周玉林，吳利平

(仙居縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，浙江 仙居 317300)

血漿可溶性凝血酶調(diào)節(jié)蛋白(soluble thrombomodulin，sTM)濃度是內(nèi)皮損傷的分子指標(biāo)[1]，我們報(bào)道較為常見的結(jié)締組織病干燥綜合征和硬皮病患者血漿sTM水平及其意義。

一、材料和方法

1.檢測對象 82例干燥綜合征和30例硬皮病患者均為仙居縣人民醫(yī)院住院和門診皮膚科、內(nèi)科患者，經(jīng)相關(guān)的各項(xiàng)檢查符合2002年修訂的歐洲干燥綜合征分類標(biāo)準(zhǔn)和1998年美國風(fēng)濕病學(xué)會硬皮病診斷標(biāo)準(zhǔn)。干燥綜合征患者男8例、女74例，年齡32～66歲，其中原發(fā)性49例、繼發(fā)性33例。原發(fā)性干燥綜合征按有無腎功能異常分為伴有腎損害組17例，無腎損害組32例;33例繼發(fā)性干燥綜合征中繼發(fā)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡12例、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎12例、硬皮病8例、多發(fā)性皮肌炎1例。硬皮病患者男8例、女22例，年齡22～63歲，按病變范圍分為局限性18例、系統(tǒng)性12例，按病期分類為腫脹期13例、浸潤期10例和萎縮期7例。另以26名體檢健康、各項(xiàng)檢查正常、無器質(zhì)性疾病者為對照組，年齡25～70歲。

2.樣本采集 空腹晨間采集靜脈血5 mL，先注入0.9 mL于含0.109 mol/L枸櫞酸鈉抗凝液的0.1 mL塑料試管中，輕搖，30 min內(nèi)以280×g離心3 min，分離血漿盛于2支小塑料試管中，保存于-70℃冰箱待測。余下靜脈血樣本檢查其他相關(guān)項(xiàng)目。

3.檢測方法 sTM采用雙抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)測定，試劑盒購自福建太陽生物技術(shù)有限公司，全部樣本和參考標(biāo)準(zhǔn)品均嚴(yán)格按操作說明書進(jìn)行。用美國DYNEX公司的OpSysMR酶標(biāo)儀比色，用軟件包計(jì)算機(jī)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并自動計(jì)算測定結(jié)果。

二、結(jié)果

82例干燥綜合征患者血漿sTM濃度[(38.56±10.40)μg/L]升高，與對照組[(32.73 ±7.34)μg/L]比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.88，P ＜0.01)。按病因分組，49例原發(fā)性干燥綜合征患者血漿sTM 水平[(37.57 ±8.60)μg/L)升高，33 例繼發(fā)性干燥綜合征患者血漿 sTM濃度[(40.04±11.41)μg/L]明顯升高，與對照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.47，P ＜ 0.05;t=2.89，P ＜0.01)。繼發(fā)組與原發(fā)組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.12，P ＞0.05)。

17例伴腎損害的原發(fā)性干燥綜合征患者血漿 sTM 濃度[(48.39 ±13.48)μg/L]顯著高于32例非腎損害患者[(32.77 ±9.52)μg/L，t=4.82，P＜0.01]，而非腎損害組sTM水平則與對照組水平一致。12例繼發(fā)系統(tǒng)性紅斑狼瘡者血漿sTM水平[(57.43 ±14.54)μg/L]顯著升高，12 例繼發(fā)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者血漿sTM水平[(36.12±9.45)μg/L]升高，而8例繼發(fā)硬皮病者sTM水平[(23.18 ±6.26)μg/L]則顯著降低，繼發(fā)硬皮病組與繼發(fā)系統(tǒng)性紅斑狼瘡組、繼發(fā)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=7.12，P ＜0.01;q=4.61，P ＜0.05)。

30例硬皮病患者血漿sTM濃度[(22.70±7.37)μg/L]明顯低于對照組[(32.73 ±7.34)μg/L，t=5.17，P ＜0.01]，也顯著低于 82 例干燥綜合征患者[(38.56 ± 10.40)μg/L，t=8.00，P＜0.01)]。按病變范圍分型，18例局限性硬皮病患者血漿 sTM 濃度[(26.28 ±6.87)μg/L]降低，與對照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.51，P＜0.05)。12例系統(tǒng)性硬皮病患者血漿sTM濃度[(17.68 ±6.11)μg/L]進(jìn)一步降低，低于局限性硬皮病組(t=3.64，P＜0.05)。按病期分為3個(gè)期，13例腫脹期患者血漿sTM濃度[(29.87±8.01)μg/L]比對照組水平稍低，10例浸潤期患者血漿 sTM 濃度[(21.61 ±5.14)μg/L]明顯降低，7例萎縮期患者[(11.73 ±4.08)μg/L]極度降低，后組與腫脹期和浸潤期組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=6.22，P ＜ 0.01;q=4.71，P ＜0.05)。

三、討論

原發(fā)性干燥綜合征部分患者(約為1/4)血中有抗磷脂抗體和血栓形成傾向[2]，但對高凝狀態(tài)或其相關(guān)指標(biāo)研究少。本研究檢測干燥綜合征患者血漿sTM水平，發(fā)現(xiàn)原發(fā)性增高，繼發(fā)性明顯增高，表明存在血管內(nèi)皮受損，繼發(fā)性組高于原發(fā)性組與其多系統(tǒng)病變有關(guān)。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性伴有腎損害者sTM明顯升高，與無腎損害者有差異，表明原發(fā)性血管內(nèi)皮的損傷主要見于伴腎功能異常患者，而無腎損害者的血漿sTM濃度與正常水平幾乎一致。我們認(rèn)為伴腎損害的干燥綜合征患者血漿sTM的意義與系統(tǒng)性紅斑狼瘡伴腎損傷患者一樣[3]，其既指示血管內(nèi)皮明顯損傷，又反映出疾病進(jìn)展和/或嚴(yán)重性。在繼發(fā)性組中，繼發(fā)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡和類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎者明顯升高，都與內(nèi)皮損傷有關(guān)[3-4]，而繼發(fā)于硬皮病者則顯著降低，可為臨床和基礎(chǔ)研究提供新信息。

我們通過sTM研究發(fā)現(xiàn)硬皮病患者的血漿sTM水平顯著低于對照組和干燥綜合征組，也明顯低于文獻(xiàn)中報(bào)告的其他結(jié)締組織病[4]。檢測還表明，硬皮病患者血漿sTM低濃度與病變范圍和病期有關(guān)，系統(tǒng)性硬皮病患者血漿sTM水平顯著低于局限性硬皮病;腫脹期、浸潤期和萎縮期患者血漿sTM水平依次遞降。我們認(rèn)為硬皮病低血漿sTM水平是一個(gè)很好的臨床案例，其與血管萎縮、內(nèi)皮細(xì)胞不能產(chǎn)生sTM有關(guān)。

[1]Yamakawa K，F(xiàn)ujimi S，Mohri T，et al.Treatmenteffects of recombinant human soluble thrombomodulin in patients with severe sepsis:a historical control study[J].Crit Care，2011，15(3):R123.

[2]譚立夫，邱 茜，梁柳琴，等.抗磷脂綜合征55例臨床分析[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2011，27(15):2789-2791.

[3]盧興國，沈漢超，曹越蘭.系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎損害患者血漿血栓調(diào)節(jié)蛋白的檢測及其意義[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，1999，3(2):116.

[4]蘇 敏，壽 濤，孫 虹.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者腫瘤壞死因子α和鞘磷脂酶的檢測及臨床意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27(11):890-892.