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        高效液相色譜法測定蓮膽消炎片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量

        2013-04-17 08:45:54
        中國藥業(yè) 2013年4期
        關(guān)鍵詞:穿心蓮藥典內(nèi)酯

        陸 瀅

        (江蘇省鹽城市第一人民醫(yī)院藥劑科臨床藥學(xué)室,江蘇 鹽城 224000)

        蓮膽消炎片由穿心蓮和苦木組方,功效為清熱解毒、涼血消腫,用于感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、口舌生瘡、頓咳勞嗽、熱淋澀痛[1]。根據(jù)1995年版《中國藥典》1997年增補(bǔ)版本中對(duì)蓮膽消炎片的標(biāo)準(zhǔn),在其檢查項(xiàng)中只對(duì)穿心蓮內(nèi)酯作了規(guī)定(即要求每片含總內(nèi)酯以穿心蓮內(nèi)酯計(jì),不得少于18 mg),未對(duì)脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量作出規(guī)定,這樣不易于對(duì)蓮膽消炎片的質(zhì)量進(jìn)行有效控制[2]。筆者認(rèn)為,可根據(jù)2010年版《中國藥典(一部)》中對(duì)穿心蓮的質(zhì)量要求,建立用于蓮膽消炎片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯含量測定的高效液相色譜法,從而控制蓮膽消炎片的質(zhì)量。

        1 儀器與試藥

        Agilent 1200型高效液相測定儀;G1314B型紫外檢測器;Agilent色譜工作站;BP 211D型電子天平;TB224S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品(批號(hào)為110797-200307),脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品(批號(hào)為 110854-200306)均來自中國藥品生物制品檢定所;蓮膽消炎片(批號(hào)分別為 20100101,20100309,20100716,20101103,20101201,江西恒康藥業(yè)有限公司);甲醇為色譜純,其余試劑均為分析純。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

        色譜柱:Agilent C18柱(150 mm × 4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相:甲醇 - 水(52 ∶48);穿心蓮內(nèi)酯的流速:0.8 mL /min,進(jìn)樣量:10 μL,檢測波長:225 nm;脫水穿心蓮內(nèi)酯的流速:0.8 mL/min,進(jìn)樣量:10 μL,檢測波長:254 nm。理論板數(shù)按穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯峰計(jì)算均應(yīng)不低于2 000。

        2.2 溶液制備

        分別取穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每1 mL各含0.1 mg的混合溶液,即得對(duì)照品溶液(貯備液)[3]。取蓮膽消炎片10片除去糖衣,精密稱定,研細(xì),取適量,精密稱定1.0 g,置三角瓶中,精密加入40%的甲醇25 mL,稱定質(zhì)量,浸泡 1 h,超聲處理(功率 250 W,頻率 33 kHz)30 min,放冷,再稱定質(zhì)量,用40%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液10 mL,置中性氧化鋁柱(200到300目,5 g,內(nèi)徑為1.5 cm),用甲醇15 mL洗脫,收集洗脫液,置50 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得供試品溶液。

        2.3 方法學(xué)考察

        專屬性試驗(yàn):取不含穿心蓮的模擬制劑制備的陰性對(duì)照品溶液,在上述色譜條件下進(jìn)樣測定。結(jié)果,在與穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液峰相同位置,供試品溶液有色譜峰出現(xiàn),色譜峰與其相鄰峰能完全達(dá)到基線分離。陰性對(duì)照品溶液在穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮峰相應(yīng)位置無干擾。高效液相色譜圖見圖1。

        線性關(guān)系考察:精密量取穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液(貯備液)適量共5份,分別置10 mL容量瓶中,加入甲醇溶液稀釋定容,使質(zhì)量濃度分別稀釋 2,4,8,80倍,將上述 5份溶液和原對(duì)照品貯備液各精密量取10 μL注入色譜柱。以穿心蓮內(nèi)酯峰面積(A)為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度(C,μg)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸,得回歸方程 C=26.395 030 12 A-13.301 027 15, r=0.999 9。結(jié)果表明,穿心蓮內(nèi)酯進(jìn)樣量在5~400 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。平均回收率為97.74%。精密量取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液(貯備液)適量共5份,分別置10 mL容量瓶中,加入甲醇溶液稀釋定容,使質(zhì)量濃度分別稀釋 2,20,100,500倍,上述 5份溶液和原對(duì)照品貯備液各精密量取 10 μL注入色譜柱。以脫水穿心蓮峰面積(A)為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度(C,μg)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回 歸,得 回歸方程 C=17.341 648 01 A+9.001 333 10,r=0.999 9。結(jié)果表明,脫水穿心蓮內(nèi)酯進(jìn)樣量在 3~1 535 μg范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

        圖1 高效液相色譜圖

        精密度試驗(yàn):精密吸取同一穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液和脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液,分別連續(xù)重復(fù)進(jìn)樣5次。結(jié)果穿心蓮內(nèi)酯RSD為0.9%,脫水穿心蓮內(nèi)酯的 RSD為0.7%,表明該方法的精密度良好。

        檢測限考察:取穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液(0.1 g/L)逐步稀釋,在 S/N=10時(shí),穿心蓮內(nèi)酯檢測限約為 0.5 ng。取脫水穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液(0.08 g/L)逐步稀釋,在 S /N=10 時(shí),脫水穿心蓮內(nèi)酯檢測限約為3.2 ng。

        穩(wěn)定性試驗(yàn):精密量取含穿心蓮內(nèi)酯0.100 9 g/L的對(duì)照品溶液,按擬訂方法操作,隔4 h測1次,共測5次,計(jì)算含量,結(jié)果的日內(nèi) RSD為0.47%。另取上述不同質(zhì)量濃度的溶液,同法處理,周內(nèi)重復(fù)測定3次,日間 RSD為0.89%。精密量取含脫水穿心蓮內(nèi)酯0.003 2 g/L的對(duì)照品溶液,按擬訂方法操作,隔4 h測1次,共測5次,計(jì)算含量,結(jié)果的日內(nèi) RSD為0.39%。另取上述不同質(zhì)量濃度的溶液,同法處理,周內(nèi)重復(fù)測定3次,結(jié)果的日間RSD 為 0.91%。

        2.4 樣品含量測定

        分別精密量取處理好的樣品溶液10 μL注入色譜柱,測得樣品中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯峰面積,由標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算蓮膽消炎片中穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量,見表1。樣品測定結(jié)果表明,蓮膽消炎片中穿心蓮內(nèi)酯在穿心蓮中的含量為1.39%,脫水穿心蓮內(nèi)酯在穿心蓮中的含量為1.97%。該值符合2010年版《中國藥典(一部)》限定穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯在穿心蓮的含量不得少于0.8%的規(guī)定。

        表1 蓮膽消炎片含量測定結(jié)果(n=6)

        3 討論

        穿心蓮的有效成分為二萜內(nèi)酯類和黃酮類化合物,主要有穿心蓮內(nèi)酯,脫水穿心蓮,新穿心蓮內(nèi)酯,去氧穿心蓮內(nèi)酯等成分[4],具有細(xì)胞分化誘導(dǎo)、保肝降酶作用[5],提高膽汁分泌量,并改變其物理特性等藥理作用[6]。試驗(yàn)中收集了不同產(chǎn)地的穿心蓮藥材,并對(duì)其中的脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量測定方法進(jìn)行了研究,除超聲時(shí)間增加到60 min外,測定方法和制劑測定方法都相同。用本法測定的5批藥材的結(jié)果與1995年版《中國藥典》中收載的薄層掃描測定結(jié)果比較,兩種方法測定的結(jié)果差異不大。而不同批號(hào)藥材的測定結(jié)果差異較大,鑒于大生產(chǎn)中的原材料受產(chǎn)地、來源、品種等因素的影響,使得制劑測定結(jié)果有較大差異,故對(duì)穿心蓮材料中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量應(yīng)該做限度規(guī)定[7]。

        脫水穿心蓮內(nèi)酯易于溶解在有機(jī)溶劑中,對(duì)比了甲醇、乙醇和醋酸乙酯的提取效果,甲醇的提取所測得的含量高,故選用甲醇作為提取溶劑。同時(shí)根據(jù)文獻(xiàn)[8],以乙酸乙酯、甲醇為溶劑提取進(jìn)行比較,結(jié)果因甲醇提取時(shí)間短,測定時(shí)雜質(zhì)峰干擾少,故以甲醇提取時(shí)含量測定方法的回收率高、精密度好,重現(xiàn)性也好。

        穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯分子極性較強(qiáng),比較適合用于高效液相色譜分析,常用的流動(dòng)相有甲醇-水-氯仿-三乙胺系統(tǒng)、甲醇-水-氯仿 -二乙胺系統(tǒng)和甲醇-水-乙腈系統(tǒng)等。根據(jù)本品情況及查閱相關(guān)文獻(xiàn),甲醇可以滿足穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯與雜質(zhì)峰的分離,且得到較好的峰形。故選擇了甲醇-水溶液(52∶48)作為流動(dòng)相,得到了較好的分離效果。

        文獻(xiàn)報(bào)道穿心蓮內(nèi)酯在200~250 nm波長處有較大吸收[9],用紫外分光光度與200~400 nm處掃描穿心蓮內(nèi)酯對(duì)照品溶液,結(jié)果顯示在225 nm處有最大吸收峰,極限也較穩(wěn)定。同樣,脫水穿心蓮內(nèi)酯在254 nm處測定效果最佳。

        有文獻(xiàn)報(bào)道,穿心蓮貯存年份越久,穿心蓮內(nèi)酯的含量則越低[10]。存放1年后,穿心蓮內(nèi)酯的含量可降低 50% ~80%。但另1篇文獻(xiàn)報(bào)道,將新采收的穿心蓮葉曬干并室溫存放1年后,再測定穿心蓮內(nèi)酯的含量,結(jié)果與新采收時(shí)的含量基本一樣,沒有降低[11]。兩種方法提示,穿心蓮內(nèi)酯含量的降低可能與其水分的含量成正比,這還需深入研究。

        [1]王文采.中國植物志(第27卷)[M].北京:科學(xué)出版社,1979:27.

        [2]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,1995:127.

        [3]國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典(一部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:794.

        [4]Matsuda T,Kuroyanacii M.Cell differentiutiorr inducing diterpents from Andrographis paniculata Nees[J].Chem Pharm Bull,1994,42(6):1 216.

        [5]Kapil A,Koul IB,Banerjee SK,et al.Antiherpatotoxic effets of major diterpenoid constituentsofAndrogrophis paniculata[J].Biochemical Pharmacology,1993,46(1):182.

        [6]Tripathi GS,Tripathi YB.Choleretic action of andrographolide obtained from Andrographispaniculata Nees[J].Phytatherapy Research,1991,5(4):176.

        [7]王永林,陶 玲,周寶珠,等.高效液相色譜法測定消炎利膽膠囊中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量[J].藥物分析雜志,2000,1(20):97.

        [8]陳敏武,徐德然,王崢濤,等.RP-HPLC法測定不同產(chǎn)地及采收期的穿心蓮內(nèi)酯中穿心蓮內(nèi)酯和新穿心蓮內(nèi)酯的含量[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào),1999,30(4):291-293.

        [9]孫春燕.高效液相色譜法測定消炎利膽膠囊中穿心蓮內(nèi)酯的含量[J].中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育,2008,6(9):187.

        [10]陳敏武,徐德然,王 崢,等.消炎利膽膠囊中脫水穿心蓮內(nèi)酯的含量研究[J].中國藥科大學(xué)學(xué)報(bào),1999,30(4):131.

        [11]金文姍,經(jīng) 晶.HPLC法測定穿心蓮及其提取物中穿心蓮內(nèi)酯的含量[J].中藥研究與信息,2001,3(8):135.

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