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        蘆筍中硒元素的測定方法探究

        2013-04-09 06:05:46呂瑞芳秦博文
        河北醫(yī)學(xué) 2013年12期
        關(guān)鍵詞:硼氫化原子化氫化物

        于 輝, 呂瑞芳, 秦博文, 陳 超

        (承德護(hù)理職業(yè)學(xué)院, 河北 承德 067000)

        蘆筍(Asparagus officinalis Linn)學(xué)名石刁柏,百合科,天門冬屬,多年生草本植物,藥食兩用蔬菜?!拔陡?、性寒,入肺腎二經(jīng)”?,F(xiàn)代營養(yǎng)學(xué)分析,蘆筍含有特別豐富的組織蛋白、葉酸、核酸和較多的硒、鉬、鎂、錳、銅、鐵等微量元素,能有效地控制細(xì)胞異常生長,促使細(xì)胞生長正?;?,具有防止細(xì)胞癌變的作用,列30種抗癌植物之首,是世人公認(rèn)的抗癌藥物。硒能抑制致癌物的活力,提高機(jī)體的免疫力,適量補(bǔ)充硒可提高人體免疫力,預(yù)防腫瘤和心血管等疾病的發(fā)生[1]。硒的安全和適宜攝入量為50-400μg/d[2]。本文利用氫化物發(fā)生原子熒光法測定蘆筍中硒,旨在為蘆筍的研究開發(fā)提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 材料:AFS-230型雙道原子熒光光度計(jì);斷續(xù)流動氫化物發(fā)生器進(jìn)樣系統(tǒng);SFG-01B.500黃石市恒豐醫(yī)療器械有限公司電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱SFG-01B.500;WX-4000溫壓雙控微波消解系統(tǒng)。本法所用試劑均為優(yōu)級純;實(shí)驗(yàn)用水為超純水(電阻率為18.3M ·cm)。鐵氰化鉀溶液(100 g/L):取10.0g鐵氰化鉀,溶于100 mL超純水中。載流:10%鹽酸溶液,取100mL濃鹽酸稀釋至1000mL。硼氫化鉀溶液(20g·L-1):稱取10.0g硼氫化鉀溶于500mL 2g·L-1的氫氧化鈉溶液中,臨用前配制。鹽酸(6mol/L):將濃鹽酸和水按體積1:1的混合。硒標(biāo)準(zhǔn)溶液:100μg/mL購自國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心。蘆筍:產(chǎn)地,河南。

        1.2 方法:取新鮮20.00g蘆筍自然風(fēng)干粉碎經(jīng)微波消解后冷卻,將消解液洗入干凈的50 mL小燒杯中,低溫蒸發(fā)至2.0 mL時,加入6.0 mol/L 的鹽酸5.0 mL,繼續(xù)加熱至微沸5min,使六價硒還原為四價硒。冷卻后完全轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中,加入5.0mL 10%鐵氰化鉀,用10%鹽酸溶液定容到刻度,搖勻待測。測量條件設(shè)定為燈電流:60mA,負(fù)高壓:300V,原子化器高度8 mm,原子化器溫度:200℃,載氣流量:500mL/min,屏蔽氣流量:1000ml/min,讀數(shù)方式:峰面積,讀數(shù)延遲時間2s,讀數(shù)時間10s,測量方法:標(biāo)準(zhǔn)曲線法。

        1.3 樣品分析:開機(jī),按1.2設(shè)定儀器工作條件,輸入樣品重量、定容體積等有關(guān)參數(shù),原子化器點(diǎn)火,預(yù)熱30 min。采用斷續(xù)流動自動進(jìn)樣[3],依次測定空白、標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品的熒光強(qiáng)度,儀器自動計(jì)算樣品測量結(jié)果。

        2 結(jié)果

        2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:分別取 0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8mL硒標(biāo)準(zhǔn)溶液,按1.2方法步驟進(jìn)行處理,冷卻后完全轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,加入5.0mL 10%鐵氰化鉀,用10%鹽酸溶液定容到刻度,制作的標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為:0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8μg/mL。

        2.2 方法的精密度和準(zhǔn)確度:用0.6 μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液在上述條件下,平行測定11次,經(jīng)統(tǒng)計(jì)測量法計(jì)算其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD=1.28%。進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果表明,硒的加標(biāo)回收率為99.43%。

        2.3 樣品含量:按1.2設(shè)定儀器工作條件,對蘆筍樣品溶液進(jìn)行三次平行測定,得到樣品溶液硒的濃度為0.456μg/mL,經(jīng)計(jì)算樣品含量 0.57μg/g。

        3 討論

        微波消解的特點(diǎn)是化學(xué)反應(yīng)快;試劑用量少,空白值較低;樣品交叉污染機(jī)會少,可避免硒的揮發(fā),回收率高;效率高,操作簡單,不污染工作環(huán)境;節(jié)能,降耗[4]。試驗(yàn)考察了濃硝酸、濃硝酸與過氧化氫、濃硝酸與濃高氯酸不同消解體系以及比例和用量。結(jié)果表明,濃硝酸與濃高氯酸(8+2)mL的消化效果最好。在消解過程中,為了避免反應(yīng)過于激烈,防止壓力驟升,采用功率400W,壓力400kPa,時間設(shè)定為10min。原子化器高度是影響熒光信號的一個重要參數(shù)。通過作原子化器的高度與熒光強(qiáng)度的關(guān)系試驗(yàn),表明原子化器的高度為8mm時,熒光強(qiáng)度最好;信噪比最佳,原子化效率最好。對于光電倍增管,負(fù)高壓越高,測定的靈敏度越好,但負(fù)高壓過高使信號噪音偏高。通過作 210、240、260、270、280、290、300、310V 條件下,測定 1.0μg/mL硒標(biāo)準(zhǔn)溶液的熒光強(qiáng)度,計(jì)算信噪比。負(fù)高壓在300V時信噪比最大,故負(fù)高壓為300V。作1.0μg/mL硒標(biāo)準(zhǔn)溶液的燈電流與熒光強(qiáng)度曲線,計(jì)算信噪比。燈電流在60-70mA信噪比最好。因此,選擇燈電流60mA。硼氫化鉀濃度最關(guān)鍵,影響氫化物生成速度,試驗(yàn)表明,當(dāng)硼氫化鉀濃度在20g/L左右變化時,熒光強(qiáng)度趨于恒定,所以用20g/L硼氫化鉀進(jìn)行測定。

        在最佳測量條件下,方法的線性范圍為0-0.8μg/L,線性方程為:I=57.429C -2.919,線性相關(guān)系數(shù) r=0.9998,檢出限(3S/N)為0.024μg/mL。可見氫化物發(fā)生原子熒光法測定藥用植物中的硒是可行的。測定結(jié)果表明,鮮蘆筍的含硒量達(dá)0.57μg/g,比一般蔬菜(0.006-0.237)的含量高幾倍甚至幾十倍,具有一定保健功能,所含的天門冬酰胺、香豆素、蘆丁等有抑制癌細(xì)胞、擴(kuò)張血管、利尿解毒的多種作用,對預(yù)防癌癥、心腦血管病、高血壓、糖尿病、腎病、脂肪肝、皮膚病、支氣管病等有一定療效。營養(yǎng)學(xué)家和素食界人士均認(rèn)為它是健康食品和全面的抗癌中草藥。

        [1]李冬華,袁瑞榮,孫燕,等.中藥蘆筍的實(shí)驗(yàn)和臨床研究 Ⅰ、蘆筍抗腫瘤作用和免疫調(diào)節(jié)功能的初步實(shí)驗(yàn)研究[J].中國臨床藥理學(xué)雜志,1988,4(1):32 -39.

        [2]趙向東.硒的飲食推薦量[J].國外醫(yī)學(xué)地理學(xué)分冊,1998,19(1):9-11.

        [3]卑占宇,楊木華.氫化物發(fā)生原子熒光光譜法測定荊芥中汞和砷[J].理化檢驗(yàn) - 化學(xué)分冊,2010,46(8):971 -972.

        [4]徐桂杰,可成友,邊薔,等.有機(jī)樣品中硒消解方法的研究進(jìn)展[J].山西中藥,2009,25(11):49-51.

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