呂曉蓮，郭 宏，賈建會，陶國琴，彭義交，郭鴻源，曹 煒，徐增慧，田 旭

(1.北京市食品研究所，北京 100162；2.北京食品科學(xué)研究院，北京 100068)

羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物功能性研究

呂曉蓮1，郭 宏1，賈建會1，陶國琴2，彭義交1，郭鴻源1，曹 煒1，徐增慧1，田 旭1

(1.北京市食品研究所，北京 100162；2.北京食品科學(xué)研究院，北京 100068)

目的：羊肚菌是一種珍稀食(藥)用真菌，具有極高的營養(yǎng)和藥用價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)對羊肚菌液體發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠免疫功能和抗輻射功能的影響進(jìn)行研究，為該產(chǎn)品開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。方法：按照衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中的檢驗(yàn)方法，對小鼠進(jìn)行細(xì)胞免疫功能和單核-巨噬細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)以研究其增強(qiáng)免疫力功能；通過外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)、骨髓細(xì)胞DNA含量實(shí)驗(yàn)和小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)，研究其抗輻射功能。結(jié)果：羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物具有增強(qiáng)免疫功能的作用及對有對輻射危害有輔助保護(hù)功能的作用。結(jié)論：羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物具備開發(fā)成增強(qiáng)免疫及抗輻射方面保健品的潛力。

羊肚菌；發(fā)酵；增強(qiáng)免疫；抗輻射

羊肚菌(Morchella)隸屬子囊菌亞門(Ascomycotina)、盤菌綱(Discornycetes)、盤菌目(Pezizales)、羊肚菌科(Morchellaceae)、羊肚菌屬(Morchella)[1]，它是世界公認(rèn)的一種珍貴、稀有的食(藥)用真菌[2]。羊肚菌具有非常高的營養(yǎng)價(jià)值，張廣倫等[3]對新疆產(chǎn)粗柄羊肚菌子實(shí)體的營養(yǎng)成分進(jìn)行了測定，結(jié)果表明羊肚菌子實(shí)體中含有蛋白質(zhì)22.06%，粗脂肪3.82%，碳水化合物40.00%。與子實(shí)體相比，發(fā)酵所得到的羊肚菌菌絲體同樣具有很高的營養(yǎng)價(jià)值，并且菌絲體中必需氨基酸超過了子實(shí)體的含量[4-6]。

此外羊肚菌還具有較高的保健和藥用價(jià)值，早在《本草綱目》中就記載了它具有助消化、補(bǔ)腎、補(bǔ)腦等功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究還表明，羊肚菌含有多種活性物質(zhì)，Tomita[7]從羊肚菌中提純分離得到血小板集落抑制因子；Iwahara[8]、Saegusa[9]等從羊肚菌中獲得黑色素形成抑制劑；Cavazzoni[10]、Moriguchi等[11]研究還顯示羊肚菌具有較強(qiáng)的纖維素酶和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶活性；大量研究還表明，羊肚菌中最重要的生物活性物質(zhì)為羊肚菌多糖，它具有調(diào)節(jié)免疫、抗疲勞、降血脂、抗腫瘤等作用，并能減輕癌癥患者放化療引起的毒副反應(yīng)[12]；Duncan等[13]從羊肚菌子實(shí)體中分離出了一種分子質(zhì)量為106D的半乳甘露聚糖，具有提高巨噬細(xì)胞吞噬能力、提高人體免疫力的功效。

本項(xiàng)目組經(jīng)多年研究，優(yōu)化了羊肚菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵工藝條件，確定發(fā)酵產(chǎn)物的主要功效成分為羊肚菌粗多糖[14]。另外，相關(guān)研究也表明通過液體發(fā)酵獲得的羊肚菌多糖同樣具有生物活性，如陳彥等[15]通過對羊肚菌發(fā)酵液胞外多糖藥理活性的研究表明，羊肚菌胞外多糖(EPM)高、低兩個(gè)劑量均能顯著抑制S-180腫瘤的生長；Nitha等[16]研究表明羊肚菌菌絲體乙醇水溶液提取物具有抗氧化、抗炎癥和抗腫瘤的作用；Mau等[17]研究發(fā)現(xiàn)羊肚菌菌絲體甲醇提取物具有抗氧化的作用；贠建民[18]研究表明羊肚菌發(fā)酵液在提高機(jī)體對運(yùn)動負(fù)荷的適應(yīng)能力、抵抗疲勞的產(chǎn)生和加速疲勞消除方面具有明顯作用；張利平等[19]研究表明發(fā)酵羊肚菌多糖可以顯著增強(qiáng)小鼠的非特異性免疫及細(xì)胞免疫；孫玉軍等[20]研究表明發(fā)酵羊肚菌胞內(nèi)多糖對小鼠肝臟的損傷有保護(hù)作用。但到目前為止，尚未發(fā)現(xiàn)羊肚菌子實(shí)體和羊肚菌液體發(fā)酵產(chǎn)物具有抗輻射作用的相關(guān)研究報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)按照衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中的增強(qiáng)免疫力功能和對輻射危害有輔助保護(hù)功能檢驗(yàn)方法，研究羊肚菌液體發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠免疫功能和抗輻射作用的影響，為開發(fā)保健食品提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

羊肚菌菌種(Morchella esculenta(L.)Pers)，購自河南省微生物研究所；10oBx的羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物，中試實(shí)驗(yàn)制備；補(bǔ)體(豚鼠血清)、SA緩沖液、印度墨汁、都氏試劑、Hank’s液 上海撫生實(shí)業(yè)有限公司；小牛血清上海酶聯(lián)生物科技有限公司；綿羊紅細(xì)胞(SRBC) 鄭州百基生物技術(shù)有限公司；Gimesa染液 南京建成生物工程研究所。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物

選用1月齡清潔級昆明種小鼠，雌性，體質(zhì)量19～24g，由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號：SXXK-(軍)2002-001。動物實(shí)驗(yàn)室合格證號：SYXK(京)2002-0022。

1.3 儀器與設(shè)備

BIOSTAT?E小型發(fā)酵罐 德國貝朗國際生物工程公司；LABOROTA 4000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 德國Heidolph公司；DL-CJ-IND超級潔凈工作臺 北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司；754分光光度計(jì)、TDL-5-A高速離心機(jī)上海安亭科學(xué)儀器廠；游標(biāo)卡尺(精密度0.02mm) 北京精益恒源量具有限公司；FA2004電子天平 上海天平儀器廠；MEK-6318K全自動血球計(jì)數(shù)儀 上海東湖儀器試劑科技有限責(zé)任公司；Plus384酶聯(lián)免疫光譜分析儀美谷分子儀器(上海)有限公司；鈷源 北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部鈷源室。

1.4 方法

1.4.1 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物制備

圖 1 羊肚菌液體發(fā)酵工藝流程圖Fig.1 Procedure for preparation of fermentation products from Morchella

原料處理及配料：將大麥芽粉碎后，按1:10(m/V)加水?dāng)嚢瑁?7℃保持20min，再升溫至65℃保持1.5h左右，糖化至加碘溶液不顯藍(lán)色為止，再升至95℃保持10min滅酶，以4層紗布過濾，糖化成6oBx麥芽汁后取4L加入液體培養(yǎng)基中；稱90g大豆粉按1:20(m/V)加水?dāng)嚢?，再加?.04%中性蛋白酶，45℃保持2h后，再升至95℃保持10min滅酶，用4層紗布過濾，加入液體培養(yǎng)基中；稱50g紅茶粉碎后，按1:20加水?dāng)嚢瑁?0℃保持45min，用4層紗布過濾，加入液體培養(yǎng)基中；再加入300g蜂蜜，加水至10L。

發(fā)酵罐及培養(yǎng)基滅菌條件：發(fā)酵罐115℃，20min；培養(yǎng)基121℃，30min。然后將滅菌后培養(yǎng)基降至28℃。

接種：把原菌種按無菌操作接種在斜面培養(yǎng)基上，置28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)72h，取斜面菌種約5mm2菌膜接種在液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，置28℃旋轉(zhuǎn)振蕩培養(yǎng)，60r/min培養(yǎng)72h作為Ⅰ級搖瓶菌種，Ⅰ級菌種液按2%接種量接種在液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，置28℃旋轉(zhuǎn)振蕩培養(yǎng)，60r/min培養(yǎng)72h為Ⅱ級搖瓶菌種，將Ⅱ級搖瓶菌種2%接種到小發(fā)酵罐中，28℃培養(yǎng)72h，溶解氧量80%，控制 pH值為6.6。

菌絲體處理：將菌絲體加3倍水經(jīng)膠體磨磨碎，90℃浸提150min。

濃縮：將合并濾液濃縮用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮至10oBx，得到羊肚菌液體發(fā)酵產(chǎn)物，羊肚菌粗多糖含量≥220mg/100mL。

1.4.2 劑量選擇與受試液給予方式

經(jīng)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)表明，羊肚菌粗多糖含量為2.75mg/kg (以體質(zhì)量計(jì))時(shí)即有一定的生物活性。因此，建議人體推薦攝入量為：75mL/(人gd)(以人體質(zhì)量60kg計(jì)，即1.25mL/kg)。

按增強(qiáng)免疫功能和輻射危害有輔助保護(hù)功能檢驗(yàn)方法要求，分別設(shè)計(jì)3個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1個(gè)對照組，3個(gè)實(shí)驗(yàn)組給予受試液的量分別是人體推薦攝入量的30、10倍和1倍。具體如下：

將羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物濃縮至67oBx，取該濃縮液56mL加去離子水至100mL，混勻作為實(shí)驗(yàn)組3(即37.5mL/kg (以體質(zhì)量計(jì))，人體推薦攝入量的30倍)的受試液；再將實(shí)驗(yàn)組3的受試液分別稀釋3倍和30倍，作為實(shí)驗(yàn)組2(即12.5mL/kg，人體推薦攝入量的10倍)和實(shí)驗(yàn)組1(1.25mL/kg，人體推薦攝入量)的受試液。各組均按0.1mL/10g經(jīng)口灌胃，對照組小鼠給予去離子水。各組均喂以基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)。

1.4.3 動物實(shí)驗(yàn)方法

小鼠檢疫3d，未見異常，可用于實(shí)驗(yàn)。

將96只小鼠分成兩批進(jìn)行增強(qiáng)免疫功能實(shí)驗(yàn)，每批48只，一批用于細(xì)胞免疫功能ü ü遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)實(shí)驗(yàn)，一批用于單核-巨噬細(xì)胞功能üü小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)。將每批小鼠再隨機(jī)分為4組，每組12只分籠飼養(yǎng)，按實(shí)驗(yàn)劑量每天灌胃1次，連續(xù)30d，于第30天給予受試液后對小鼠進(jìn)行各項(xiàng)免疫指標(biāo)測定。

將80只小鼠分成兩批進(jìn)行對輻射危害有輔助保護(hù)功能實(shí)驗(yàn)，每批40只，一批用于外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)實(shí)驗(yàn)，另一批用于小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)和骨髓細(xì)胞DNA含量實(shí)驗(yàn)。將每批再隨機(jī)分成4組，每組10只分籠飼養(yǎng)，按實(shí)驗(yàn)劑量每天灌胃1次。

1.4.3.1 DTH測定(足跖增厚法)

于第30天給予受試液后，給每組12只小鼠腹腔注射體積分?jǐn)?shù)2%的綿羊紅細(xì)胞(SRBC)，每只注射0.2mL(約1h108個(gè)SRBC)。4d后測量左后足跖部厚度，然后在測量部位皮下注射體積分?jǐn)?shù)20% SRBC進(jìn)行攻擊，每只注射0.02mL(約1h108個(gè)SRBC)，注射后24h分別測量左后足跖部厚度，計(jì)算攻擊前、后的差值。

1.4.3.2 小鼠碳廓清實(shí)驗(yàn)

于第30天給予受試液后，給每組12只小鼠尾靜脈注射0.2mL用生理鹽水稀釋5倍的印度墨汁。待墨汁注入2min和10min后分別從內(nèi)眥靜脈叢取血20μL，加到2mL 0.1% Na2CO3溶液中，在600nm波長處測光密度(OD600nm)，以Na2CO3溶液作空白對照。再將小鼠處死，取肝臟和脾臟稱質(zhì)量，計(jì)算吞噬指數(shù)(α)。

式中：OD1、OD2分別表示墨汁注入2min和10min測定的光密度值；t1、t2分別為2min和10min。

1.4.3.3 白細(xì)胞總數(shù)(WBC)實(shí)驗(yàn)

連續(xù)40d給予受試液，在給予受試液的第27天時(shí)給各組小鼠均用5Gy Co60-γ射線全身照射1次。分別于照射前、照射后第3天和照射后第14天取尾血20μL，加到0.38mL 0.1%鹽酸中，混勻后加入血球計(jì)數(shù)板中，計(jì)算計(jì)數(shù)池中4個(gè)大方格中WBC，并分別比較輻射前、輻射后第3天和輻射后第14天對輻射組和各實(shí)驗(yàn)組WBC總數(shù)的變化。

1.4.3.4 小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)和骨髓細(xì)胞DNA含量實(shí)驗(yàn)

連續(xù)30d給予受試液，在給予受試液的第27天時(shí)給各組小鼠均用5Gy Co60-γ射線全身照射1次。于照射后第3天頸椎脫臼處死小鼠，常規(guī)取胸骨，用小牛血清沖洗胸骨骨髓腔制成細(xì)胞懸液涂片，涂片自然干燥后，放入甲醇中固定5～10min，放入Gimesa應(yīng)用液中，染色5～10min，立即用磷酸鹽緩沖液沖洗，晾干，油鏡下對每只小鼠觀察1000個(gè)嗜多染紅細(xì)胞，計(jì)算含微核細(xì)胞數(shù)及微核細(xì)胞率，微核率以千分率表示。剝離出股骨，取1mL Hank’s液，沖出股骨中的全部骨髓細(xì)胞，混勻后用酶聯(lián)免疫光譜分析儀于波長260nm處測定骨髓細(xì)胞DNA含量。核酸的最大吸收波長為260nm，在波長260nm時(shí)，OD260nm值為1相當(dāng)于DNA質(zhì)量濃度50μg/mL。

1.4.3.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

2 結(jié)果與分析

2.1 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠DTH的影響

綿羊紅細(xì)胞(SRBC)刺激T淋巴細(xì)胞增殖成為致敏淋巴細(xì)胞，攻擊部位出現(xiàn)腫脹的程度反映了遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)程度。測量結(jié)果見表1。由表1可知，實(shí)驗(yàn)組2和實(shí)驗(yàn)組3的小鼠足跖厚度增加明顯差異具有顯著性或極顯著性(P＜0.05或P＜0.01)，說明羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物具有細(xì)胞免疫功能。

表 1 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠DTH的影響(±s,n＝12)Table 1 Effect of Morchella fermentation products on DTH of rats (±s,n＝12)

表 1 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠DTH的影響(±s,n＝12)Table 1 Effect of Morchella fermentation products on DTH of rats (±s,n＝12)

注：*. 與陰性對照組比較有顯著性差異(P＜0.05)；**. 與陽性對照組比較有極顯著性差異(P＜0.01)。下同。

組別足跖增加厚度/mmP值實(shí)驗(yàn)組10.24f0.090.272實(shí)驗(yàn)組20.28f0.06*0.027實(shí)驗(yàn)組30.29f0.09**0.008陰性對照組0.20f0.06

2.2 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠碳廓清能力的影響

表 2 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠碳廓清能力的影響(x±s,n＝12)Table 2 Effect of Morchella fermentation products on carbon clearance capacity of rats (x±s,n＝12)

由表2可知，實(shí)驗(yàn)組2和實(shí)驗(yàn)組3的小鼠碳廓清能力明顯升高，與對照組相比差異具有顯著性或極顯著性(P＜0.05或P＜0.01)，說明羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物具有單核-巨噬細(xì)胞功能。

2.3 小鼠輻射模型成立檢驗(yàn)

表 3 小鼠輻射模型對照組輻射前后白細(xì)胞總數(shù)自身比較(±s,n＝12)Table 3 Comparison of rat model control group before and after irradiations, n＝12)

表 3 小鼠輻射模型對照組輻射前后白細(xì)胞總數(shù)自身比較(±s,n＝12)Table 3 Comparison of rat model control group before and after irradiations, n＝12)

輻射模型對照組白細(xì)胞總數(shù)/(109/L)F值P值輻射前12.73f2.10輻射后第3天1.38f0.35280.30.000

由表3可知，與輻射前相比較，輻射后第3天輻射模型對照組的白細(xì)胞總數(shù)急劇下降，差異具有極顯著性，F(xiàn)值為280.3，P值為0.000，說明輻射損傷對照組成立，可以進(jìn)行相應(yīng)的功能實(shí)驗(yàn)。

2.4 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對WBC計(jì)數(shù)的影響

表 4 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對WBC計(jì)數(shù)的影響(±s,n＝10)Table 4 Effect of Morchella fermentation products on WBC of rats (±s,n＝10)

表 4 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對WBC計(jì)數(shù)的影響(±s,n＝10)Table 4 Effect of Morchella fermentation products on WBC of rats (±s,n＝10)

注：*.與輻射模型對照組相雙有顯著性差異(P＜0.05)；**.與輻射模型對照組相比有極顯著性差異(P＜0.01)。下同。

組別輻射前輻射后第3天輻射后第14天實(shí)驗(yàn)組112.68f 1.871.62f 0.452.19f 0.41實(shí)驗(yàn)組212.59f 2.051.87f 0.35**2.49f 0.41*實(shí)驗(yàn)組312.75f 1.801.97f 0.34**2.54f 0.43**輻射模型對照組12.73f 2.111.38f 0.352.01f 0.40

由表4可知，輻射前各實(shí)驗(yàn)組與輻射模型對照組的WBC總數(shù)比較，差異無顯著性，可以進(jìn)行照射和后續(xù)實(shí)驗(yàn)。輻射后第3天和輻射后第14天各實(shí)驗(yàn)組的WBC總數(shù)均高于輻射模型對照組，其中實(shí)驗(yàn)組2和實(shí)驗(yàn)組3的WBC總數(shù)與輻射模型對照組相比，白細(xì)胞總數(shù)明顯增多，差異具有顯著性或極顯著性(P＜0.05或P＜0.01)，說明羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物具有抗輻射損傷的功能，可降低血液系統(tǒng)受損程度。

2.5 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)和骨髓細(xì)胞DNA含量的影響

表 5 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)和骨髓細(xì)胞DNA含量的影響(±s,n＝10)Table 5 Effect of Morchella fermentation products on bone marrow cell micronucleus and DNA content of myeloma cells in mice(±s,n＝10)

表 5 羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物對小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)和骨髓細(xì)胞DNA含量的影響(±s,n＝10)Table 5 Effect of Morchella fermentation products on bone marrow cell micronucleus and DNA content of myeloma cells in mice(±s,n＝10)

組別觀察嗜多染紅細(xì)胞數(shù)含微核細(xì)胞數(shù)細(xì)胞微核率/骨髓細(xì)胞DNA含量(OD600nm值)實(shí)驗(yàn)組110h100011.4f2.411.42.39f0.87實(shí)驗(yàn)組210h100011.2f1.811.2*3.45f1.31實(shí)驗(yàn)組310h100010.8f2.410.8*4.10f2.12*輻射模型對照組10h100013.8f3.913.82.38f0.78

由表5可知，照射后第3天，各實(shí)驗(yàn)組小鼠骨髓細(xì)胞微核率明顯低于輻射模型對照組，其中實(shí)驗(yàn)組2和實(shí)驗(yàn)組3的小鼠骨髓細(xì)胞微核率與輻射模型對照組相比，差異具有顯著性(P＜0.05)。另外，再由骨髓細(xì)胞DNA含量測定結(jié)果可知，各實(shí)驗(yàn)組小鼠骨髓細(xì)胞DNA含量明顯高于輻射模型對照組，其中實(shí)驗(yàn)組3的小鼠骨髓細(xì)胞DNA含量與輻射模型對照組相比，差異具有顯著性(P＜0.05)。說明羊肚菌液體發(fā)酵產(chǎn)物具有抗輻射損傷的功能，可降低機(jī)體染色體和造血系統(tǒng)受損程度。

3 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)按照衛(wèi)生部《保健食品檢驗(yàn)與評價(jià)技術(shù)規(guī)范》(2003年版)中的檢驗(yàn)方法，對羊肚菌液體發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行增強(qiáng)免疫力功能和對輻射危害有輔助保護(hù)功能的實(shí)驗(yàn)研究。通過對小鼠細(xì)胞免疫功能和單核-巨噬細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物具有增強(qiáng)免疫功能的作用；同時(shí)通過外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)、骨髓細(xì)胞DNA含量實(shí)驗(yàn)和小鼠骨髓細(xì)胞微核實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明羊肚菌發(fā)酵產(chǎn)物還具有對輻射危害有輔助保護(hù)功能的作用。該研究結(jié)果為將羊肚菌液體發(fā)酵產(chǎn)物開發(fā)成保健食品產(chǎn)品提供了科學(xué)依據(jù)。

[1] 黃健屏. 食用菌栽培學(xué)[M]. 湖南: 湖南科學(xué)技術(shù)出版社, 1993: 143.

[2] 陳向東, 朱戎, 蘭進(jìn). 羊肚菌的研究進(jìn)展[J]. 食用菌學(xué)報(bào), 2002, 9(2): 56-61.

[3] 張廣倫, 肖正春. 羊肚菌的營養(yǎng)成分及其利用[J]. 食用菌, 1993(3): 3-4.

[4] HATANAKA S L. A new amino acid isolated from Morchella esculenta and related species[J]. Phytochemistry, 1969, 8(7): 1303-1308.

[5] AUAOUIN P, VIDAL J P. Volatile compounds from aroma of some edible mushroom morel(Morchella conica)[J]. Sci Aliments, 1989, 9(1): 185-193.

[6] DEFFIEUX G, BAUTE R, BAUTE M-A, et al. 5-D-anhydrofructose, the precursor of the pyrone microthecin in Morchella vulgairs[J]. Phytochemistry, 1987, 26(5): 1391-1393.

[7] TOMITA J. Platelet aggregation inhibitors isolation from Morchella for foods: Japan, JP0646798[P]. 1994. [2012-09-23].

[8] IWAHARA M, OKAYANMA Y. Skin-lightening cosmetics containing melanin formation inhibitor extracted from cultured Morchella: Japan, JP0725822[P]. 1995. [2012-10-23].

[9] SAEGUSA T. Skin-lightening cosmetics containing melanin formation inhibitor extracted from cultured basidiomycetes: Japan, JP07316035[P]. 1995. [2012-10-11].

[10] CAVAZZONI V, MANZONI M. Cellulolytic activities produced by mycelia of some mushrooms[J]. Ann Microbiol Enzimol, 1988, 38(2): 181-192.

[11] MORIGUCHI M, YAMADA M, SUENAGA S, et al. Partial purification and properties of gamma-glutamyltranspeptidase from mycelia of Morchella esculenta[J]. Arch Microbil, 1986, 144(1): 15-19.

[12] 孫曉明, 張衛(wèi)明, 吳素玲, 等. 羊肚菌免疫調(diào)節(jié)作用研究[J]. 中國野生植物資源, 2001, 20(2): 12-13.

[13] DUNCAN C J G, PUGH N, PASCO D S, et al. Isolation of a galactomannan that enhances macrophage activation from the edible fungus Morchella esculenta[J]. J Agri Food Chem, 2002, 50(20): 5683-5685.

[14] 賈建會, 呂曉蓮, 樊利青. 深層發(fā)酵羊肚菌多糖的提取、分離及純化研究[J]. 食品科學(xué), 2002, 23(4): 59-63.

[15] 陳彥, 潘見, 周麗偉, 等. 羊肚菌胞外多糖抗腫瘤作用的研究[J]. 食品科學(xué), 2008, 27(9): 555-558.

[16] NITHA B, MEERA C K, JANARDHANAN K K. Anti-inf l ammatory and antitumor activities of cultured mycelium of morel mushroom, Morchella esculenta[J]. Curr Sci, 2007, 92(2): 235-239.

[17] MAU J L, CHANG C N, HUANG S J, et al. Antioxidant properties of methanolic extracts from Grifola frondosa, Morchella esculenta and Termitomyces albuminosus mycelia[J]. Food Chemistry, 2004, 87(1): 111-118.

[18] 贠建民. 羊肚菌發(fā)酵液對小鼠抗疲勞作用實(shí)驗(yàn)研究[J]. 衛(wèi)生研究, 1997, 26(5): 330-332.

[19] 張利平, 陳彥, 王子堯, 等. 羊肚菌胞外多糖免疫活性研究[J]. 中國食用菌, 2009, 28(3): 47-49.

[20] 孫玉軍, 陳彥, 周正義, 等. 羊肚菌胞內(nèi)多糖對小鼠急性肝損傷的影響[J]. 中國食用菌, 2008, 27(2): 41-45.

Functional Evaluation of Fermentation Products from Morchella

Lü Xiao-lian1，GUO Hong1，JIA Jian-hui1，TAO Guo-qin2，PENG Yi-jiao1，GUO Hong-yuan1，CAO Wei1，XU Zeng-hui1，TIAN Xu1
(1. Beijing Food Research Institute, Beijing 100162, China；2. Beijing Academy of Food Sciences, Beijing 100068, China)

The immunoregulatory and anti-radiation effect of fermentation products (fermentation supernatant plus hot water extract of Morchella mycelia) from Morchella in mice was evaluated according to the Technical Standards for Testing & Assessment of Health Food (2003 version, Ministry of Health, People’s Republic of China) by mouse monocyte-macrophage function test, peripheral leukocyte count, DNA content of myeloma cells test and mouse bone marrow cell micronucleus test. Our results showed that these fermentation products can exert an immunoenhancing effect in mice and helped protect against radiation hazards and hence have great potential to be developed as immunoenhancing and anti-radiation products.

Morchella；fermentation；immunoenhancing effect；anti-radiation

TQ920.1；TS218

A

1002-6630(2013)01-0311-04

2012-11-23

呂曉蓮(1970ü)，女，高級工程師，碩士，研究方向?yàn)槭称饭こ膛c營養(yǎng)。E-mail：xiaolian1992@sina.com