劉 淼，楊曉燕，彭曉姣，黃 冕，許浩然，肖云川，冉 堅(jiān)，黃 靜

(1.四川大學(xué)華西藥學(xué)院，四川成都 610041;2.西南民族大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，四川成都 610041)

桂花(Osmanthus fragransLour.)系木犀科木犀屬植物。桂花的花、根或根皮均具有藥用價(jià)值，其中桂花根載于《綱目拾遺》，具有治療胃痛、牙痛、筋骨疼痛等作用［1］。

日香桂是屬于銀桂品系的一個新發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定品種。目前，國內(nèi)外尚未見對日香桂根化學(xué)成分的研究報(bào)道。本課題組曾對日香桂干花的非揮發(fā)性成分進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究［2，3］。為了了解日香桂根的藥用物質(zhì)基礎(chǔ)，本課題組對日香桂根進(jìn)行了化學(xué)成分研究。本文報(bào)道日香桂根中化學(xué)成分的分離和結(jié)構(gòu)鑒定。從日香桂根的95%乙醇提取物中分離出7個單體化合物，分別為β-胡蘿卜苷(1)，連翹脂素(2)，大黃酚(3)，大黃素甲醚(4)，β-谷甾醇(5)，β-谷甾酮(6)和 2-(4-羥基苯基)乙酸乙酯(7)，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR和13C NMR確證。其中2～4，6和7為首次從日香桂中發(fā)現(xiàn);2為首次從該屬中發(fā)現(xiàn);3和4為首次從該科中發(fā)現(xiàn)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

ACE 200型和Varian INO-VA400/54型核磁共振儀;Sephadex LH-20凝膠柱。

日香桂根，于2011年12月采自成都市溫江區(qū)，由黃靜教授鑒定其原植物為Osmanthus fragrans‘Rixianggui’;硅膠 G，青島海洋化工有限公司;其余試劑為分析純。

1.2 提取與分離

將桂花根粗粉3.1 kg用95%乙醇提取兩次(每次1 h)，過濾，合并提取液，減壓濃縮得浸膏317.5 g。浸膏經(jīng)硅膠柱層析［梯度洗脫劑:V(CH2Cl2)∶V(MeOH)=100 ∶0 ～0 ∶100］分離得到7個部分。7個部分分別經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，凝膠柱層析以及制備薄層色譜分離純化得到7個化合物——β-胡蘿卜苷(1)，連翹脂素(2)，大黃酚(3)，大黃素甲醚(4)，β-谷甾醇(5)，β-谷甾酮(6)和2-(4-羥基苯基)乙酸乙酯(7)。

2 結(jié)構(gòu)鑒定

1:白色固體(MeOH);1H NMR(400 MHz，DMSO-d6)譜圖在高場區(qū)顯示6個 CH3信號［δ:0.65(s，3H，18-H)，0.79 ～0.84(m，9H，26，27，29-H)，0.91(s，J=6.4 Hz，3H，21-H)，0.96(s，3H，19-H)］，一個烯氫信號［δ:5.33(brs，1H，6-H)］，一個含氧取代氫信號［δ:3.47(m，1H，3-H)］，以及一組糖端基氫信號［δ:4.21(d，J=7.2 Hz，1H，1'-H)］。13C NMR 譜中顯示 35個碳信號，其中兩個為烯碳信號［δ:140.9(C5)，121.9(C6)］，一個糖基端基碳信號［δ:102.5(C1')］。上述NMR數(shù)據(jù)說明1可能為甾體苷類化合物。進(jìn)一步將 1的 NMR數(shù)據(jù)，特別是13C NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［3，4］對照，兩者基本一致，故確定 1為 β-胡蘿卜苷;13C NMR(100 MHz，C5D5N)δ:37.4(C1)，30.2(C2)，78.0(C3)，39.9(C4)，140.9(C5)，121.9(C6)，32.0(C7)，32.1(C8)，50.3(C9)，36.9(C10)，21.2(C11)，39.3(C12)，42.4(C13)，56.8(C14)，24.5(C15)，28.5(C16)，56.2(C17)，11.9(C18)，19.4(C19)，36.4(C20)，19.0(C21)，34.2(C22)，26.3(C23)，46.0(C24)，29.4(C25)，19.2(C26)，20.0(C27)，23.3(C28)，12.1(C29);Glc:102.5(C1)，75.3(C2')，78.4(C3')，71.6(C4')，78.6(C5')，62.8(C6')。

2:白色固體 (乙酸乙酯);1H NMR顯示6個芳?xì)湫盘枺郐?6.84～6.94(m，6H，ArH)］，3個甲氧基信號［δ:3.91，3.90，3.89(s，each 3H，3×OCH3)］。13C NMR譜圖顯示21個碳信號，其中12 個芳碳信號［δ:130.9(C1)，108.9(C2)，148.8(C3)，148.0(C4)，111.0(C5)，117.7(C6)，133.0(C1')，108.6(C2')，146.8(C3')，145.3(C4')，114.3(C5')，119.2(C6')］，6 個脂肪碳信號［分為兩組:δ:82.0(C7)，50.1(C8)，71.0(C9);δ:87.7(C7')，54.5(C8')，69.7(C9')］，還有三個甲氧基信號［δ:55.9(3 ×OCH3)］。上述數(shù)據(jù)提示2的結(jié)構(gòu)可能為兩個C6～C3單元構(gòu)成的雙四氫呋喃型木質(zhì)素類化合物。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:6.84 ～6.94(s，6H，ArH)，5.61(s，1H，OH)，4.87(d，J=5.6 Hz，1H，7'-H)，4.42(d，J=6.8 Hz，1H，7-H)，4.12(d，J=9.2 Hz，1H，9-H)，3.91(s，3H，OCH3)，3.90(s，3H，OCH3)，3.89(s，3H，OCH3)，3.81 ～3.87(m，2H，9，9'-H)，3.29 ～3.37(m，2H，8'，9'-H)，2.89 ～2.94(m，1H，8-H);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:130.9(C1)，108.9(C2)，148.8(C3)，148.0(C4)，111.0(C5)，117.7(C6)，82.0(C7)，50.1(C8)，71.0(C9)，133.0(C1')，108.6(C2')，146.8(C3')，145.3(C4')，114.3(C5')，119.2(C6')，87.7(C7')，54.5(C8')，69.7(C9')，55.9(3 ×OCH3)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5～7］數(shù)據(jù)吻合，故鑒定2為連翹脂素。

3:黃色針狀結(jié)晶(CH2Cl2/MeOH);1H NMR顯示5個芳?xì)湫盘?，其中一組為芳?xì)溟g位偶合［δ:7.09(br.s，1H，2-H)，7.64(brs，1H，4-H)］，另一組為鄰位三芳?xì)湫盘枺郐?7.80(d，J=8.0 Hz，1H，5-H)，7.66(t，J=8.0 Hz，1H，6-H)，7.27(d，J=8.0 Hz，1H，7-H)］，一個芳甲基信號［δ:2.46(s，3H，CH3)］以及兩個活潑氫信號［δ:12.11，12.00(1H each，brs)］。13C NMR 顯示 15 個碳信號，其中兩個羰基信號［δ:192.4(C9)，181.9(C10)］，12個芳碳信號和一個芳甲基碳信號。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:12.11(s，1H，1-OH)，12.00(s，1H，8-OH)，7.80(d，J=8.0 Hz，1H，5-H)，7.66(t，J=8.0 Hz，1H，6-H)，7.64(s，1H，4-H)，7.27(d，J=8.0 Hz，1H，7-H)，7.09(s，1H，2-H)，2.46(s，3H，ArCH3);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:162.3(C1)，124.5(C2)，149.2(C3)，121.3(C4)，119.8(C5)，136.9(C6)，124.3(C7)，162.6(C8)，192.4(C9)，181.9(C10)，133.1(C4α)，133.5(C10α)，115.7(C8α)，113.6(C9α)，22.6(CH3)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］數(shù)據(jù)數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定3為大黃酚。

4:黃色針狀結(jié)晶(CH2Cl2/MeOH);1H NMR數(shù)據(jù)與3相似，表明二者可能同屬于蒽醌類化合物。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:12.33(s，1H，1-OH)，12.13(s，1H，8-OH)，7.63(s，1H，4-H)，7.37(d，J=2.4 Hz，1H，5-H)，6.69(d，J=2.4 Hz，1H，7-H)，7.09(s，1H，2-H)，3.94(s，3H，OCH3)，2.45(s，3H，ArCH3)。上述數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定4為大黃素甲醚。

5:無色針狀結(jié)晶(乙酸乙酯)，Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性，顯示該化合物為三萜或甾體類化合物。將5與β-谷甾醇對照品薄層色譜對照，多種溶劑系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)，兩者的Rf值均一致，故鑒定5為β-谷甾醇。

6:無色固體(乙酸乙酯);1H NMR(400 MHz，CDCl3)的高場區(qū)顯示出6個甲基信號［δ:0.71(s，3H，18-H)，0.81 ～0.86(m，9H，26，27，29-H)，0.93(d，J=6.8 Hz，3H，21-H)，1.18(s，3H，19-H)］，1個烯氫信號［δ:5.72(s，1H，4-H)］;13C NMR譜圖顯示29個碳信號，其中一個羰基信號［δ:199.7(C3)］和兩個烯碳信號［δ:123.7(C4)，171.8(C5)］。上述數(shù)據(jù)說明 6 可能為三萜或甾體類化合物。13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:35.7(C1)，34.0(C2)，199.7(C3)，123.7(C4)，171.8(C5)，32.9(C6)，32.0(C7)，36.1(C8)，53.8(C9)，38.6(C10)，21.0(C11)，39.6(C12)，42.4(C13)，56.0(C14)，24.2(C15)，28.2(C16)，55.8(C17)，11.9(C18)，17.4(C19)，35.6(C20)，18.7(C21)，33.8(C22)，26.0(C23)，45.8(C24)，29.1(C25)，19.8(C26)，19.0(C27)，23.0(C28)，11.9(C29)。6 的 NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9～12］數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定 6 為 β-谷甾酮。

7:無色固體(乙酸乙酯);1H NMR顯示芳甲基信號［δ:2.04(s，3H，9-H)］和兩個亞甲基信號［δ:4.24(t，J=7.2 Hz，2H，8-H)，2.86(t，J=7.2 Hz，2H，7-H)］，低場區(qū)出現(xiàn)一組對位取代的芳?xì)湫盘枺郐?7.06(d，J=8.4 Hz，2H，2，6-H)，6.76(d，J=8.4 Hz，2H，3，5-H)］;13C NMR顯示10個碳信號，其中六個芳碳信號［δ:115.4(C3，C5)，129.3(C1)，130.0(C2，C6)，154.7(C4)］和一個羰基信號［δ:172.0(C10)。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.06(d，J=8.4 Hz，2H，2，6-H)，6.76(d，J=8.4 Hz，2H，3，5-H)，5.30(brs，1H，OH)，4.24(t，J=7.2 Hz，2H，8-H)，2.86(t，J=7.2 Hz，2H，7-H)，2.04(s，3H，9-H);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:21.1(C9)，34.1(C7)，65.6(C8)，115.4(C3，C5)，129.3(C1)，130.0(C2，C6)，154.7(C4)，172.0(C10)。7 的 NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］數(shù)據(jù)對照，兩者基本一致，故鑒定7為2-(4-羥基苯基)乙酸乙酯。

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