仇慧珠，潘湘濤，陸曄，程旭，饒彪鋒

(太倉市第一人民醫(yī)院血液腫瘤科，江蘇蘇州215400)

消化道腫瘤貧血患者血清鐵調(diào)素及炎癥介質(zhì)的表達(dá)

仇慧珠，潘湘濤，陸曄，程旭，饒彪鋒

(太倉市第一人民醫(yī)院血液腫瘤科，江蘇蘇州215400)

目的研究血清鐵調(diào)素(Hepcidin)和炎癥介質(zhì)細(xì)菌脂多糖(LPS)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子(TNF)和干擾素(IFN)等細(xì)胞因子在消化道腫瘤貧血患者中的表達(dá)特點以及與消化道腫瘤貧血之間的關(guān)系。方法應(yīng)用雙抗夾心生物素-親和素-酶聯(lián)免疫吸附試驗(ABC-ELISA)檢測31例消化道腫瘤貧血患者的Hepcidin、LPS、IL-6、TNF-α、TNF-β、IFN-β、IFN-γ的水平，分析Hepcidin與炎癥介質(zhì)之間的關(guān)系，以同期30例健康體檢者作為對照。結(jié)果1.實驗組Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS分別為53.8±32.4μg/L、20.3±26.1ng/L、117.4±110.7ng/L、9.8±7.2ng/L、81.6±46.1μg/L，均明顯高于對照組的23.1±5.2μg/ L、7.9±9.6ng/L、65±23.0ng/L、6.0±2.3ng/L、49.0±19.0μg/L(P＜0.05)，而IFN-γ及TNF-α與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2. Hepcidin與IL-6、LPS之間存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.27，p＜0.01、r=0.222，P＜0.05)，與TNF-β、IFN-β呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.348，P＜0.001，r=-0.265，P＜0.01)，與IFN-γ、TNF-α之間無相關(guān)關(guān)系。結(jié)論消化道腫瘤貧血患者高表達(dá)Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS，Hepcidin與IL-6、LPS均呈正相關(guān)關(guān)系。

鐵調(diào)素；脂多糖；貧血；白介素-6；細(xì)胞因子

貧血是消化道腫瘤的常見并發(fā)癥，引起消化道腫瘤貧血的原因包括慢性失血、造血原料缺失、腫瘤骨轉(zhuǎn)移破壞骨髓造血微環(huán)境等，目前對消化道腫瘤相關(guān)貧血的具體機(jī)制尚不完全明確。本實驗檢測消化道腫瘤貧血患者的血清鐵調(diào)素(Hepcidin)和多種炎癥介質(zhì)的表達(dá)情況，以初步探討消化道腫瘤相關(guān)貧血的發(fā)生機(jī)制。

1 對象與方法

1.1 對象實驗組2009年6月至2010年5月之間太倉市第一醫(yī)院住院消化道腫瘤并伴有貧血的患者31例，其中女性9例，男性21例，年齡46～81歲，所有患者均為術(shù)后病理診斷或活檢病理確診，以Hb值男性＜120.0g/L和女性＜110.0g/L作為貧血的診斷標(biāo)準(zhǔn)。疾病種類為結(jié)直腸癌10例，食管癌2例，胃癌19例，對照組30例，為同期太倉市第一醫(yī)院健康體檢者，年齡42～72歲，男性16例，女性14例。兩組在性別構(gòu)成比、年齡差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 試劑與方法Hepcidin試劑盒購自美國DRG International Inc.USA，LPS和其余5種細(xì)胞因子試劑盒為R＆D公司生產(chǎn)。分別檢測實驗組及對照組的血紅蛋白、血清Hepcidin、IL-6、TNF-α、TNF-β、IFN-β、IFN-γ、LPS。清晨抽取被檢者血液分置于試管中，Hb測定應(yīng)用常規(guī)方法即時檢測，血清則放入-80℃冰箱保存，對31例患者及30例對照組血清標(biāo)本同時應(yīng)用ABC-ELISA方法檢測Hepcidin及上述各細(xì)胞因子。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0版軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，分別采用方差分析和Spearman等級相關(guān)法。以P＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 實驗組和對照組Hepcidin、LPS和各細(xì)胞因子的比較各組血清Hepcidin、LPS和各細(xì)胞因子測定結(jié)果見表1，其中實驗組的Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS均明顯高于對照組(P＜0.05)；而IFN-γ及TNF-α與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

2.2 相關(guān)分析分別對Hepcidin與IL-6、TNF-α、 TNF-β、IFN-β、IFN-γ、LPS之間進(jìn)行相關(guān)分析。結(jié)果Hepcidin與IL-6、LPS之間存在正相關(guān)關(guān)系(Hepcidin與IL-6為r=0.27，P＜0.01；Hepcidin與LPS r=0.22，P＜0.05)；Hepcidin與TNF-β、IFN-β呈負(fù)相關(guān)關(guān)系(Hepcidin與TNF-β為r=-0.348，P＜0.001；Hepcidin與IFN-β為r=-0.265，P＜0.01)。Hepcidin與TNF-α、IFN-γ之間無相關(guān)關(guān)系。

表1 各組血清hepcidin、LPS和各種細(xì)胞因子測定結(jié)果

3 討論

近年來隨著研究的深入，臨床醫(yī)師更加關(guān)注腫瘤患者的生存時間以及生活質(zhì)量，因此腫瘤相關(guān)性貧血日益受到重視。目前大量研究表明，慢性炎癥在腫瘤的發(fā)生過程中起到重要的作用。在機(jī)體免疫系統(tǒng)與腫瘤細(xì)胞的相互作用中產(chǎn)生大量炎癥介質(zhì)，這些炎癥介質(zhì)參與了腫瘤細(xì)胞的生長、轉(zhuǎn)移等過程，也與腫瘤的伴隨癥狀如疼痛、貧血等密切相關(guān)。Hepcidin是2000年發(fā)現(xiàn)的重要的鐵調(diào)節(jié)激素,Hepcidin是機(jī)體鐵穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)中關(guān)鍵性的負(fù)性鐵調(diào)節(jié)因子,具有抑制腸道鐵吸收和可能促進(jìn)鐵在網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)中滯留等作用[1]。國外大量的研究資料表明炎癥介質(zhì)和Hepcidin共同參與了慢性病貧血的發(fā)生和發(fā)展[2]。

我們的實驗表明，消化道腫瘤貧血患者中，Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS均明顯升高，我們推斷Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β、LPS可能參與到消化道腫瘤患者貧血的發(fā)生發(fā)展過程中。目前研究表明在其他疾病中亦可觀察到類似現(xiàn)象，如阮舒等[3]報道骨髓增生異常綜合征患者中Hepcidin明顯升高；Hohaus等[4]報道Hepcidin在霍奇金淋巴瘤患者中明顯升高，與IL-6顯著正相關(guān)(P＜0.001)；Ganz等[5]報道Hepcidin在炎癥、多發(fā)性骨髓瘤和慢性腎性疾病中是明顯升高的。

我們進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)消化道腫瘤貧血患者Hepcidin與LPS和IL-6均呈正相關(guān)關(guān)系，也與文獻(xiàn)報道相一致，如Hohaus等[4]報道霍奇金淋巴瘤患者中Hepcidin表達(dá)與IL-6呈顯著的正相關(guān)(P＜ 0.001)，Truksa等[6]的實驗發(fā)現(xiàn)IL-6通過激活信號傳導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄STAT家族的成員調(diào)節(jié)鐵調(diào)素。他們的實驗表明STAT 3通過與位于鐵調(diào)素基因近端啟動因子的保守的DNA部分結(jié)合激活鐵調(diào)素基因的轉(zhuǎn)錄。STAT存在于IL-6依賴性信號傳導(dǎo)中。我們的實驗表明Hepcidin與TNF-β、IFN-β呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，而Lee P[7]等發(fā)現(xiàn)給體外培養(yǎng)的肝細(xì)胞加入IFN-β能抑制Hepcidin的表達(dá)，我們的實驗結(jié)果與之相一致，目前未見關(guān)于Hepcidin與TNF-β之間的關(guān)系的相關(guān)報道，我們推斷TNF-β和IFN-β可能是Hepcidin表達(dá)的負(fù)調(diào)節(jié)因子，具體機(jī)制有待進(jìn)一步探討。

綜上所述，可認(rèn)為消化道腫瘤患者體內(nèi)有大量的炎癥介質(zhì)，這些炎癥介質(zhì)通過復(fù)雜的機(jī)制影響下游的Hepcidin的表達(dá)，進(jìn)而參與到貧血的發(fā)生機(jī)制中。而消化道腫瘤貧血還與慢性失血、造血原料缺乏等因素有關(guān)，消化道腫瘤貧血還可能與其他的復(fù)雜的分子機(jī)制有關(guān)。這有待進(jìn)一步探討。

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Expression of Hepcidin and inflammatory mediators in the patients with cancer-related anemia

CHOU Huizhu,PAN Xiangtao,TU Ye,et al.The First People's Hospital of Taicang,Jiangsu Taicang 215400,China

ObjectiveTo study the expression characteristics of Hepcidin,inflammatory mediators(LPS,IL-6,TNF,IFN)in gastrointestinal tumor patients with anemia and explore the relationship between the expression characteristics and anemia.Methods The serum levels of Hepcidin,LPS,IL-6,INF-α,TNF-β,IFN-β and IFN-γ were detected in 31 cases of gastrointestinal tumor patients with anemia and in 30 cases of normal persons by ABC-ELISA.Results①The serum levels of Hepcidin，IL-6，TNF-β，IFN-β and LPS in gastrointestinal tumor patients with anemia were higher than those in control group(53.8±32.4μg/L、20.3± 26.1ng/L、117.4±110.7ng/L、9.8±7.2ng/L and 81.6±46.1μg/L VS 23.1±5.2μg/L、7.9±9.6ng/L、65±23.0ng/L、6.0±2.3ng/L、49.0± 19.0μg/L,P＜0.05).②The serum levels of Hepcidin had positive correlation with IL-6、LPS(r=0.27，P＜0.01、r=0.222，P＜0.05)，negative correlation with TNF-β、IFN-β(r=-0.348，P＜0.001，r=-0.265，P＜0.01)and no correlation with IFN-γ，TNF-α.Conclusion Gastrointestinal tumor patients with anemia have high expression of Hepcidin、IL-6、TNF-β、IFN-β and LPS.Hepcidin has positive correlation with IL-6、LPS.

Hepcidin;LPS;Anemia;IL-6;Cytokines

R735，R446.62，R556.9

A

1674-1129(2013)01-0013-2

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.01.005

基金編號：蘇州市2009年科技發(fā)展項目(SZD0951)

仇慧珠，女，1981年生，主治醫(yī)師，腫瘤專業(yè)。

潘湘濤，醫(yī)學(xué)博士，研究生導(dǎo)師。