可以分泌APN，又有 AdipoR1/2的表達(dá)，在結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支所致心肌缺血的小鼠模型中，梗死區(qū)和梗死邊緣區(qū)左心室肌 AdipoR1 mRNA 和蛋白表達(dá)均明顯降低[17]；而AdipoR2表達(dá)無(wú)明顯變化。但AdipoR在EH心肌重構(gòu)中作用機(jī)制尚不明確。有研究發(fā)現(xiàn)，AdipoR的下游主要涉及AMPK、p38絲裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和PPAR-α等多個(gè)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子，AMPK 作為一種能量及氧化應(yīng)激敏感性的蛋白激酶，是APN信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中的關(guān)鍵信號(hào)分子[18]。有學(xué)者認(rèn)為，APN通過(guò)與心肌AdipoR1結(jié)合后促進(jìn)AMPK磷酸化，進(jìn)而活化其下游信號(hào)分子乙酰輔酶A羧化酶(ACC)、p38MAPK 和PPAR-α，從而促進(jìn)葡萄糖攝取和脂肪酸氧化，為心肌細(xì)胞供應(yīng)能量[19]，并抑制心肌肥厚。因此，筆者推測(cè)血清APN和心肌AdipoR1在EH心室重構(gòu)的形成過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用，心肌AdipoR1表達(dá)下降是導(dǎo)致心室重構(gòu)的重要因素。

綜上所述，SHR存在顯著的心室重構(gòu)，血清APN及心肌AdipoR1表達(dá)下降、IR程度增加；SHR心室重構(gòu)可能與血清APN及心肌AdipoR1表達(dá)下降有關(guān)。但本研究未對(duì)SHR大鼠心室重構(gòu)和血清APN、心肌AdipoR1進(jìn)行分階段動(dòng)態(tài)觀(guān)察研究，且未對(duì)受體后信號(hào)通路進(jìn)行深入研究，具體機(jī)制有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)。

1 Marso SP，Mehta SK，F(xiàn)rutkin A，et al.Low adiponectin levels are associated with atherogenic dyslipidemia and lipid-rich plaque in nondiabetic coronary arteries[J].Diabetes Care，2008，31(5)：989-994.

2 楊生.2型糖尿病合并下肢血管病變患者與晚期糖基化終末產(chǎn)物及脂聯(lián)素相關(guān)性研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2011，14(5)：1643.

3 周穎，陳虹.高血壓動(dòng)物模型研究進(jìn)展[J].中國(guó)現(xiàn)代實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2006，5(1)：51-53.

4 王洪巨，黃元偉.胰島素與高血壓關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2003，32(1)：59-61.

5 Adamczak M，Wieeek A，F(xiàn)unahashi T，et al.Deereased plasma adiponectin coneentration in patients with essential hypertension[J].Am J Hypertens，2003，16(3)：72-75.

6 Iwashima Y，Katsuya T，Ishikawa K，et al.Association of hypoadiponectinemia with smoking habit in men[J].Hypertension，2005，45(6)：1094-1100.

7 趙奇瑛，朱筠.1，25-(OH)2D3在2型糖尿病大鼠發(fā)病過(guò)程中對(duì)血清脂聯(lián)素及脂肪組織脂聯(lián)素mRNA的影響[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2011，14(4)：1305.

8 Mallamaci F，Zoccali C，Cuzzola F，et al.Adiponectin in essential hypertension[J].Nephrol，2002，15(5)：507-511.

9 Yoshio I，Takeshi H，Yuhei K.Role of adiponectin in obesity，hypertension，and metabolic syndrome[J].Current Hypertension Reviews，2010，6(2)：110-117.

11 Fasshaner M，Pasehke R，Stumvoll M，et al.Adiponectin，obesity，and cardlovasculardisease[J].Biochirnie，2004，86(11)：779-784.

12 Ohashi K，Kihara S，Ouchi N，et al.Adiponectin replenishment ameliorates obesityrelated hypertension[J].Hypertension，2006，47(6)：1108-1116.

13 Fasshauer M，Klein J，Neumann S，et al.Adiponectin gene expression is inhibited by beta-adrenergic stimulation via protein kinase A in3T3-L1 adipocytes[J].FEBS Lett，2001，507(2)：142-146.

14 牛新艷.血清脂聯(lián)素、血清淀粉樣蛋白A與冠狀動(dòng)脈病變的相關(guān)性研究[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2011，14(10)：3232.

15 Kozakova M，Muscelli E，F(xiàn)lyvbjerg A，et al.Adiponectin and left ventricular structure and function in healthy adults[J].J Clin Endocrinal Metab，2008，93(7)：2811-2818.

16 Koichi F，Norikazu M，Mina S，et al.Adiponectin protects against angiotensinⅡ-induced cardiac fibrosis through activation of PPAR-α[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol，2008，28(5)：863-870.

17 Saito Y，F(xiàn)ujioka D，Kawabata K，et al.Statin reverses reduction of adiponectin receptor expression in infarcted heart and in TNF-alpha-treated cardiomyocytes in association with improved glucose uptake[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol，2007，293(6)：3490-3497.

18 Hosch SE，Olefsky JM，Kim JJ.APPLied mechanics：uncovering how adiponectin modulates insulin action[J].Cell Metab，2006，4(1)：5-6.

19 周燕，賈文芳，于健.糖尿病腎病患者血清胃促生長(zhǎng)素和脂聯(lián)素水平變化及臨床意義[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué)，2011，14(7)：2392.