涂小紅 黃玉婷 蔡粵川 何躍 彭順林

慢性咽炎是一種臨床常見病、多發(fā)病,是咽部黏膜、黏膜下組織及淋巴組織的慢性炎癥。屬上呼吸道感染的一部分,臨床發(fā)病率高,易反復(fù)發(fā)作。動(dòng)物模型作為人類疾病的替身在藥物療效評(píng)價(jià)上擔(dān)當(dāng)著非常重要的角色,為了使動(dòng)物模型與人類的疾病具有更高的臨床相似性,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇、模型的建立及標(biāo)本的制備就顯得格外重要。導(dǎo)師彭順林教授采用氨水和松節(jié)油復(fù)合因素塑造日本大耳白家兔慢性咽炎動(dòng)物模型的方法,符合慢性咽炎動(dòng)物模型的生物學(xué)特征,被廣泛應(yīng)用于咽炎動(dòng)物模型的制備,現(xiàn)將彭順林教授的咽炎造模法與其他慢性咽炎造模法總結(jié)如下:

1 彭順林教授關(guān)于慢性咽炎獨(dú)特的造模方法

1.1 造模方法

彭順林[2]教授選用日本大耳白家兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,隨機(jī)分組后,造模組與實(shí)驗(yàn)組第1 ～ 15 日均用2.5%氨水噴咽部,在第8 日于兔咽部粘膜下注射0.5mL 松節(jié)油。造模組于造模的第16日處死;自然恢復(fù)組第16 ～ 25 日讓其自然恢復(fù),第26日處死;治療組第16～25日咽部噴治療藥物,第26日處死;空白對(duì)照組第1～15日用蒸餾水(與造模組同體積)噴咽部,第16～25用蒸餾水噴咽部,第26日處死。

1.2 標(biāo)本的制備

將家兔股動(dòng)脈放血處死后,取咽部組織立即投入10%甲醛液內(nèi)固定,繼之經(jīng)由低到高各級(jí)酒精脫水,二甲苯透明,石蠟包埋連續(xù)切片(厚度6 üm),每10 張隨機(jī)取樣片一張,每只動(dòng)物標(biāo)本共計(jì)3 張,然后脫蠟染色,HE、常規(guī)蘇木精、伊紅染色,在光學(xué)顯微鏡下觀察。[2]

2 其他有關(guān)慢性咽炎的造模方法

關(guān)于慢性咽炎造模大多采用氨水噴咽、松節(jié)油咽部粘膜下注射的方法,在造模過程中,實(shí)驗(yàn)者根據(jù)自己的需求調(diào)整氨水的濃度,每次使用的劑量及造模時(shí)間。而實(shí)驗(yàn)組基本采用蒸餾水或生理鹽水噴咽。王潁[1]用2.5%氨水噴兔咽部1 次,每次用噴霧器噴3 撳(每撳約0.08ml);空白對(duì)照組噴3撳生理鹽水,各組均連續(xù)噴13天。造模第8天,除空白對(duì)照組外,其余各組大鼠用扁桃體注射針將松節(jié)油注射于兔咽部黏膜下,每只動(dòng)物注射0.5ml。造模第14天,兔咽部組織呈慢性充血狀態(tài),暗紅色、黏液性分泌物增多,明顯腫脹為造模成功。高瑞寧[3]組用喉頭噴霧器于動(dòng)物咽部噴15%氨水,每次噴3掀,每天上、下午各1次,連續(xù)3 d,造成急性咽炎模型?？瞻讓?duì)照組動(dòng)物噴等量蒸餾水。于第4天各組動(dòng)物按表1劑量相應(yīng)給藥,每天1次,連續(xù)3 d天。第7 d斷尾取血涂片,各組動(dòng)物取血涂片后,股動(dòng)脈放血處死動(dòng)物,立即取咽部黏膜及其下組織,進(jìn)行肉眼觀察,并10%中性福爾馬林溶液固定,進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。

3 體會(huì)與展望

本人跟隨導(dǎo)師彭順林教授坐診兩年余,診治咽炎患者上千例,其中以慢性咽炎者居多,以異物感、咽干、咽癢、咽痛、咳嗽、咳痰為主,病情易反復(fù)發(fā)作,遷延不愈。雖不危及生命,但卻不同程度影響患者的工作、學(xué)習(xí)及生活。近年來(lái),醫(yī)家對(duì)咽炎模型的實(shí)驗(yàn)研究較多,但大多都在彭氏[2]造模法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改造創(chuàng)新,彭氏造模法即用氨水在咽部噴霧和松節(jié)油在其粘膜下注射的方法研制慢性咽炎的動(dòng)物模型。氨水是堿性刺激物質(zhì),局部噴霧能刺激咽部粘膜,使之充血水腫,反復(fù)刺激能使粘膜逐漸轉(zhuǎn)化為慢性炎癥。松節(jié)油是一種油質(zhì)化學(xué)因子,在咽粘膜下注射,讓組織對(duì)其緩慢吸收,能達(dá)到對(duì)咽局部持續(xù)刺激的作用,符合人慢性咽炎的發(fā)病因素。故未來(lái)我們?cè)诼匝恃自炷７绞缴峡衫^續(xù)采用彭氏造模法,并不斷完善及創(chuàng)新,使其更符合人類發(fā)病特征。

[1] 王潁.陳皮利咽合劑對(duì)慢性咽炎模型家兔全血黏度咽黏膜的影響[J].中醫(yī)雜志2013,6(54):12.

[2] 彭順林,鐘渠,熊大經(jīng),等.慢性咽炎動(dòng)物模型研究[J].成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),1999,22(1):51.

[3] 高瑞寧.清咽噴霧劑對(duì)急性咽炎治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)研究,2009,22(1).