王凌飛 羅淑穎 陳永興

維生素D是兒童時(shí)期最重要的微量營(yíng)養(yǎng)素之一，大量研究證實(shí)維生素D對(duì)免疫系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)作用，通過(guò)多種機(jī)制有效地調(diào)節(jié)各種自身免疫性疾病，糾正免疫平衡紊亂[1]。兒童1型糖尿病(T1 dM)由致病性T細(xì)胞介導(dǎo)、最終導(dǎo)致分泌胰島素的β細(xì)胞嚴(yán)重受損的器官特異性自身免疫性疾病[2]。本文通過(guò)對(duì)我院2010年2月至2012年10月住院的52例T1 dM患兒血清25-OHD水平進(jìn)行檢測(cè)，初步探討維生素D代謝紊亂與兒童T1 dM發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 試驗(yàn)血樣均來(lái)自本院內(nèi)分泌遺傳代謝科就診的新發(fā)T1 dM患兒(病程＜3個(gè)月)及健康體檢的兒童。T1 dM組:52例，男29例，女23例，年齡3.5～13(8.4±1.9)歲，均符合世界衛(wèi)生組織T1 dM診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，其中36例發(fā)病時(shí)有不同程度的酮癥酸中毒，39例存在糖尿病自身抗體;對(duì)照組:43例，男25例，女18例，年齡3.9～12.8(8.1±2.1)歲，為同期健康體檢者，無(wú)糖尿病、自身免疫性疾病家族史。所有受檢者2周內(nèi)未服用維生素D及明顯影響其代謝的藥物。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 T1 dM兒童于酮癥酸中毒糾正后次日、健康對(duì)照兒童于就診當(dāng)天清晨空腹取肘靜脈血3 ml，標(biāo)本收集后立即離心(1500r/min，10 min)，分離出血清-80℃保存。

1.2.2 試劑和儀器 25羥基維生素D檢測(cè)試劑盒由北京博暉創(chuàng)新光電技術(shù)股份有限公司生產(chǎn);Multiskan Fc型酶標(biāo)儀為賽默飛世爾(上海)儀器有限公司制造。

1.2.3 血清25-OHD的測(cè)定 采用酶聯(lián)免疫法，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用組間t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

T1 dM組血清25-OHD水平(15.67±5.36)μg/L明顯低于對(duì)照組(23.56±6.72)μg/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=6.37，P＜0.01)。

3 討論

T1 dM是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的內(nèi)分泌疾病，輔助性T淋巴細(xì)胞(Th)Thl/Th2失衡在胰島炎性細(xì)胞募集、胰島β細(xì)胞損傷方面發(fā)揮重要作用[4]。當(dāng)特定自身抗原被抗原遞呈細(xì)胞處理后，導(dǎo)致自身免疫信號(hào)釋放，激活Thl細(xì)胞。Thl細(xì)胞產(chǎn)生大量IFN-γ，可增強(qiáng)抗原的提呈作用，增加胰島β細(xì)胞對(duì)浸潤(rùn)T細(xì)胞破壞的敏感性。因此Th1/Th2的平衡紊亂是T1 dM發(fā)病的主要機(jī)制[5]。

研究表明，維生素D受體(VDR)的分布非常廣泛，不僅分布在腸、骨、腎，還分布于甲狀旁腺、胰島細(xì)胞、造血干細(xì)胞、活化的淋巴細(xì)胞等，提示維生素D對(duì)機(jī)體具有廣泛的作用。維生素D對(duì)T1 dM的調(diào)節(jié)大部分基于糖尿病的流行病學(xué)及對(duì)T1 dM動(dòng)物模型所進(jìn)行的研究[6]，結(jié)果顯示，維生素D可以顯著下調(diào)IFN-γTh1細(xì)胞，對(duì)分泌IL-4的Th2細(xì)胞沒(méi)有明顯影響，從而抑制Th1/Th2的平衡向Th1偏移，糾正T1 dM的免疫失衡狀態(tài)。Boonstra等應(yīng)用T細(xì)胞克隆系的研究發(fā)現(xiàn)，維生素D不但可以抑制Th1細(xì)胞分泌IFN-γ，顯著升高Th2的IL-4分泌，而且抑制作用有選擇性，具有抗原特異性，并不是對(duì)免疫系統(tǒng)的全面抑制[7，8]。

由上可見(jiàn)，T1 dM的發(fā)生、發(fā)展與Th1/Th2平衡狀態(tài)密切相關(guān)，而維生素D對(duì)T1 dM患兒Th1/Th2的平衡有著極為重要的作用。本研究結(jié)果顯示T1 dM患兒體內(nèi)血清25-OHD水平明顯低于正常健康兒童。表明維生素D缺乏有可能通過(guò)對(duì)免疫調(diào)節(jié)的影響而促進(jìn)T1 dM發(fā)生，預(yù)示維生素D可能成為T(mén)1 dM早期預(yù)防、干預(yù)的新手段。

[1]吳革平，章如新.三種脂溶性維生素的免疫調(diào)節(jié)作用及其研究進(jìn)展.國(guó)際免疫學(xué)雜志，2008，31(2):105-108.

[2]高會(huì)敏，蒙碧輝.1型糖尿病發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展.醫(yī)學(xué)研究雜志，2009，38(1):4-7.

[3]錢(qián)榮立.關(guān)于糖尿病的新診斷標(biāo)準(zhǔn)與分型.中國(guó)糖尿病雜志，2002，8(1):5-6.

[4]Rapoport MJ，Mor A，Vardi P，et al.Decreased secretion of Th2 cytokines precedes up-regulated and delayed secretion of Th1 cytokines in activated peripheral blood mononuclear cells from patients with insulin-dependent diabetes mellitus.J Autolmmun，1998，11(6):635-642.

[5]Ryden A，Stechova K，Durilova M，et al.Switch from a dominant Th1-associated immune profile during the pre-diabetic phase in favour of a temporary increase of a Th3-associated and inflammatory immune profile at the onset of type 1 diabetes.Diabetes Metab Res Rev，2009:25(4):335-343.

[6]Mathieu C，Badenhoop K.Vitamin D and type 1 diabetes mellitus:state of the art.Trends Endocrinol Metab，2005，16(6):261-266.

[7]Boonstra A，Barrat FL，Crain C，et al.1α，25-dihydroxyvitamin D3 has a direct effect on naive CD4+T cells to enhance the development of Th2 cells.J Immunology，2001，167(9):4974-4980.

[8]Overbergh L.1α，25-dihydroxyvitamin D3 induces an autoantigenspecific T-helper 1/T-helper 2 immune shift in NOD mice immunized with GAD65(p524-543).Diabetes，2000，49(8):1301-1307.