■孫國(guó)平 閆素梅 荷 花 吳鐵梅 王永東 劉少卿 韓 帥 蘇日古嘎

(1.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，內(nèi)蒙古呼和浩特 010018；2.內(nèi)蒙古阿爾巴斯白絨山羊種羊場(chǎng)，內(nèi)蒙古鄂爾多斯 017000)

目前，隨著羊肉價(jià)格的上漲趨勢(shì)和羊肉需求量的不斷增加，對(duì)羊進(jìn)行短期育肥受到了廣泛的重視。內(nèi)蒙古白絨山羊是舉世聞名的絨肉兼用型地方良種，其肉質(zhì)鮮美，風(fēng)味獨(dú)特，深受廣大消費(fèi)者的喜愛(ài)。然而，近幾年隨著羊絨價(jià)格下跌的趨勢(shì)，使得絨山羊育肥成為新的經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)點(diǎn)。在正常的絨山羊生產(chǎn)中，每年淘汰30%左右的阿爾巴斯白絨山羊成年母羊，是育肥羊的重要來(lái)源。但由于草原生態(tài)環(huán)境的惡化，使得放牧育肥受到了限制，因此主要以舍飼方式對(duì)淘汰的成年絨山羊進(jìn)行短期育肥。目前，關(guān)于絨山羊的研究主要集中在產(chǎn)絨性能和繁殖性能等方面，而關(guān)于育肥效果的研究報(bào)道很少。瘤胃發(fā)酵直接影響絨山羊的健康與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化，對(duì)增重和肉品質(zhì)具有重要的作用，而育肥過(guò)程中不同飼養(yǎng)方式由于改變了日糧的精粗比例，因而對(duì)絨山羊的瘤胃發(fā)酵可能會(huì)產(chǎn)生很大的影響，進(jìn)而影響育肥效果與肉品質(zhì)。因此，研究不同飼養(yǎng)方式對(duì)阿爾巴斯型白絨山羊成年母羊瘤胃發(fā)酵功能的影響，對(duì)合理指導(dǎo)絨山羊的育肥生產(chǎn)具有重要的理論指導(dǎo)意義。馬慧忠（2008）[1]研究了不同精粗比日糧引起的絨山羊瘤胃的發(fā)酵功能變化，結(jié)果表明隨著粗料比例的增加，pH值 、乙酸和總揮發(fā)性脂肪酸（TVFA）濃度增加，乙酸/丙酸提高，氨氮（NH3-N）濃度、菌體蛋白（BCP）濃度、丙酸濃度降低，組間差異不顯著（P＞0.05）。張建勛等（2013）[2]研究得出，隨著飼糧精粗比的提高，南江黃羊體外發(fā)酵培養(yǎng)液中pH值、乙酸/丙酸逐漸下降，對(duì)NH3-N濃度和TVFA濃度影響不顯著（P＞0.05）；BCP濃度隨著精粗比的提高逐漸升高。Miller等（1985）報(bào)道，日糧中適宜的精料比例有利于荷斯坦閹牛瘤胃內(nèi)微生物的生長(zhǎng)，精料比例過(guò)高或過(guò)低都會(huì)形成不利于微生物生長(zhǎng)的瘤胃環(huán)境[3]?？梢?jiàn)國(guó)內(nèi)外關(guān)于不同飼養(yǎng)方式和及日糧組成對(duì)絨山羊瘤胃發(fā)酵特性影響的報(bào)道極少。因此，本論文主要比較研究不同飼養(yǎng)方式對(duì)阿爾巴斯型白絨山羊成年母羊瘤胃發(fā)酵功能的影響，從而為科學(xué)制定成年阿爾巴斯白絨山羊成年母羊育肥方案和提高經(jīng)濟(jì)效益提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)在內(nèi)蒙古阿爾巴斯白絨山羊種羊場(chǎng)進(jìn)行。采用單因子完全試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將60只年齡、體重相近的淘汰成年母羊隨機(jī)分為2組，每組30只。一組為對(duì)照組，在天然草場(chǎng)進(jìn)行自然放牧育肥；一組為試驗(yàn)組，完全舍飼育肥，日糧采用全混合飼喂，每天飼喂2次，自由采食。試驗(yàn)從2012年7月末到9月末進(jìn)行，育肥期60 d，1～30 d為育肥前期，31～60 d為育肥后期。在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別從對(duì)照組和試驗(yàn)組中選擇6只羊，在禁食24 h，禁水2 h后，進(jìn)行屠宰，采集瘤胃液。

1.2 日糧組成

對(duì)照組在天然草場(chǎng)進(jìn)行自然放牧，采食牧草的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量見(jiàn)表1；試驗(yàn)組的日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2，日糧干物質(zhì)基礎(chǔ)的精粗比例育肥前期為40∶60，育肥后期為45∶55。

表1 天然草場(chǎng)牧草的營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))(%)

表2 舍飼育肥母羊日糧成分及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.3 瘤胃液的采集與預(yù)處理

在試驗(yàn)結(jié)束，屠宰絨山羊后取瘤胃液約400 ml，立即測(cè)定pH值。之后，將瘤胃液經(jīng)4層紗布過(guò)濾，將此濾液4 000 r/min離心15 min后，按照NH3-N和VFA的測(cè)定要求將其分裝，剩余瘤胃液用于測(cè)定BCP含量，所用樣品均在-20℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 pH值及NH3-N濃度的測(cè)定

采集的瘤胃液立即用PHS-3S型高精度酸度計(jì)測(cè)定pH值，參照馮宗慈等（1993）[4]的比色方法進(jìn)行NH3-N濃度的測(cè)定。

1.4.2 BCP的測(cè)定含量

將經(jīng)過(guò)4 000 r/min離心后所得的上清液解凍后，取上清液取10 ml，12 000 r/min，離心20 min，棄上清液，用0.9%的生理鹽水沖洗，再經(jīng)12 000 r/min，離心20 min，此步驟重復(fù)兩次。用10 ml蒸餾水將沉淀物全部沖洗到試管中，用John（1997）[5]的方法進(jìn)行處理，取該沉淀物水溶液0.5 ml與0.5 ml濃度為2 mol/ml的NaOH混合，90℃預(yù)熱10 min后10 000×g離心5 min。取此上清液0.5 ml與0.75 ml濃度為0.833 mol/ml的HCl混合，采用Bradford（1976）[6]的方法，吸取1 ml混合液用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定BCP含量。

1.4.3 VFA含量的測(cè)定

參照秦為琳等（1982）的方法[7]，采用內(nèi)標(biāo)法測(cè)定，內(nèi)標(biāo)為巴豆酸。所用儀器為日本島津GC-2014型氣相色譜儀。將預(yù)處理好的樣品解凍后，在1.5 ml離心管內(nèi)準(zhǔn)確加入1 ml上清液，10 000 r/min離心10 min，取1 μl上清液加入0.2 ml巴豆酸，用氣相色譜儀測(cè)定乙酸、丙酸和丁酸的含量。

1.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)與處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SAS 9.0統(tǒng)計(jì)軟件中的t檢驗(yàn)程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其中，P＜0.05表示處理組間差異顯著，0.05＜P＜0.10表示組間處理效應(yīng)趨于顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同飼養(yǎng)方式對(duì)瘤胃液pH值、NH3-N濃度和BCP含量的影響（見(jiàn)表3）

表3 不同飼養(yǎng)方式對(duì)阿爾巴斯白絨山羊瘤胃液pH值、NH3-N濃度和BCP含量的影響

表3結(jié)果表明，試驗(yàn)組和對(duì)照組間的pH值差異顯著（P=0.000 1），對(duì)照組高于試驗(yàn)組。試驗(yàn)組和對(duì)照組的NH3-N濃度與BCP濃度差異均極顯著（P＜0.05），且均以試驗(yàn)組（完全舍飼）高于對(duì)照組（自然放牧）。

2.2 不同飼養(yǎng)方式對(duì)VFA含量的影響（見(jiàn)表4）

表4 不同飼養(yǎng)方式對(duì)阿爾巴斯白絨山羊瘤胃液VFA含量的影響(mmol/l)

表4結(jié)果表明，不同飼養(yǎng)方式對(duì)絨山羊瘤胃內(nèi)乙酸、丙酸、丁酸及TVFA濃度有顯著的影響（P＜0.05），且均以試驗(yàn)組（完全舍飼）高于對(duì)照組（完全放牧）。結(jié)果也表明，試驗(yàn)組（完全舍飼）和對(duì)照組間（完全放牧）乙酸/丙酸間差異不顯著（P=0.360），但試驗(yàn)組在數(shù)值上高于對(duì)照組。

3 討論

3.1 不同飼養(yǎng)方式對(duì)瘤胃內(nèi)氮源利用的影響

NH3-N在瘤胃液中是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的過(guò)程，其濃度在一定程度上反映了瘤胃內(nèi)含氮物質(zhì)的發(fā)酵與吸收速率，對(duì)分析蛋白質(zhì)在瘤胃內(nèi)的合成與降解的平衡上有重要意義[8]，是評(píng)價(jià)奶牛瘤胃發(fā)酵的重要指標(biāo)。瘤胃BCP是反芻動(dòng)物最重要的氮源供應(yīng)源，它可以滿足宿主40%～80%的蛋白需要量[4]，其含量能直接反應(yīng)瘤胃內(nèi)微生物的數(shù)量、生物活性及微生物蛋白合成的效率。而NH3-N濃度會(huì)影響B(tài)CP合成，最大的BCP合成效率所需NH3-N濃度為5～8 mg/100 ml[8]。不同飼養(yǎng)模式主要引起了絨山羊日糧組成即精粗比例的變化，但目前關(guān)于日糧精粗比例對(duì)絨山羊瘤胃發(fā)酵功能的影響研究報(bào)道極少且結(jié)果不盡相同。Doyle等（1988）[9]則證實(shí)隨著邊境萊斯特美利奴羔羊日糧中精料補(bǔ)充料水平的提高，NH3-N濃度線性上升。馬慧忠（2008）[1]證實(shí)隨著粗料比例的增加NH3-N濃度降低。

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，試驗(yàn)組NH3-N濃度為11.38 mg/100 ml，在報(bào)道的最佳NH3-N濃度(6.3～27.5 mg/100 ml)范圍之內(nèi)（MurpHy等，1987；Ortega等,1979）[10-11]，而對(duì)照組NH3-N濃度為2.32 mg/100 ml,不在最佳濃度范圍,且試驗(yàn)組NH3-N濃度顯著高于對(duì)照組，這與Doyle等研究結(jié)果相符,可能與舍飼提高了日糧中精料比例有關(guān)。結(jié)果也顯示，試驗(yàn)組BCP濃度顯著高于對(duì)照組，出現(xiàn)這種情況的原因可能是由于試驗(yàn)組有最適宜的NH3-N濃度，且舍飼飼喂的試驗(yàn)組日糧中蛋白質(zhì)含量高于對(duì)照組，日糧蛋白質(zhì)的降解使瘤胃內(nèi)NH3-N濃度升高到最大的微生物蛋白合成效率所需的NH3-N濃度范圍，進(jìn)而可更好地滿足瘤胃微生物合成蛋白質(zhì)的需要，所以試驗(yàn)組BCP合成量高于對(duì)照組。這一結(jié)果提示，舍飼日糧促進(jìn)了瘤胃發(fā)酵，促進(jìn)了瘤胃微生物對(duì)日糧氮源的有效利用。

3.2 不同飼養(yǎng)方式對(duì)瘤胃內(nèi)VFA濃度的影響

瘤胃內(nèi)VFA是衡量瘤胃發(fā)酵的另一個(gè)重要指標(biāo)，是反芻動(dòng)物體主要的能量來(lái)源和乳脂、體脂的合成原料[12-13]。瘤胃發(fā)酵產(chǎn)生的VFA中丙酸是葡萄糖的主要來(lái)源。飼喂粗飼料日糧的反芻動(dòng)物，丙酸可提供所需葡萄糖的80%～90%（馮仰廉，2004）[14]。本試驗(yàn)研究得出，不同飼養(yǎng)方式對(duì)絨山羊瘤胃液的乙酸、丙酸和丁酸及TVFA濃度有顯著的影響，以舍飼的試驗(yàn)組高于自然放牧的對(duì)照組（P＜0.05），這與Grubb（1975）[15]研究，當(dāng)日糧由高粗料向高精料轉(zhuǎn)變時(shí)，綿羊瘤胃液的丙酸、丁酸和總VFA濃度顯著增加(P＜0.05)結(jié)果一致，其原因可能與舍飼組的日糧中精料比例增加有關(guān)。在本試驗(yàn)條件下，對(duì)照組自然放牧，日糧全部由牧草組成，而舍飼組日糧的精料比例在育肥前期為40∶60，育肥后期為45∶55，高比例的精料可促進(jìn)瘤胃發(fā)酵，產(chǎn)生較多的VFA。試驗(yàn)結(jié)果也得出，由于舍飼飼喂的絨山羊瘤胃液乙酸與丙酸濃度都顯著增加，造成乙丙比的變化較小。

3.3 不同飼養(yǎng)方式對(duì)瘤胃液pH值的影響

瘤胃液pH值對(duì)絨山羊的瘤胃微生物活動(dòng)以及機(jī)體健康非常重要，是反應(yīng)瘤胃發(fā)酵水平的綜合指標(biāo)，通常在5.5～7.5范圍內(nèi)變動(dòng)[16]，受日糧性質(zhì)、動(dòng)物以及環(huán)境因素的影響（Smet等，1995）[17]，但根本原因是日糧組成與營(yíng)養(yǎng)成分[18-19]。施玲玲（2008）[20]研究發(fā)現(xiàn)在3∶7和2∶8兩種精粗比日糧中添加蘋果酸，可提高內(nèi)蒙古白絨山羊瘤胃液的pH值。張建勛等（2013）[2]研究得出，隨著飼糧精粗比的提高，南江黃羊體外發(fā)酵培養(yǎng)液中pH值逐漸下降。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組pH值盡管顯著低于對(duì)照組，這與Doyle等（1988）[9]得出的隨著邊境萊斯特美利奴羔羊日糧中精料補(bǔ)充料水平的提高瘤胃pH值顯著下降，和張建勛等（2013）隨著飼糧精粗比的提高，南江黃羊體外發(fā)酵培養(yǎng)液中pH值逐漸下降結(jié)果相符。這主要與日糧的組成有關(guān)，試驗(yàn)組采食的精補(bǔ)料比放牧條件下多，結(jié)果導(dǎo)致產(chǎn)生的VFA等有機(jī)酸增加，引起pH值下降，但NH3-N濃度顯著高于對(duì)照組，因此，保證了試驗(yàn)組的pH值盡管較低，但pH值保持在6.25～7.55，屬正常pH值變化范圍。說(shuō)明在本試驗(yàn)條件下，將絨山羊進(jìn)行完全舍飼，并增加精料比例，并不會(huì)導(dǎo)致瘤胃液的pH值異常降低。

可見(jiàn)，將成年阿爾巴斯白絨山羊進(jìn)行舍飼育肥，提高日糧精粗比，不會(huì)造成瘤胃pH值的大幅度下降，而且可促進(jìn)瘤胃發(fā)酵功能，有利于瘤胃BCP和VFA的生成。

4 小結(jié)

①與自然放牧相比，完全舍飼飼養(yǎng)可顯著降低阿爾巴斯白絨山羊成年母羊瘤胃液pH值（P＜0.05），但能顯著增加瘤胃液的NH3-N濃度（P＜0.05）、BCP濃度(P＜0.05)和VFA濃度，而對(duì)于乙酸/丙酸無(wú)顯著影響(P＞0.05)。

②與自然放牧相比，完全舍飼飼養(yǎng)可促進(jìn)阿爾巴斯白絨山羊成年母羊的瘤胃發(fā)酵功能。