簡(jiǎn)正偉，石淙，張長(zhǎng)林，江梅，萬(wàn)臘根

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西南昌330006)

·實(shí)驗(yàn)研究·

Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類和手工分類的比較

簡(jiǎn)正偉，石淙，張長(zhǎng)林，江梅，萬(wàn)臘根

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西南昌330006)

目的探討Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類和手工分類結(jié)果的差異，以驗(yàn)證該儀器白細(xì)胞分類結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法取Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀檢測(cè)后未觸犯推片規(guī)則的20份病人標(biāo)本，重復(fù)檢測(cè)2次。對(duì)每份標(biāo)本分別制作2張血涂片，由兩位有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員進(jìn)行人工分類，每張涂片分類200個(gè)細(xì)胞。比較儀器分類的平均值是否在手工分類結(jié)果99%可信區(qū)間內(nèi)，在可信區(qū)間內(nèi)為合格。結(jié)果Sysmex XE-2100D進(jìn)行中性粒細(xì)胞(N%)、淋巴細(xì)胞(L%)、單核細(xì)胞(M%)分類時(shí)合格率均為90%；進(jìn)行嗜酸性粒細(xì)胞(E%)和嗜堿性粒細(xì)胞(B%)分類時(shí)其合格率分別為95%和75%。結(jié)論Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀進(jìn)行白細(xì)胞分類準(zhǔn)確性較高，對(duì)于未觸犯推片規(guī)則的分類結(jié)果可以直接發(fā)報(bào)告。

Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀；白細(xì)胞分類；手工法；比較

隨著檢驗(yàn)技術(shù)的飛速發(fā)展，越來(lái)越多的檢驗(yàn)儀器運(yùn)用于臨床，新的儀器設(shè)備極大地提高了臨床標(biāo)本的檢測(cè)速度，減輕了檢驗(yàn)人員的工作量，提高了工作效率。測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性對(duì)臨床的輔助診斷以及對(duì)病情的連續(xù)監(jiān)測(cè)起著至關(guān)重要的作用。為了驗(yàn)證本科室在用的Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類的結(jié)果準(zhǔn)確性，我們對(duì)Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞分類與手工分類進(jìn)行比較，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

1.1.1 日本希森美康公司生產(chǎn)的Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀及其配套校正品、質(zhì)控品和試劑。

1.1.2 瑞氏-吉姆薩染色液為珠海貝索生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 日本奧林帕斯公司生產(chǎn)的OLYMPUS CH-21光學(xué)顯微鏡。

1.2 樣本隨機(jī)抽取Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀檢測(cè)后未觸犯推片規(guī)則的20份病人標(biāo)本。

1.3 方法

1.3.1 血細(xì)胞分析儀分類嚴(yán)格按照Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀作業(yè)指導(dǎo)書操作，對(duì)隨機(jī)抽取的20份病人標(biāo)本重復(fù)檢測(cè)2次，分別記錄兩次分

類的檢測(cè)結(jié)果，取二者平均值用于后續(xù)分析，樣本檢測(cè)在1h之內(nèi)完成。

1.3.2 手工分類法儀器分類結(jié)束后，立即由兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)人員，按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[1]的要求，充分混勻樣品管，各取10μl血制成頭、體、尾分明的血片2張用瑞氏-吉姆薩染色液進(jìn)行染色。采用雙盲法，每個(gè)檢驗(yàn)人員各分類一張涂片，每張涂片分類200個(gè)細(xì)胞。

1.3.3 判斷合格標(biāo)準(zhǔn)參考CLSI的H20-A的標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算手工分類結(jié)果百分率的標(biāo)準(zhǔn)誤S(x)p，再計(jì)算出某一參數(shù)百分率的99%的可信限[2]。手工分類結(jié)果百分率的標(biāo)準(zhǔn)誤：S(x)p=[p×q/n]1/2。某一參數(shù)百分率的99%的可信限：p±2.56[p×q/n]1/2。

將Sysmex XE-2100D分類結(jié)果平均值與手工分類結(jié)果99%的可信限進(jìn)行比較，小于99%可信范圍上限而大于99%可信范圍下限的判定為合格，超出此范圍的判定為不合格。合格率=合格數(shù)÷總的標(biāo)本數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法運(yùn)用EXECL軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果

2.1 Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀中性粒細(xì)胞分類和手工分類的結(jié)果比較見(jiàn)表1。

2.2 其他分類結(jié)果合格率依照上述方法，Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀淋巴細(xì)胞(L%)、單核細(xì)胞(M%)分類結(jié)果合格率均為90%；嗜酸性粒細(xì)胞(E%)分類結(jié)果合格率為95%；嗜堿性粒細(xì)胞(B%)分類結(jié)果合格率為75%。

表1 中性粒細(xì)胞分類和手工分類的結(jié)果比較

3 討論

隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，大量的新技術(shù)新設(shè)備應(yīng)用于檢驗(yàn)科，自動(dòng)化程度不斷提高，越來(lái)越多的醫(yī)院過(guò)分的依賴于儀器的檢測(cè)結(jié)果，而忽視了手工形態(tài)學(xué)檢查[3，4]。Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀采用半導(dǎo)體激光的流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)合細(xì)胞化學(xué)染色熒光技術(shù)進(jìn)行WBC分類。根據(jù)由半導(dǎo)體激光處理過(guò)的細(xì)胞所產(chǎn)生的前向散射光、側(cè)向散射光和側(cè)向熒光信號(hào)的不同，把白細(xì)胞分為中性粒細(xì)胞(N)、淋巴細(xì)胞(L)、單核細(xì)胞(M)、嗜酸性粒細(xì)胞(E)和嗜堿性粒細(xì)胞(B)等5類。前向散射光反映細(xì)胞的體積；側(cè)向散射光反映細(xì)胞的內(nèi)容物，如核和顆粒等；側(cè)向熒光反映細(xì)胞脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)的含量。并將X軸表示側(cè)向散射光強(qiáng)度和Y軸側(cè)向熒光強(qiáng)度繪制L、M、E、N+B的散射圖，便于直觀分析。

手工顯微鏡白細(xì)胞分類是根據(jù)血細(xì)胞的大小、細(xì)胞漿和細(xì)胞核的染色情況以及有無(wú)核仁和

顆粒等特征進(jìn)行分類計(jì)數(shù)，是實(shí)驗(yàn)室白細(xì)胞分類的參考方法。通過(guò)上述比較，我們可以得出結(jié)論，Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀對(duì)未觸犯推片規(guī)則的患者樣本中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞分類結(jié)果和手工顯微鏡檢有很好的符合性。但是對(duì)于嗜堿性粒細(xì)胞分類結(jié)果有一定誤差，可能是因?yàn)槭葔A性粒細(xì)胞出現(xiàn)在外周血中的數(shù)量少，或者是其在血片中分布不均勻。我們手工鏡檢只分類200個(gè)細(xì)胞，而儀器分類數(shù)量大(大約10000個(gè))，從而使儀器嗜堿性粒細(xì)胞分類結(jié)果比手工分類結(jié)果偏高[5]。對(duì)于2例中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞不合格的樣本，我們查閱了患者病歷，發(fā)現(xiàn)兩名患者均為呼吸科老年男性患者，分別為惡病質(zhì)、肺腺癌的病人和慢性呼吸衰竭、慢性阻塞性肺氣腫(急性加重)的病人，儀器分類結(jié)果和手工鏡檢結(jié)果相比較其中性粒細(xì)胞結(jié)果偏低，淋巴偏高。可能是因?yàn)槁院粑』颊呓M織換氣長(zhǎng)期處于失代償狀態(tài)，引起細(xì)胞的形態(tài)有所改變，儀器計(jì)數(shù)把部分變形的中性粒細(xì)胞計(jì)算成淋巴細(xì)胞，造成中性粒細(xì)胞結(jié)果的偏低和淋巴細(xì)胞結(jié)果的偏高。另外，2例單核細(xì)胞不合格的患者均為深度燒傷、低血容量休克的病人，儀器分類結(jié)果比手工鏡檢結(jié)果偏高?？赡苁怯捎跓齻∪巳菀桌^發(fā)感染，引起部分中性粒細(xì)胞出現(xiàn)中毒顆粒，形態(tài)發(fā)生改變，把部分形態(tài)異常的中性粒細(xì)胞誤計(jì)數(shù)為單核細(xì)胞。所以，對(duì)于燒傷科的病人，如果有單核細(xì)胞結(jié)果偏高的樣本，最好也要進(jìn)行手工分類，以提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，Sysmex XE-2100D血細(xì)胞分析儀對(duì)于未觸犯推片規(guī)則的樣本分類結(jié)果有較高的準(zhǔn)確性，可以用儀器代替手工鏡檢，直接發(fā)報(bào)告。但對(duì)于分類結(jié)果嗜堿性粒細(xì)胞偏高較多的樣本，建議手工鏡檢，以提高樣本分類結(jié)果的可靠性。

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Comparison research on leukocyte differential count between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual oper-ation

JIAN Zhengwei,SHI Cong,ZHANG Zhanglin,et al.Department of Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,China

Abstrac:ObjectiveTo investigate the difference of leukocyte differential count between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual operation.Methods Blood samples from patients were detected by Sysmex XE-2100D hematology analyzer and 20 samples that did not violate the smear rules were selected.These 20 samples were detected duplicatedly by Sysmex XE-2100D hematology analyzer and 2 blood smears were made for each sample.Two hundred leukocyte cells were differentiated in each smear by 2 professional technicians with manual operation.The leukocyte differential count results were compared between Sysmex XE-2100D hematology analyzer and manual operation by setting the 99%confidence interval as satisfaction standard.Results By using manual operation as reference,the passing rate of Sysmex XE-2100D hematology analyzer on neutrophil,lymphocyte,monocyte,acidophilic granulocyte and basophile granulocyte differential count was 90%,90%,90%,95%and 75%respectively.Conclusion Sysmex XE-2100D hematology analyzer has fine accuracy on leukocyte differential count.The results of leukocyte differential count detected with Sysmex XE-2100D hematology analyzer without violating the smear rules can be reported directly.

Sysmex XE-2100D hematology analyzer;Leukocyte differential count;Manual operation;Comparison

R446.11+1

A

1674-1129(2013)01-0018-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.007

江西省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目，編號(hào)：20121BBG70049

簡(jiǎn)正偉，主管技師，主要研究方向分子診斷學(xué)和臨床血液學(xué)檢驗(yàn)。

萬(wàn)臘根，主任醫(yī)師、教授，研究生導(dǎo)師。