作為新型蛋白質(zhì)靶向配體，多肽在蛋白質(zhì)檢測中已獲得應(yīng)用，然而目前以多肽作為識(shí)別元件實(shí)現(xiàn)信號(hào)輸出的方法十分有限。南京大學(xué)李根喜課題組利用“多肽電化學(xué)探針”超分子復(fù)合物，設(shè)計(jì)了一種具有通用性的信號(hào)輸出方法 （Anal. Chem. dx.doi.org/10.1021/ac302906c），拓寬了多肽在蛋白質(zhì)檢測中的應(yīng)用。

“多肽電化學(xué)探針”超分子復(fù)合物是通過兩步形成的。如圖1，首先由電化學(xué)探針（甲基紫精）與8聚葫蘆脲形成1∶1包絡(luò)復(fù)合物。此復(fù)合物再與多肽的芳香族氨基酸的側(cè)鏈結(jié)合，從而形成“多肽電化學(xué)探針”超分子復(fù)合物。為利用超分子復(fù)合物檢測蛋白質(zhì)，多肽需含有兩個(gè)位點(diǎn)，一是形成超分子復(fù)合物所需位點(diǎn)，即芳香族氨基酸；二是待測蛋白質(zhì)質(zhì)結(jié)合位點(diǎn)。在該工作中這兩個(gè)位點(diǎn)相互重疊，所以多肽不能在結(jié)合待測蛋白質(zhì)的同時(shí)與電化學(xué)探針形成超分子復(fù)合物。為了檢測蛋白質(zhì)，將多肽修飾于金電極表面。多肽修飾電極與含有待測蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)樣品或生物樣本孵育后，電極表面部分多肽與待測蛋白質(zhì)結(jié)合；這些多肽的芳香族氨基酸即被所結(jié)合的蛋白質(zhì)遮蔽。剩余的多肽則通過它們暴露的芳香族氨基酸而與電化學(xué)探針形成超分子復(fù)合物，這樣就得到與待測蛋白質(zhì)豐度呈反相關(guān)的信號(hào)輸出。超分子復(fù)合物的形成僅需要芳香族氨基酸，而幾乎所有蛋白質(zhì)的特異性靶向肽都含有此類氨基酸。因此毫無同源性的待測蛋白質(zhì)，如該研究中的腫瘤壞死因子α和老年斑淀粉樣肽β，都能通過該方法獲得良好的定量測定（圖2），盡管它們相應(yīng)的特異性靶向肽不存在任何共同序列。