楊曉峰 陳文學(xué) 張鳳霞 楊 明*

（1吉林省通化興華藥業(yè)有限責(zé)任公司，通化134008；2吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院新藥研究開(kāi)發(fā)中心，長(zhǎng)春130021）

六年生鮮人參毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)研究※

楊曉峰1陳文學(xué)2張鳳霞1楊 明2*

（1吉林省通化興華藥業(yè)有限責(zé)任公司，通化134008；2吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院新藥研究開(kāi)發(fā)中心，長(zhǎng)春130021）

目的 觀察六年生鮮人參急性毒性及長(zhǎng)期毒性，評(píng)價(jià)其食用安全性。方法 急性毒性試驗(yàn)以最大給藥體積（0.35g／ml）給予大鼠，24h內(nèi)灌胃給藥3次，連續(xù)觀察14d；長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)采用灌胃給予大鼠高、中、低3個(gè)劑量（8.0、4.0、2.0g／kg）的六年生鮮人參，連續(xù)給藥30d，進(jìn)行血液學(xué)、血液生化、臟體比、組織病理學(xué)檢查、常規(guī)檢查以及可逆性觀察。結(jié)果 急性毒性試驗(yàn)未見(jiàn)明顯中毒癥狀，不同性別大鼠經(jīng)口最大耐受劑量（MTD）均大于20.4g／kg。長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果表明，3個(gè)六年生鮮人參劑量組大鼠的外觀體征、行為活動(dòng)、體質(zhì)量、食物利用率、血液學(xué)、血液生化學(xué)、臟體比及病理組織學(xué)檢查均未見(jiàn)異常，可逆性觀察表明六年生鮮人參對(duì)大鼠未引起延遲毒性，與空白對(duì)照組比較差異均無(wú)顯著性（P＞0.05）。結(jié)論 六年生鮮人參屬于實(shí)際無(wú)毒物，長(zhǎng)期服用是安全的。

六年生鮮人參；急性毒性；長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)

鮮人參為五加科人參屬植物人參（Panax ginseng C．A.Mey.）經(jīng)過(guò)清洗的新鮮根及根莖，具有大補(bǔ)元?dú)?、補(bǔ)脾益肺、安神益智、生津等功效［1］。本文參照《GB 15193.1-2003食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序》及《新資源食品安全評(píng)價(jià)規(guī)程》的要求，通過(guò)急性毒性試驗(yàn)，長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)對(duì)六年生鮮人參的毒理學(xué)進(jìn)行了初步的研究，為其食用的安全性依據(jù)。

1 材料

1.1受試物六年生鮮人參（含水量71.03%）由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院左家特產(chǎn)研究所提供，試驗(yàn)時(shí)粉碎，用蒸餾水配制成所需濃度。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物及環(huán)境清潔級(jí)Wistar大鼠，均購(gòu)自吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。動(dòng)物合格證號(hào)為：SCXK（吉）-2003-0001。根據(jù)相應(yīng)試驗(yàn)選擇性別、體質(zhì)量和數(shù)量的動(dòng)物。動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境：溫度為（23±1）℃；相對(duì)濕度50%±10%。

2 方法［2］

2.1大鼠急性毒性試驗(yàn)取大鼠40只，體質(zhì)量130～ 140g，雌雄各半，按體質(zhì)量隨機(jī)分為2組（對(duì)照組及六年生鮮人參組），試驗(yàn)前禁食16小時(shí)，自由飲水，于24小時(shí)內(nèi)灌胃給予六年生鮮人參3次，累計(jì)給藥量20.4 g／kg，對(duì)照組給予同體積蒸餾水。給藥后連續(xù)觀察14d內(nèi)大鼠的外觀體征、行為活動(dòng)、精神狀態(tài)、腺體分泌、呼吸、排尿、糞便、體質(zhì)量變化以及死亡等情況。

2.2長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)取清潔級(jí)Wistar大鼠80只，按體質(zhì)量隨機(jī)分為正常對(duì)照組，六年生鮮人參8.0、4.0和2.0g／kg三個(gè)服用劑量組，每組20只，雌雄各半。服用前，將六年生鮮人參用水果疏菜榨汁攪拌機(jī)粉細(xì)，蒸餾水配制成20g六年生鮮人參／100ml、10g六年生鮮人參／100ml和5g六年生鮮人參／100ml三個(gè)濃度的懸液，供動(dòng)物灌服。每日上午8時(shí)和下午16時(shí)各口服灌胃一次，連續(xù)30d。灌胃體積為20ml／kg體質(zhì)量／次，對(duì)照組動(dòng)物灌胃給予等體積的蒸餾水。停用后，恢復(fù)性觀察2周。試驗(yàn)期間對(duì)大鼠的外觀體征，行為活動(dòng)、腺體分泌、呼吸、排尿、糞便等進(jìn)行觀察、記錄，對(duì)體質(zhì)量增長(zhǎng)、體溫、攝食量等指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，并分別于灌服30d后和2周恢復(fù)期結(jié)束后進(jìn)行血液學(xué)［紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、平均紅細(xì)胞容積（MCV）、血紅蛋白（Hb）含量、紅細(xì)胞容積（HCT）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白（MCH）含量、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RET）、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、中性粒細(xì)胞（G）、淋巴細(xì)胞（L）、單核細(xì)胞（M）、血小板計(jì)數(shù)（PIT）、凝血酶原時(shí)間（PT）、活化部分凝血酶原時(shí)間（APTT）］、血液生化學(xué)［丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶（ALT）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、肌酐（CRE）、尿素氮（Urea）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）、總膽紅素（TBIL）、總膽固醇（CHOL）、甘油三脂（TG）］、檢測(cè)、臟體比和病理組織學(xué)檢查。

2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理組間比較用t檢驗(yàn)。

3 結(jié)果

3.1急性毒性試驗(yàn)試驗(yàn)期間，各組大鼠外觀體征、行為活動(dòng)、腺體分泌、呼吸、排尿、糞便等一般情況未見(jiàn)異常；2組大鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；未見(jiàn)其他異常反應(yīng)，且無(wú)一例死亡。給藥14d后處死動(dòng)物，肉眼觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各臟器未見(jiàn)異常。因給藥體積，濃度均已達(dá)到最大限度，故六年生鮮人參灌胃給藥大鼠的最大耐受劑量大于20.4g／kg，表明其無(wú)急性毒性作用。

表1 六年生鮮人參對(duì)大鼠急性毒性體質(zhì)量增長(zhǎng)的影響

3.2大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)

3.2.1對(duì)動(dòng)物一般狀態(tài)情況在整個(gè)試驗(yàn)期間，空白對(duì)照組及服用人參各劑量組動(dòng)物行為活動(dòng)正常，反應(yīng)機(jī)敏，毛發(fā)正常，飲食、尿便正常。與對(duì)照組動(dòng)物相比未見(jiàn)異常改變。無(wú)死亡動(dòng)物。

3.2.2對(duì)體質(zhì)量增長(zhǎng)、體溫及攝食量的影響在30d服用人參期間與2周恢復(fù)觀察期間，各組大鼠生長(zhǎng)狀態(tài)良好，服用人參各劑量組動(dòng)物的體溫、攝食量和體質(zhì)量增長(zhǎng)均無(wú)異常，與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異（P＞0.05）。體質(zhì)量增長(zhǎng)部分?jǐn)?shù)據(jù)見(jiàn)表2。

表2 六年生鮮人參對(duì)大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)體質(zhì)量增長(zhǎng)的影響

3.2.3血液細(xì)胞學(xué)及血液生化學(xué)檢測(cè)結(jié)果連續(xù)服用六年生鮮人參30d和2周恢復(fù)期觀察結(jié)束，服用人參各劑量組動(dòng)物的血液學(xué)及血液生化學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)的影響，與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異（P＞0.05）。部分?jǐn)?shù)據(jù)見(jiàn)表3、4。

表3 六年生鮮人參對(duì)大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)（30d）血常規(guī)的影響（χ±S）n＝10

表4 六年生鮮人參對(duì)大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)（30d）血液生化學(xué)指標(biāo)的影響（χ±S）n＝10

3.2.4臟體比及病理組織學(xué)檢查分別在服用人參30d和2周恢復(fù)期觀察結(jié)束時(shí)，經(jīng)系統(tǒng)解剖、肉眼觀察，對(duì)照組與服用人參各劑量組動(dòng)物主要臟器的外觀形態(tài)、表面色澤、輪廓體積、所處位置等均未見(jiàn)異常病理改變。服用人參劑量組與對(duì)照組動(dòng)物間主要臟體比值也均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。對(duì)照組與高劑量組動(dòng)物組織器官的病理組織學(xué)檢查也未發(fā)現(xiàn)與受試品相關(guān)的毒性反應(yīng)發(fā)生。臟體比部分?jǐn)?shù)據(jù)見(jiàn)表5。

表5 六年生鮮人參對(duì)大鼠長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)（30d）主要臟器指數(shù)的影響（χ±S）n＝10

3.2.5可逆性觀察停藥后觀察2周，六年生鮮人參各劑量組生長(zhǎng)與攝食情況，同對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。剖殺余下的動(dòng)物作以上各指標(biāo)的檢測(cè)，結(jié)果為六年生鮮人參各劑量組動(dòng)物各項(xiàng)指標(biāo)與對(duì)照組相比均無(wú)明顯差異（P＞0.05）。表明，連續(xù)給予30d六年生鮮人參，未引起延遲毒性。

4 討論

安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)是通過(guò)快速、經(jīng)濟(jì)的方法對(duì)藥物安全性作出評(píng)價(jià)，通常采用組合的試驗(yàn)對(duì)受試物進(jìn)行檢測(cè)。急性毒性試驗(yàn)可了解受試物的毒性強(qiáng)度性質(zhì)及可能的靶器官，六年生鮮人參急性毒性試驗(yàn)表明：給藥后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物無(wú)明顯中毒反應(yīng)，雌雄大鼠經(jīng)口最大耐受劑量（MTD）均大于20.4g／kg，根據(jù)急性毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，其屬于無(wú)毒級(jí)；長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)結(jié)果表明六年生鮮人參無(wú)明顯毒性作用，受試大鼠生長(zhǎng)情況良好，血液學(xué)、血液生化學(xué)等各指標(biāo)均未見(jiàn)異常。臟體比及病理組織學(xué)檢查均未見(jiàn)明顯病變。綜上所述，我們認(rèn)為以上試驗(yàn)結(jié)果可以為六年生鮮人參的食用安全性提供一定的理論依據(jù)，但由于其具有一定的藥理作用，而且作為食品服用周期較長(zhǎng)，還需要進(jìn)行相應(yīng)的毒副作用觀察及慢性毒性研究。

［1］國(guó)家國(guó)藥典委員會(huì)．中華人民共和國(guó)藥典（一部）［S］．2010年版．北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：8．

［2］常曉紅，李靜．淺談中國(guó)六年生鮮人參、韓國(guó)六年生鮮人參之異同［J］．中國(guó)藥業(yè)，2010，19（16）：68-69．

To xic ologic al Se c u rit y St u d y o f 6 Yea r-old Fr e s h Gin s en g

Yang Xiaofeng1Chen Wenxue2Zhang fengxia1Yang M ing2?(1 Tonghua Xinghua p harm aceutical Co.，Ltd.，Jilin p rovince，Changchun，130008，China; 2 Center for the Study of D rug Developm ent，Jilin Academ y of Traditional Chinese M edicine，Jilin p rovince，Changchun，130021，China)

Objective To evaluate the toxicological characterization of 6 year-old ginseng in edible safety．Motheds Test of the maximum dose（MTD）was used to detect the acute toxicity．The Rats were divided into four groups：the treatment groups（minimum，middle，maximum dose of 6 year-old ginseng）and the control group．After continuously orally being administrated for 1 month，we began to reversibility study．Results There was no obvious toxic symptom in the acute toxicity trial（the acute toxicity of the different sexual mice，MTD＞20.4g／kg-1dose of ginseng decoction）．The results of long-term toxicity trial indicated that there were no significant differences in appearance，behavior，body weight，food exploitation rate，blood cytology indexes，blood biochemical indexes，organ／body ratio，and hematology examination in the rats of the three dosage groups as compared to the control group．The reversibility study demonstrated that there was no delayed toxicity in the rats of the three dosage groups as compared to the control group（P＞0.05）．Conclusion 6 year-old ginseng decoction is a nontoxic drug and it is safe to long-term use．

6 year-old Fresh Ginseng；Acute toxicity test；Long-erm toxicity trial

10.3969／j.issn.1672-2779.2013.16.115

1672-2779（2013）-16-0157-02

吳義紅

2013-06-16）

吉林省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目［No：20086042］

*通訊作者