劉秋蓮，賴云英，張水生

(江西省人民醫(yī)院，江西南昌330006)

瘧疾患者骨髓片與血片瘧原蟲陽性率比較

劉秋蓮，賴云英，張水生

(江西省人民醫(yī)院，江西南昌330006)

瘧疾；瘧原蟲；骨髓涂片；外周血涂片

惡性瘧疾是迄今為止全世界最為嚴重的熱帶蟲媒傳染病之一，也是WHO規(guī)定的國際間檢測傳染病之一。我國曾將瘧疾發(fā)病控制在較低水平[1]，近年來隨著赴非洲務(wù)工人員的增加，本地輸入性惡性瘧疾亦明顯增加。輸入性惡性瘧疾易誤診，如得不到及時治療，易轉(zhuǎn)為危重癥[2]。因此，及時、準確的診斷對有效治療瘧疾及控制其流行具有重要意義[3]。檢出瘧原蟲是瘧疾明確診斷的最直接證據(jù)。目前最常用的是顯微鏡檢查法，現(xiàn)將我院近年收治的瘧疾患者骨髓片與血片顯微鏡檢查瘧原蟲陽性率比較匯報如下。

1 材料與方法

1.1 材料2010年1月至2013年4月3例，臨床高度懷疑惡性瘧原蟲患者外周血和骨髓涂片各四張(均在患者發(fā)熱后用藥前采集)，瑞氏染色液由(臺資)珠海貝索生物技術(shù)有限公司提供。

1.2 載玻片的要求選擇優(yōu)質(zhì)推片，推片兩端邊緣整齊平滑每次使用時必須潔凈推片，以免推片粘有他人的成分而污染本次標(biāo)本，載玻片的厚薄，清潔光滑和陳舊程度都會影響檢查的結(jié)果，推薦使用1～1.2mm厚度：25.4mm×76.2mm長度的載玻片。新玻片表面常有游堿質(zhì)，必須用酸溶液浸泡24h后再用清水徹底清洗、干燥后備用。

1.3 制片方法用推片醮取骨髓(血)液少許，置于載玻片右端三分之一處，使推片和此骨髓(血)液接觸，當(dāng)骨髓(血)液擴散成一均勻的粗線。然后使推片與載玻片成30度至40度角，自右向左，均勻的向前推，直至玻片的尾部，尾部應(yīng)結(jié)束在載玻片左側(cè)六分之一處。上述制作過程應(yīng)盡快完成，否則骨髓液凝固，將影響標(biāo)本質(zhì)量。要求厚薄適宜，體尾分明、邊緣整齊，血細胞分布均勻，膜長度占載玻片2/3左右。

1.4 染色方法染液以覆蓋血膜或骨髓膜為宜，染色時間長短與增生程度、膜厚度和室內(nèi)溫度有關(guān)，增生程度高、膜厚、室內(nèi)溫度低染色時間長、反之則染色時間短。染色效果，一般以加入第二液后低倍鏡下清晰觀察到核漿分明后，流水沖洗干后鏡檢[4]。

1.5 結(jié)果分析計數(shù)結(jié)果進行比較分析，成熟RBC內(nèi)檢出瘧原蟲為陽性。平均100個成熟RBC內(nèi)檢出瘧原蟲個數(shù)為陽性率。

2 結(jié)果

2.1 計數(shù)方法外周血、骨髓涂片，由2名具有豐富臨床檢驗經(jīng)驗工作者分別計數(shù)10000個成熟RBC內(nèi)瘧原蟲出現(xiàn)的數(shù)目。取其均值分別計算出陽性率。

2.2 瘧原蟲形態(tài)學(xué)診斷標(biāo)準2種瘧原蟲形態(tài)特點參考中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司主編全國臨床檢驗操作規(guī)程(第3版)。

2.3 計數(shù)結(jié)果見表1。

表1 3例瘧疾患者骨髓片與血片顯微鏡檢查瘧原蟲陽性率

3 討論

目前瘧疾的監(jiān)測方法包括病原學(xué)診斷即顯微鏡厚/薄血片的檢查、免疫學(xué)檢查即快速免疫診斷試條和病原基因診斷[5]即實時定量PCR法等。骨髓象報告單的填寫要求書寫是否見到寄生蟲[6]，但有關(guān)骨髓顯微鏡檢查法應(yīng)用較少，瘧疾患者骨髓片與血片瘧原蟲陽性率比較更未見相關(guān)報導(dǎo)。本文3例瘧疾患者血片瘧原蟲檢出陽性率4.32%～7.06%之間，骨髓片瘧原蟲檢出陽性率為0.41%～0.92%之間，二者比較血片瘧原蟲檢出陽性率明顯大于骨髓片瘧原蟲檢出陽性率，而且血片有核細胞較少，成熟紅細胞分布均勻，瘧原蟲形態(tài)更加典型易辯認。因此作者認為在臨床上懷疑惡性瘧疾患者進行骨髓檢查時，應(yīng)重點檢查血涂片，在血片發(fā)現(xiàn)瘧原蟲基礎(chǔ)上再仔細檢查骨髓是否有瘧原蟲，從而提高骨髓片瘧原蟲檢出陽性率。

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[6]陳方平.血液學(xué)檢驗[M]北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:31.

R446.11+1,R531.13,R382.3+1

B

1674-1129(2013)05-0503-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.05.042