1 引 言

細(xì)胞色素P450酶（CYP）是重要的藥物代謝酶，參與了約75%臨床藥物的體內(nèi)代謝＼[1，2＼]。CYP超級(jí)家族中的6個(gè)同工酶（CYP1A2， CYP2B6， CYP2C9， CYP2C19， CYP2D6和CYP3A4）與藥物代謝的關(guān)系最為密切，它們代謝的藥物占全部CYP代謝藥物的99%以上＼[3，4＼]， 由CYP酶誘導(dǎo)或抑制引起的藥物相互作用是影響藥物臨床有效性和安全性的重要因素。評(píng)價(jià)新藥候選化合物對(duì)CYP酶的抑制和誘導(dǎo)作用已成為創(chuàng)新藥物研發(fā)過程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)＼[5＼]，有助于降低藥藥相互作用的風(fēng)險(xiǎn)，提高臨床合并用藥的安全性。國內(nèi)也有文獻(xiàn)報(bào)道混合探針法（“Cocktail”法）研究中藥對(duì)CYP酶的抑制和誘導(dǎo)作用＼[6，7＼]。

CYP同工酶的活性測(cè)定是評(píng)價(jià)酶抑制和誘導(dǎo)作用的關(guān)鍵技術(shù)，并以LCMS/MS技術(shù)同時(shí)檢測(cè)多種CYP酶底物或代謝產(chǎn)物的混合探針法（稱為“Cocktail”法）為首選方法＼[8＼]。其特點(diǎn)是能同時(shí)評(píng)價(jià)多個(gè)CYP酶的活性，單次實(shí)驗(yàn)過程中同時(shí)獲得多種亞型的代謝信息，方法簡便、經(jīng)濟(jì)，將個(gè)體間影響降至最低，應(yīng)用范圍廣、能滿足大量化合物的評(píng)價(jià)要求＼[9＼]?；旌咸结樂ɡ肅YP酶催化的特異性底物反應(yīng)，通過定量測(cè)定底物的消耗或產(chǎn)物的生成來確定酶的活性。由于CYP同工酶之間存在一定的底物交叉性，因此，檢測(cè)底物代謝產(chǎn)物的生成更能準(zhǔn)確地反映酶的活性。本研究選用美國FDA相互作用評(píng)價(jià)指南推薦的底物，針對(duì)非那西丁O脫乙基（CYP1A2）、安非他酮羥基化（CYP2B6）、甲苯磺丁脲4甲基羥基化（CYP2C9）、S美芬妥英4′羥基化（CYP2C19）、右美沙芬O去甲基化（CYP2D6）和咪達(dá)唑侖1′羥基化（CYP3A4）特異性反應(yīng)的代謝產(chǎn)物，建立靈敏、快速的超高效液相串聯(lián)質(zhì)譜法定量檢測(cè)方法，以體外人肝微粒體孵育液為代表性基質(zhì)，為CYP酶活性評(píng)價(jià)的高通量檢測(cè)提供了可靠的生物分析方法。