（長江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)部，湖北 荊州434020）

UF-1000i全自動尿有形成分分析儀，是對尿有形成分做熒光色素染色后，利用流式細(xì)胞學(xué)原理來識別和計數(shù)尿中紅細(xì)胞(RBC）、白細(xì)胞(WBC）、管型(CAST）、上皮細(xì)胞(EC）、細(xì)菌(BACT）、結(jié)晶(X，TAL）、精子(SPERM）及酵母菌(YLC）。它可以為臨床診治泌尿生殖系統(tǒng)疾病及全身相關(guān)疾病提供重要的信息[1]。在UF-1000i投入使用前，應(yīng)對其分析系統(tǒng)進行性能驗證，如果達(dá)到制造商規(guī)定的性能要求方可使用[2]。根據(jù)ISO15189：2007醫(yī)學(xué)實驗室認(rèn)可準(zhǔn)則的要求，我室通過對RBC、WBC、CAST、EC和BACT等5個定量參數(shù)的批內(nèi)精密度、日間精密度、正確度、攜帶污染率和線性范圍來驗證該儀器的性能。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Sysmex UF-1000i全自動尿有形成分分析儀，配套原裝試劑和質(zhì)控物。

1.2 方法

1.2.1 批內(nèi)精密度 收集患者新鮮尿液標(biāo)本，RBC、WBC、CAST、EC和BACT各項參數(shù)選取低、高兩個濃度的標(biāo)本在UF1000i尿有形成分分析儀上重復(fù)檢測11次，去掉第1次測試的結(jié)果，用余下的10次分別計算變異系數(shù)CV值。

1.2.2 日間精密度 使用兩個水平的尿液有形成分質(zhì)控物在UF1000i尿有形成分分析儀上連續(xù)檢測20d，統(tǒng)計所有檢測結(jié)果的均值、標(biāo)準(zhǔn)差SD和CV值。

1.2.3 正確度評估 由廠商組織，以ISO15189認(rèn)證實驗室(同濟醫(yī)院檢驗科）經(jīng)過校準(zhǔn)性能穩(wěn)定的儀器為基準(zhǔn)儀器，以我室使用的UF1000i尿有形成分分析儀為比對儀器，使用同批號兩個水平的尿液有形成分質(zhì)控物分別在基準(zhǔn)儀器和比對儀器上連續(xù)檢測5次，計算比對儀器與基準(zhǔn)儀器檢測結(jié)果均值的偏差(%），以此偏差評估我室UF1000i尿有形成分分析儀的測量正確度。

1.2.4 攜帶污染率測試 該測試用以測試儀器檢測結(jié)果的攜帶污染率，從而評價儀器的自清洗效率。取1份RBC與BACT高值尿樣，連續(xù)檢測3次，結(jié)果為H1、H2、H3。然后立即取1份RBC與BACT低值尿樣連續(xù)檢測3次，結(jié)果為L1、L2、L3，按下列公式計算攜帶污染率，判斷是否滿足儀器攜帶污染率的要求(RBC：≤0.1%或≤5.0／μl，BACT：≤0.05%或≤5.0／μl）。

1.2.5 線性驗證 選取接近預(yù)期上限的高值尿液樣本，分別按100%、80%、60%、40%、20%的比例用鞘液進行稀釋，每個稀釋度重復(fù)測定2次，計算均值。將實測值與理論值作比較(偏離應(yīng)滿足RBC≤10%，WBC≤10%，EC≤30%，BACT≤20%），計算a（斜率）、b（截距）值，得出y＝ax＋b，驗證線性范圍。要求：a值在(1±0.05）范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975。

1.2.6 生物參考區(qū)間驗證 分別選取20位男女健康者，其檢測結(jié)果至少90%在擬定的參考區(qū)間內(nèi)，說明實驗室使用的參考區(qū)間有效。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS13.0軟件進行回歸、線性分析。

2 結(jié) 果

2.1 批內(nèi)精密度

UF1000i尿有形成分分析儀批內(nèi)精密度測試結(jié)果及統(tǒng)計分析見表1。

表1 批內(nèi)精密度測試結(jié)果（n＝10）

2.2 日間精密度

UF1000i尿有形成分分析儀日間精密度測試結(jié)果及統(tǒng)計分析見表2。

表2 日間精密度測試結(jié)果（n＝20）

2.3 正確度評估

UF1000i尿有形成分分析儀正確度評估結(jié)果及統(tǒng)計分析見表3、4。

表3 低值比對結(jié)果及統(tǒng)計分析（n＝5）

表4 高值比對結(jié)果及統(tǒng)計分析（n＝5）

2.4 攜帶污染率測試

UF1000i尿有形成分分析儀攜帶污染率測試結(jié)果及統(tǒng)計分析見表5。

表5 攜帶污染率測試結(jié)果及統(tǒng)計分析

2.5 線性驗證

UF1000i尿有形成分分析儀線性驗證結(jié)果見表6～9，圖1～4。

表6 RBC線性驗證測試結(jié)果

圖1 RBC線性圖

表7 WBC線性驗證測試結(jié)果

圖2 WBC線性圖

表8 EC線性驗證測試結(jié)果

圖3 EC線性圖

表9 BACT線性驗證測試結(jié)果

圖4 BACT線性圖

2.6 生物參考區(qū)間驗證

UF1000i尿有形成分分析儀生物參考區(qū)間驗證結(jié)果見表10。

表10 生物參考區(qū)間驗證結(jié)果（n＝20）

3 討 論

UF-1000i全自動尿有形成分分析儀使用流式細(xì)胞計數(shù)法(FCM）技術(shù)來獲得尿細(xì)胞前向散射光及前向熒光的強度參數(shù)[3]。在對細(xì)胞中的特定物質(zhì)進行熒光染色并調(diào)節(jié)到懸浮狀后，在鞘液的包圍和約束下，細(xì)胞排成單列高速由流動室噴嘴噴出，形成細(xì)胞液柱。當(dāng)液柱通過檢測區(qū)在入射的激光束照射下產(chǎn)生前向散射光和側(cè)向散射光，它們分別反映細(xì)胞大小和顆粒信息，根據(jù)這些特性可以將細(xì)胞分類，從而定量顯示尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型和細(xì)菌等。這些指標(biāo)正是診斷泌尿系疾病，特別是腎臟疾病的重要實驗指標(biāo)之一[4]。

本實驗結(jié)果表明，儀器的批內(nèi)精密度、日間精密度、正確度、攜帶污染率和線性范圍均符合廠商和質(zhì)控品要求。在批內(nèi)精密度方面，選取的11次重復(fù)測定結(jié)果去掉第1次，可以將攜帶污染率降到最低，同時也避免了隨機誤差的產(chǎn)生。在日間精密度方面，由于尿液的穩(wěn)定性很差，故用質(zhì)控品來代替連續(xù)行20d的檢測。從表1和表2可以看出，無論是低濃度樣本還是高濃度樣本，各項指標(biāo)的CV值都比要求的低很多，說明儀器的重復(fù)性非常好。至于正確度方面，我室利用了外院校準(zhǔn)性能穩(wěn)定的儀器作為基準(zhǔn)儀器進行比對的方法，其偏差均遠(yuǎn)小于偏差要求。攜帶污染率是儀器性能評價中不可避免的評價指標(biāo)，尤其是在檢測泌尿生殖系統(tǒng)疾病的標(biāo)本時，攜帶污染率已成為影響測定結(jié)果的因素之一。表5中紅細(xì)胞和細(xì)菌的攜帶污染率均符合儀器說明書的要求。我室還對各項參數(shù)的線性范圍進行驗證。由于接近預(yù)期上限的高值尿液樣本很難獲得，故將尿液樣本中加入適量的抗凝血作為紅細(xì)胞和白細(xì)胞高值樣本，加入適量的移行上皮細(xì)胞和扁平上皮細(xì)胞作為上皮細(xì)胞高值樣本，加入適量的大腸埃希菌和葡萄球菌(泌尿系統(tǒng)感染的主要病原菌）作為細(xì)菌高值樣本[5]。從表6～表9和圖1～圖4看出，各項參數(shù)的相關(guān)系數(shù)r均在0.99～1之間，它們在各自的范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。本實驗室曾調(diào)查過荊州地區(qū)1860名健康人群[6]，并建立了自己的生物參考區(qū)間(見表10），然后根據(jù)NCCLS C28-A2文件推薦的方法進行驗證，此次驗證各項參數(shù)均在擬定的生物參考區(qū)間內(nèi)。

綜上所述，我室UF-1000i全自動尿有形成分分析儀精密度好，正確度高，攜帶污染率低，線性范圍廣，各項性能均符合儀器要求范圍，可應(yīng)用于臨床。

[1]李巖，王會平，李斌，等 .UF-1000i全自動尿液沉渣分析儀的紅細(xì)胞攜帶污染實驗及分析 [J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，26（5）：131-133.

[2]中國合格評定國家認(rèn)可委員會 .醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在體液學(xué)檢驗領(lǐng)域的指南 [S].CNAS-GL20，CNAS，2008.

[3]杭建峰，孫朝暉，石玉玲，等 .Sysmex UF-1000i自動尿沉渣分析儀的性能分析及臨床應(yīng)用 [J].檢驗醫(yī)學(xué)，2011，26（2）：108-110.

[4]王延群，公衍文.UF-1000i尿液有形成分分析儀、干化學(xué)法和鏡檢法對尿液分析的比較 [J].檢驗醫(yī)學(xué)，2011，26（12）：858-860.

[5]黃震，遲秀文，束振華，等 .UF-1000i臨床檢測性能評價及復(fù)檢條件探討 [J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，26（1）：76-78.

[6]張娟安，李承彬，王昌富，等 .UF-1000i尿液分析儀有形成分生物參考區(qū)間的調(diào)查 [J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，26（1）：130-131.