劉長月，趙 莉，倪亦非

(1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院 新疆草地資源與生態(tài)重點實驗室，新疆 烏魯木齊 830052；2.新疆蝗蟲鼠害測報防治站，新疆 烏魯木齊 830001)

紫花苜蓿(Medicagosativa)是世界上栽培面積最大的重要優(yōu)良牧草，因其適應(yīng)性強、營養(yǎng)價值高、適口性好等特點而被譽為“牧草之王”。我國苜蓿的傳統(tǒng)栽培地區(qū)是北方[1-2]，但目前也逐漸擴展至南方各地區(qū)[3]。苜蓿種植面積的擴大導(dǎo)致苜蓿種子的需求量日益增加,但隨著苜蓿種植年限的延長，其蟲害也在加重[4]。苜蓿籽蜂(Bruchophagusroddi)是危害紫花苜蓿種子的重要害蟲之一，主要以幼蟲在種子內(nèi)越冬，在種子調(diào)運過程中,被害種子易混在健康種子內(nèi)而被遠距離傳播。2009―2011年筆者對新疆呼圖壁種牛場生態(tài)站苜蓿種子田進行調(diào)查，苜蓿籽蜂對苜蓿種莢的為害率最高可達100.00%，對苜蓿種子的為害率為12.63%～29.86%，重者達33.33%。因此，本研究分析不同溫度條件下苜蓿籽蜂幼蟲在種子內(nèi)的越冬、發(fā)育情況，及溫度對苜蓿籽蜂幼蟲存活及對苜蓿種子發(fā)芽率的影響，以期為苜蓿種子的貯存及苜蓿籽蜂的防治提供理論基礎(chǔ)，為進一步研究苜蓿籽蜂生物學(xué)及生態(tài)學(xué)特性奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1供試種子 2010年10月新收獲的紫花苜蓿(新牧一號)種子。

1.2試驗設(shè)備 智能人工氣候箱(型號：RXZ)、數(shù)顯電熱恒溫培養(yǎng)箱(型號：HPX-9082 MBE)和三洋冰箱(型號：MEDICAL FREEZER)。

1.3試驗方法

1.3.1苜蓿籽蜂幼蟲越冬情況調(diào)查 將2010年10月從大田收獲的苜蓿種子分成兩份，一份儲存于有暖氣室內(nèi)(2010年10月―2011年6月，平均溫度為17.7 ℃)，另一份儲存于無暖氣室內(nèi)(2010年10月―2011年6月，平均溫度為7.6 ℃)；11月1日從無暖氣室內(nèi)種子中取出一部分儲存于25 ℃培養(yǎng)箱，所有種子均于2011年4月19日移出，并共同儲存于無暖氣室內(nèi)(4月15日停止供應(yīng)暖氣)。每月定期剖種，每次取50粒被害種子，分別統(tǒng)計死蟲數(shù)、活蟲數(shù)及有羽化孔種子數(shù)。將存活幼蟲浸泡，測量頭殼確定其齡期。每日記錄溫濕度變化。

1.3.2不同溫度對苜蓿籽蜂越冬幼蟲存活及對苜蓿種子發(fā)芽率影響的測定 將2010年10月收獲的苜蓿種子按被害、正常種子分別挑出，每100粒裝入紙袋，分別放入35、40、45和50 ℃恒溫培養(yǎng)箱，以及-10、-20和-30 ℃冰箱內(nèi)。每處理重復(fù)3次，分別處理1、2、3 d后取出，將被害種子用清水浸泡，統(tǒng)計死蟲數(shù)，以試驗前未處理的苜蓿種子內(nèi)籽蜂幼蟲死亡率為對照，計算各處理幼蟲死亡率及校正死亡率。將正常種子放在墊有濕濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，并放入濕棉球保濕，移入25 ℃人工氣候箱內(nèi)進行發(fā)芽試驗，分別測定種子發(fā)芽率[5]。

2 結(jié)果與分析

2.1苜蓿籽蜂在種子內(nèi)的越冬情況

2.1.1苜蓿籽蜂幼蟲越冬蟲態(tài)比例 各齡籽蜂幼蟲[6]可以在種子內(nèi)滯育越冬，但主要以2、3齡幼蟲越冬，占總數(shù)的85.72%，其中3齡幼蟲占57.15%(圖1)。

苜蓿種子一直儲存于有暖氣室內(nèi)(10―12月，平均溫度17.7 ℃，最高溫度為19.9 ℃，最低為14.9 ℃，平均濕度36.5%)，籽蜂幼蟲于12月20日開始化蛹，化蛹率為3.85%(圖1)。11月1日將部分苜蓿種子從無暖氣室內(nèi)轉(zhuǎn)移至25 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)，籽蜂幼蟲于12月20日也開始化蛹，化蛹率為3.70%。由于次年1、2月有暖氣室內(nèi)溫度降低，最低降至8.7 ℃，籽蜂發(fā)育速度緩慢，至3月16日化蛹率為22.22%，4月16日為33.33%,5月6日為50.00%,5月26日達100.00%。而培養(yǎng)箱內(nèi)溫度保持在25 ℃，至3月16日其化蛹率為23.53%，4月16日為40.00%,5月6日為60.00%，至5月26日化蛹率達100%。

苜蓿種子一直儲存于無暖氣室內(nèi)(10月―次年2月，平均溫度1.6 ℃，最高溫度為11.6 ℃，最低溫度為-7.9 ℃，平均濕度48.3%)，籽蜂幼蟲均于次年2月25日開始化蛹，化蛹率為5.00%。次年1、2月無暖氣室內(nèi)平均溫度分別為-7.9、-3.8 ℃，至3月16日其化蛹率僅為5.26%,4月16日為15.79%,5月6日為21.05%，5月26日為37.50%,6月9日為75.00%，6月19日達100.00%(圖1)。

2.1.2苜蓿籽蜂幼蟲越冬存活情況 隨著苜蓿種子儲存時間的增加，幼蟲死亡率也在增加，且儲存溫度越低，其死亡率越高(圖2)。

有暖氣室內(nèi)最低溫度出現(xiàn)在次年1、2月，平均溫度分別為8.7、13.1 ℃，籽蜂幼蟲死亡率從12月20日的28%升至3月16日的42%(圖2)。從無暖氣室內(nèi)移入25 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)的籽蜂幼蟲死亡率與有暖氣室內(nèi)基本一致，至3月16日其死亡率為42%。4月后，有暖氣室內(nèi)溫度超過20 ℃，至4月16日籽蜂幼蟲死亡率僅增加至44%，至6月19日籽蜂幼蟲死亡率為46%。25 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)4月幼蟲死亡率為44%，往后隨著幼蟲的發(fā)育，死亡率不再增加。

無暖氣室內(nèi)從12月至次年3月，儲存溫度一直在0 ℃以下，最高溫度僅為-0.4 ℃，最低溫度為-7.9 ℃，籽蜂幼蟲死亡率從12月20日的34%升高至3月16日的48%，至6月19日籽蜂幼蟲死亡率達52%(圖2)。

2.2高溫處理對越冬籽蜂幼蟲死亡率和種子發(fā)芽率的影響 在50 ℃條件下，處理1 d，重復(fù)3次，籽蜂幼蟲的死亡率與校正死亡率均達到了100%，極顯著高于其它處理(P<0.01)(表1)。其次為45 ℃分別處理1、2、3 d，校正死亡率分別為51.15%、69.60%和86.37%，各處理間差異極顯著(P<0.01)，與其它處理間差異也極顯著。在35 ℃條件下處理1、2、3 d，校正死亡率僅為0.75%、1.47%和1.79%，各處理間無顯著差異(P>0.05)。由此說明在50 ℃條件下，處理1、2、3 d均可殺死全部籽蜂幼蟲，而在35 ℃條件下對籽蜂幼蟲的致死作用不大。在45 ℃下處理2 d，種子發(fā)芽率可達98.00%，在40 ℃下處理3 d，種子發(fā)芽率為98.00%，均高于其它處理。

綜上所述，在高溫條件下，隨著溫度的升高和處理時間的增長，籽蜂幼蟲死亡率逐漸增加；隨著溫度的升高，苜蓿種子發(fā)芽率也逐漸升高。當(dāng)溫度的升高至45 ℃時，處理2 d后，種子發(fā)芽率隨處理時間的增加逐漸降低；當(dāng)溫度升高至50 ℃時，種子發(fā)芽率隨著處理時間的增加而降低。

2.3低溫處理對越冬籽蜂幼蟲死亡率和種子發(fā)芽率的影響 在-30 ℃條件下，處理1 d，重復(fù)3次，對籽蜂幼蟲死亡率的影響極顯著高于其它處理(P<0.05)，其死亡率均達100%。其次為-20 ℃處理3 d，校正死亡率為88.93%。在-20、-10 ℃處理條件下，各處理間差異均極顯著。在-30 ℃條件下處理3 d種子發(fā)芽率達最低，僅為85.67%，明顯低于所有其它處理。在-10 ℃處理時，種子發(fā)芽率略低于對照組，但顯著高于其它溫度處理(表2)。說明低溫處理條件不利于苜蓿種子的發(fā)芽。

圖1 苜蓿籽蜂幼蟲在4個溫度條件下的越冬發(fā)育情況Fig.1 Development situation of alfalfa seed chalcid overwintering larvae under four temperature conditions

由此可知，在低溫條件下，隨著溫度的降低及處理時間的增長，籽蜂幼蟲死亡率逐漸增加，苜蓿種子發(fā)芽率也逐漸降低。

3 討論及結(jié)論

苜蓿籽蜂主要以3齡幼蟲在苜蓿種子內(nèi)滯育越冬，占總越冬幼蟲的57.15%。眾所周知，溫度可影響昆蟲的生長、發(fā)育及存活等生命活動。當(dāng)外界環(huán)境溫度超過一定限度(過高或過低)時，昆蟲的生命活動即受到嚴重的影響[7]。種子儲存溫度不同，籽蜂幼蟲的發(fā)育進度、發(fā)育時間、存活率及死亡率也不相同。儲存于25 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)平均溫度最高，其幼蟲的存活率也最高，有暖氣室內(nèi)次之，而無暖氣室內(nèi)平均溫度最低，其幼蟲的死亡率最高。

圖2 苜蓿籽蜂幼蟲在4個溫度條件下的越冬存活情況Fig.2 Survival situation of alfalfa seed chalcid overwintering larvae under four temperature conditions

在適宜的溫度范圍內(nèi)，昆蟲的發(fā)育速率隨著外界溫度的升高而加快，但當(dāng)溫度降低到一定程度時，發(fā)育速率反而隨溫度的降低而變慢。同時儲存于有暖氣和無暖氣室內(nèi)的籽蜂越冬幼蟲，溫度較高的有暖氣室內(nèi)的幼蟲于當(dāng)年12月下旬開始發(fā)育，化蛹率為3.85%。溫度較低的無暖氣室內(nèi)的幼蟲于次年2月下旬開始發(fā)育，化蛹率為5.00%。11月上旬從無暖氣室內(nèi)移至25 ℃培養(yǎng)箱內(nèi)的籽蜂幼蟲，于當(dāng)年12月底開始發(fā)育，化蛹率為3.70%。

表1 不同高溫處理對籽蜂幼蟲死亡率、苜蓿種子發(fā)芽率的影響Table 1 Effects of high temperature treatments on alfalfa seed chalcid larvae mortality and germination rate of alfalfa seeds

表2 不同低溫處理對籽蜂幼蟲死亡率、苜蓿種子發(fā)芽率的影響Table 2 Effects of low temperature treatments on alfalfa seed chalcid larvae mortality and germination rate of alfalfa seeds

不同高溫條件處理苜蓿種子結(jié)果顯示，在50 ℃條件下處理1 d，籽蜂幼蟲的死亡率達100%，與魯挺和曹致中[8]干熱處理鷹嘴紫云英(Astragaluscicer)種子防治苜蓿籽蜂結(jié)果一致；處理1 d苜蓿種子的發(fā)芽率為93.33%，對照組的種子發(fā)芽率為94.67%。不同低溫條件處理苜蓿種子結(jié)果顯示，在-30 ℃條件下處理1 d，籽蜂幼蟲的死亡率達100%，苜蓿種子的發(fā)芽率為88.33%。

本研究表明，在50 ℃條件下處理1 d可殺死全部籽蜂越冬幼蟲，而對種子的發(fā)芽率影響不大，可在生產(chǎn)實踐中推廣運用?；蛟跍囟瓤蛇_-30 ℃的寒冷地區(qū)，將種子置于室外處理1 d，也可殺死全部籽蜂越冬幼蟲，但對苜蓿種子的發(fā)芽率稍有影響。在植物檢疫中，熱、冷處理尤其是熱冷的綜合處理作為非化學(xué)性檢疫處理是有效的[9]。但在生產(chǎn)實踐中，大批量的苜蓿種子采用干熱處理(50 ℃條件下處理1 d)或低溫處理(-30 ℃條件下處理1 d)，防治苜蓿籽蜂的效果是否仍顯著，是否還有比1 d處理時間更短且能達到相同殺蟲效果的處理，有待進一步深入研究。種子在出苗、發(fā)芽過程中會受到氣候、光照、水分等的影響，經(jīng)高溫、低溫處理后對苜蓿種子發(fā)芽率的影響是否會增大，也有待更深入的研究。

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