胡辛蘭，陳發(fā)林

(福建省立醫(yī)院檢驗科微生物室，福建福州350001)

院內(nèi)感染金黃色葡萄球菌的分布及耐藥性分析

胡辛蘭，陳發(fā)林

(福建省立醫(yī)院檢驗科微生物室，福建福州350001)

目的了解本院感染金黃色葡萄球菌的分布及耐藥性分析。方法分析2011年1月至2013年6月金黃色葡萄球菌院內(nèi)感染情況，采用VITEK IIMIC法進行病原菌鑒定及藥敏試驗，按照2012年美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)標準判斷結(jié)果，采用WHONET5.4進行統(tǒng)計。D試驗測定紅霉素誘導克林霉素耐藥實驗。結(jié)果ICU病房金黃色葡萄球菌檢出率最高；按標本種類分，痰標本分離率最高(占63.4%)；MRSA檢出率為62.8%；MRSA對慶大霉素、利福平、環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、莫西沙星耐藥率較MSSA耐藥率高，本實驗室未出現(xiàn)對利奈唑胺、萬古霉素和替考拉寧耐藥的金黃色葡萄球菌。D試驗陽性率為35.43%。結(jié)論應(yīng)及時掌握本院金黃色葡萄球菌的分布特點及耐藥監(jiān)測結(jié)果，為促進感染患者的康復和預后提供參考。

MRSA；院內(nèi)感染；耐藥性

金黃色葡萄球菌是臨床常見致病菌，隨著青霉素及其他β-內(nèi)酰胺類抗生素的廣泛應(yīng)用，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)檢出率越來越高，臨床上藥物應(yīng)用的選擇壓力也越來越大。目前，MRSA感染幾乎遍及世界各地，已成為大中型醫(yī)院院內(nèi)感染的重要病原菌之一，須引起臨床的高度重視[1，2]。為此，筆者就本院近兩年半來MRSA感染狀況和耐藥性的變化進行分析，為臨床用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 菌株來源菌株來源于2011年1月至2013年6月本院住院及門診患者的各類臨床標本，包括痰、尿液、血液、胸水、腹水、傷口分泌物、前列腺液等。剔除同一患者相同部位的重復菌株。

1.2 質(zhì)控菌株福建省臨床檢驗中心提供金黃色葡萄球菌ATCC25923和ATCC29213。

1.3 儀器及試劑全自動細菌鑒定藥敏分析儀VITEKⅡ、鑒定卡和藥敏卡購自法國生物梅里埃公司。哥倫比亞血平板、巧克力平板、麥康凱瓊脂及MH培養(yǎng)基為鄭州貝瑞特公司產(chǎn)品。藥敏紙片購自英國Oxoid公司。

1.4 菌株分離與鑒定對各種標本進行接種、分離，均按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》、2012年美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)標準判斷結(jié)果。

1.5 紅霉素和克林霉素雙紙片協(xié)同試驗(D試驗)在距含有15μg的紅霉素紙片15mm處貼含有2μg的克林霉素紙片，經(jīng)37oC24h孵育后，在靠近紅霉素一側(cè)，克林霉素抑菌環(huán)出現(xiàn)類似字母D形狀，為D試驗陽性。

1.6 數(shù)據(jù)處理采用WHONET5.4進行統(tǒng)計。

2 結(jié)果

2.1 金黃色葡萄球菌在科別中分布金黃色葡萄球菌檢出率最高的科室為ICU，構(gòu)成比為31.7%，其次為神經(jīng)科、五官科、干部病房和骨科等，檢出率分別依次為20.4%、11.3%、7.7%和4.5%。詳見表1。

表1 金黃色葡萄球菌在科別中分布

2.2 金黃色葡萄球菌在標本中分布臨床標本以痰液為主，分離率占63.4%，位居第一，提示金黃色葡萄球菌感染仍以呼吸道感染為主，其次是分泌物、血液、膿液、尿等，分別是21.3%、5%、3.9%、2.2%。詳見表2。

表2 金黃色葡萄球菌在不同標本中的分布情況

2.3 藥敏結(jié)果2011年1月至2013年6月，共檢出991株金黃色葡萄球菌，其中，檢出耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)622株，占62.8%。MRSA對慶大霉素、利福平、環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、莫西沙星耐藥率較MSSA高，分別為47.9%、17.8%、51.8%、41.9%、40.6%，本實驗室未出現(xiàn)對利奈唑胺、萬古霉素、替考拉寧和奎奴普丁/達福普汀耐藥的金黃色葡萄球菌。詳見表3。

2.4 D試驗結(jié)果在991株金黃色葡萄球菌中，616株對紅霉素耐藥，其中127株對紅霉素耐藥而對克林霉素敏感，對該株金黃色葡萄球菌進行克林霉素誘導試驗(D試驗)，45株呈陽性結(jié)果，陽性率為35.43%。

表3 991株金黃色葡萄球菌對14種抗菌藥物藥敏試驗結(jié)果(%)

3 討論

金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)為革蘭陽性球菌，廣泛分布于自然界，可引起人和動物的感染。在人體主要寄殖于鼻前庭黏膜、腹股溝、會陰部和新生兒臍帶殘端等部位，是臨床上重要致病菌之一，也是重癥監(jiān)護病房最常見的致病菌。同時有研究表明：住院時間長、用藥范圍廣、用藥量大等為金黃色葡萄球菌感染及耐藥率高的危險因素。本實驗結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌檢出率最高的科室為ICU，構(gòu)成比為31.7%，其次為神經(jīng)科、五官科、干部病房和骨科等，這可能與ICU患者疾病危重、氣管插管、機體免疫力低下、廣泛使用抗菌藥物有關(guān)；神經(jīng)外科患者感染率亦不容忽視，檢出率為20.4%，可能與住院時間長、年老體弱、免疫力低下、及使用廣譜抗生素等因素有關(guān)。本院金黃色葡萄球菌檢出率最高為痰標本，提示本院金黃色葡萄球菌感染以呼吸道為主，與秦桂英報道相符[3]，有研究表明，由于氣管插管等侵入性操作增加，繼而損傷呼吸道黏膜，影響纖毛的清除功能，故細菌極易與分泌物一起進入下呼吸道引起感染[4]。

英國的Jevons首次發(fā)現(xiàn)了耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA),至今MRSA感染幾乎遍及全球，已成為院內(nèi)感染的重要病原菌之一[5]。研究表明MRSA的耐藥分別是由質(zhì)粒介導的獲得性耐藥和由耐藥基因介導的固有耐藥[6]，MRSA能產(chǎn)生一種特殊的PBP即PBP2a，表現(xiàn)對大多數(shù)β-內(nèi)酰胺類抗生素親和力低，且可替代高親和力的正常PBPs催化肽聚糖交聯(lián)使細菌表現(xiàn)耐藥。PBP2a由mecA基因編碼,菌株存在mecA將對全部的青霉素、頭孢菌素、碳青酶烯類及β-內(nèi)酰胺酶抑制劑產(chǎn)生耐藥性[7]。本實驗結(jié)果顯示，MRSA對慶大霉素、利福平、環(huán)丙沙星、左旋氧氟沙星、莫西沙星耐藥率較MSSA高，分別為47.9%、17.8%、51.8%、41.9%、40.6%，對喹諾酮類耐藥機制可能與DNA螺旋酶和拓撲異構(gòu)酶Ⅳ有關(guān)，本實驗室未出現(xiàn)對利奈唑胺、萬古霉素、替考拉寧和奎奴普丁/達福普汀耐藥的金黃色葡萄球菌[8]。D試驗是檢測克林霉素誘導型耐藥簡便易行的方法。紅霉素、克林霉素均耐藥，菌株可能攜帶erm結(jié)構(gòu)型基因；紅霉素耐藥、克林霉素敏感、D試驗陽性，此菌株可能攜帶的erm誘導型基因；本文D試驗陽性率為35.43%，提示應(yīng)補加D試驗用于金黃色葡萄球菌常規(guī)藥敏檢測，并在報告中注明：通過可誘導性克林霉素耐藥試驗，推測此菌株對克林霉素耐藥。

MRSA感染的治療是臨床十分棘手的難題之一，加強醫(yī)務(wù)人員院內(nèi)感染知識的培訓，減少侵襲性操作，縮短住院時間，保護易感人群，臨床應(yīng)規(guī)范使用抗菌藥物，減少耐藥菌株的產(chǎn)生，同時應(yīng)定期監(jiān)測金黃色葡萄球菌耐藥性，為臨床用藥提供依據(jù)，并嚴格執(zhí)行消毒隔離制度，減少金黃色葡萄球菌交叉感染。

[1]李篤軍,蘇維奇,朱元祺．膠東地區(qū)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥性的研究[J]．中國實驗診斷學,2012,16(2):290-292.

[2]趙金英,路娟,羅文濤,等.2007～2009年神經(jīng)外科耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌耐藥性分析[J].中國實驗診斷學,2011,15(2):298-299.

[3]秦桂英,邱隆敏,楊澤敏,等.ICU醫(yī)院感染金黃色葡萄球菌的分布及耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2011,7(13):2833-2834.

[4]張文紅.耐甲氧西林醫(yī)院金黃色葡萄球菌的耐藥分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2007,17(8):998-999.

[5]施金玲,蔡璇,彭少華.重癥監(jiān)護病房醫(yī)院感染病原菌調(diào)查及耐藥監(jiān)測[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2009,19(19):2613-2615.

[6]Olarte NM,Valderrama IA,Reyes KR,et al.Methicillin-resistant Staphyococcus aureus colonization in a Colombian hospital ICU: phenotypic and molecular characterization[J].Biomedica,2010,30(3): 353-361.

[7]Yamada K,Yanagihara K,Hara Y,et al.Clinical features of bacteremia caused by methicillin-resistang Staphyococcus aureus in a tertiary hospital[J].Tohoku JEXPMed,2011,224(1):61-67.

[8]吳紹蓮,胡辛蘭,池春燕.血培養(yǎng)常見病原菌的變遷和耐藥性分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2013,31(2):138-140.

R446.5，R939.92，R378.1+1

A

1674-1129(2013)05-0463-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2013.05.022

胡辛蘭，女，1961年生，畢業(yè)于福建醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學，微生物專業(yè)，主管技師。