1引言
砷(As)為元素周期表中VA 族的類金屬元素,環(huán)境化學(xué)和毒理學(xué)領(lǐng)域?qū)⑵錃w入重金屬研究范疇\[1\]。各種As污染物可不同程度地引起急性、亞急性和慢性As中毒,進(jìn)而誘發(fā)皮膚癌、肺癌和膀胱癌\[2\]。我國自20世紀(jì)80年代初在新疆發(fā)現(xiàn)地砷病以來,又先后在內(nèi)蒙古、吉林等12個(gè)省(區(qū))發(fā)現(xiàn)了地砷病病區(qū)\[3\]。秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)作為環(huán)境毒性監(jiān)測生物和生態(tài)毒理學(xué)首選的模式生物之一,可用于污染物標(biāo)準(zhǔn)化毒性測試\[4\]。將分子生物學(xué)技術(shù)運(yùn)用于生態(tài)監(jiān)測中,可大大提高生物監(jiān)測器的靈敏度,縮短檢測時(shí)間,并可進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)預(yù)警\[5\]。應(yīng)激蛋白(Heat shock proteins,Hsps)也稱熱休克蛋白、熱應(yīng)激蛋白,是一類具有脅迫響應(yīng)特異性的分子伴侶\[6\],Hsp90具有普遍的應(yīng)激反應(yīng)特性\[7, 8\],作為機(jī)體在脅迫下的“自保性”反應(yīng),需要精確而高效的分析方法檢測應(yīng)激蛋白特異的脅迫應(yīng)答特征。
本研究綜合應(yīng)用免疫印跡法(Western blots)與酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測不同強(qiáng)度砷脅迫下秀麗隱桿線蟲熱休克蛋白Hsp90表達(dá)。通過比較溫度影響下C. elegans的24 h As毒理模擬實(shí)驗(yàn),及蛋白分析方法的對(duì)比,探討線蟲Hsp90作為砷污染分子生物標(biāo)志物的可能,對(duì)比免疫印跡法與酶聯(lián)免疫法分析了Hsp90脅迫應(yīng)答的量化特征。