庹康秀，廖共山，胡仁統(tǒng)，雷丹青

（廣西醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)科學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，廣西 南寧 530021）

可口革囊星蟲富含人體需要的多種氨基酸、微量元素和可調(diào)節(jié)大腦功能的?；撬?，能增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，被譽(yù)為“海中冬蟲夏草”。我國(guó)多版藥典中記載了其食用和藥用價(jià)值。星蟲性寒，味甘、咸，具有滋陰降火、清肺補(bǔ)虛、活血強(qiáng)身及補(bǔ)腎養(yǎng)顏等功效[1－2]。牛磺酸有增強(qiáng)胰島素促進(jìn)肝糖原轉(zhuǎn)化的作用，而糖原是體力腦力活動(dòng)效率及持久力的物質(zhì)保證，能改善心臟及血液循環(huán)功能，具有保肝作用。筆者用水提法從可口革囊星蟲中提取多糖，并用苯酚－硫酸比色法對(duì)其含量進(jìn)行測(cè)定?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Lamb Da Bio 20型雙光束紫外分光光度計(jì)（美國(guó)PE公司）；Tomyr S －20 Ⅱ型高速冷凍離心機(jī)（Tomy Seiko Co．，Ltd．）；冰凍真空干燥儀（Nihon Freezer Co．，Ltd．）；DS － I型高速組織勻漿機(jī)（上海標(biāo)本模型廠）；AG245型電子分析天平（瑞士梅特勒公司）。水飽和苯酚，濃硫酸、丙酮等均為分析純；可口革囊星蟲（購(gòu)于南寧海鮮批發(fā)市場(chǎng)）。

2 方法與結(jié)果

2．1 可口革囊星蟲多糖的提取

取新鮮可口革囊星蟲，加入生理鹽水（1∶1），充分勻漿，置60 ℃ 水浴抽提 3 次，每次 0．5 h，間隔震蕩，離心（5 000 r／min）20 min，收集上清液，凍干備用。

2．2 溶液制備

精密稱取105℃下干燥至恒重的葡萄糖對(duì)照品20．2 mg，置200 mL容量瓶中，加水溶解，定量至刻度，得質(zhì)量濃度為0．101 g／L的對(duì)照品溶液。精密稱取可口革囊星蟲凍干粉，置10 mL容量瓶中，用蒸餾水溶解，稀釋至刻度，質(zhì)量濃度為0．15 g／L，作為供試品溶液。量取0．5 mL苯酚，用蒸餾水溶解定容至10 mL，置棕色容量瓶中，得5%苯酚試液。

2．3 檢測(cè)波長(zhǎng)選擇

精密吸取對(duì)照品溶液1 mL，置試管中，加5%苯酚試液0．5 mL，混勻，迅速加入 2．5 mL濃硫酸，振搖2 min，置沸水浴加 15 min，取出，置冰水中冷卻，以苯酚－硫酸溶液為空白，用紫外分光光度計(jì)在200～800 nm波長(zhǎng)范圍掃描。結(jié)果對(duì)照品溶液在490 nm波長(zhǎng)處均有最大吸收，故測(cè)定波長(zhǎng)定為490 nm。

2．4 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：參照文獻(xiàn)[3－4]方法并并略加改進(jìn)。分別吸取對(duì)照品溶液 0．1，0．2，0．3，0．4，0．5，0．6，0．7 mL，分別以蒸餾水補(bǔ)至 1 mL，使得其質(zhì)量濃度依次為 10．1，20．2，30．3，40．4，50．5，60．6，70．7 μg ／mL。依法顯色，于 490 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，求得回歸方程 Y＝0．019 2 X＋0．106 3，r＝0．998 8(n＝7），式中 Y表示吸光度，X為葡萄糖質(zhì)量濃度。結(jié)果表明，葡萄糖質(zhì)量濃度在10．0～70．7 μg／mL范圍內(nèi)與吸光度有良好的線性關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線為1條不通過原點(diǎn)的直線，故供試品溶液測(cè)定用外標(biāo)兩點(diǎn)法定量。

精密度試驗(yàn)：精密吸取質(zhì)量濃度為40．4 μg／mL的對(duì)照品溶液 5份，依法顯色后測(cè)定吸光度。結(jié)果的 RSD＝2．70%（n＝5），表明儀器精密度良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：每隔30 min測(cè)定同一供試品溶液在不同時(shí)間的吸光度。結(jié)果的 RSD＝1．45%，表明供試品溶液顯色后至少在3 h內(nèi)穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn)：取6支試管，精密加入供試品溶液 0．1 mL，精密加入適量對(duì)照品溶液，最后補(bǔ)足1 mL，依法測(cè)定含量。結(jié)果見表 1。

表1 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果

2．5 樣品含量測(cè)定

準(zhǔn)確吸取供試品溶液0．1 mL加水補(bǔ)至1 mL，按線性關(guān)系考察項(xiàng)下方法測(cè)定各提取物的吸光值。反應(yīng)濃度（C反應(yīng)）＝C樣品／D，多糖含量（%）＝C／C反應(yīng)×100%，式中 C為通過吸光值由回歸方程計(jì)算出的葡萄糖質(zhì)量濃度（μg／mL），D為多糖的稀釋倍數(shù)。結(jié)果多糖含量為15．85%。

3 討論

硫酸－苯酚法可使顯色后的多糖產(chǎn)生較好的吸收峰。本試驗(yàn)用此法測(cè)定可口革囊星蟲中多糖含量，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、穩(wěn)定性好。糖類成分分子量大，進(jìn)一步應(yīng)用現(xiàn)代化學(xué)提取分析方法加強(qiáng)多糖的化學(xué)研究?？煽诟锬倚窍x的開發(fā)，符合當(dāng)前廣大人民群眾追求營(yíng)養(yǎng)豐富、風(fēng)味獨(dú)特、種類豐富、口味多樣的綠色健康飲食文化需要，是一種開發(fā)前景較好的小型海洋經(jīng)濟(jì)動(dòng)物[5]?？煽诟锬倚窍x有較高的藥用價(jià)值，筆者將對(duì)可口革囊星蟲多糖作進(jìn)一步的分離純化，對(duì)其活性成分和生物學(xué)活性的作用作深入研究，為開發(fā)可口革囊星蟲功能性食品，研究海洋生物的多糖藥物和保健功能提供資料。

[1]李德偉，孫艷紅，譚 敏，等．一種新興的高蛋白海產(chǎn)品——可口革囊星蟲[J]．水產(chǎn)科技情報(bào)，2008，35（ 4）：174-175．

[2]黃曉春，蘇秀榕，蘇月萍．沙蠶和星蟲的營(yíng)養(yǎng)成分研究[J]．水產(chǎn)科學(xué)，2005，24（ 6）：10-11．

[3]鐘方曉，任海華，李 巖．多糖含量測(cè)定方法比較[J]．時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2007，18（8）：1 916-1 917．

[4]倪受東，嚴(yán)德江，徐先祥．大黃多糖的提取及含量測(cè)定 [J]．中國(guó)藥業(yè)，2007，16（13）：10-11．

[5]黃曉春，蘇秀榕，蘇月萍．沙蠶和星蟲的營(yíng)養(yǎng)成分研究 [J]．水產(chǎn)科學(xué)，2006，24（6）：10-11．