何寶佳，魏 蔚

(皖南醫(yī)學院 藥學院，安徽 蕪湖 241002)

紅景天系薔薇目景天科紅景天屬(RadixetRhodiolaeCrenulatae)多年生草本或亞灌木植物，莖葉嫩綠，花、根、莖之浸液均呈紅色而得名．長期以來，民間用其根莖熬水、泡酒可消除疲勞，抵御嚴寒，尤以高原藏族人民應用地域較廣、時間較長；《本草綱目》草部第20卷中注明紅景天為“草本上品”，主要功效是扶正固本、補氣養(yǎng)血、清熱潤肺．現(xiàn)代藥理學研究也證明紅景天屬植物具有抗輻射、預防高原反應、抗缺氧、抗衰老、抗腫瘤、提高記憶力等作用,近年來國內將紅景天作為強身健體的藥物逐步進行深入研究和開發(fā)，已有了多種制劑、保健品及飲料，另外對心血管系統(tǒng)還有一定影響．藥理學研究也表明它們所含的紅景天苷、紅景天素、酪醇、二苯甲基六氫比啶、草質素、巖石菜素等為其有效活性成分，而紅景天苷為其主要活性成分．本實驗對不同產(chǎn)地紅景天的提取溶劑進行研究比較，通過對紅景天苷的提取率比較，以篩選出最優(yōu)的提取溶劑，為紅景天藥材質量標準的建立及提取工藝的研究提供一定的理論依據(jù)和實驗依據(jù)．

1 材料與設備

1.1 材料

西藏大花紅景天、青海大花紅景天、西藏圣地紅景天、四川大花紅景天、臨江高山紅景天，以上均由吉林農(nóng)業(yè)大學教授鑒定為景天科紅景天屬植物紅景天．

1.2 儀器設備與試劑

ALLTECH高效液相色譜儀，色譜柱：ODS-C18(4.6mm×250mm5um)，KQ-250DB型數(shù)控超聲波清洗器；乙腈、甲醇均為色譜醇，水(杭州產(chǎn)娃哈哈純凈水1.25L裝)經(jīng)微孔濾膜濾過，紅景天苷對照品購自中國藥品生物制品檢定所．

1.3 色譜條件

流動相:甲醇:水(12:58)；檢測波長:278nm;流速:0.70ml/min;柱溫:25℃;理論板數(shù)按紅景天苷峰計算,應不低于2000．

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備

精密稱取紅景天苷對照品12.5mg于25ml容量瓶中，加甲醇超聲溶解，待冷至室溫后，定容至刻度，搖勻，即得紅景天苷對照品溶液(0.5mg.ml-1)．

2.2 樣品的處理

(1)水提.精密稱取粉碎藥材各0.5g，分別置50ml三角瓶中，分別加蒸餾水40、30、30ml，60℃下，超聲提取30min，合并提取液于100ml容量瓶中，放置室溫，蒸餾水定容至刻度，備用．

(2)醇提.精密稱取粉碎藥材各0.5g，分別置50ml三角瓶中，分別加30%、60%、90%乙醇40、30、30ml，30℃下，超聲提取30min，合并提取液于100ml容量瓶中，放置室溫，30%乙醇定容至刻度，備用．

(3)甲醇提取.精密稱取粉碎藥材各0.5g，分別置50ml三角瓶中，分別加甲醇30、20ml，30℃下，超聲提取30min，合并提取液于50ml容量瓶中，放置室溫，甲醇定容至刻度，備用．

2.3 樣品溶液的制備

水提：將已制備的水提樣品溶液轉移至已恒重的蒸發(fā)皿中，待蒸干樣品后，將其轉移至10ml容量瓶中，加少量甲醇超聲溶解，放置室溫，加甲醇定容至刻度備用．醇提：制備方法同水提．甲醇提：制備方法同水提．

2.4 方法學考察

(1)線性關系的考察.分別精密吸取對照品溶液0.2、0.4、1.0、2.0、4.0、5.0、10.0ml，于10ml容量瓶中，并加甲醇定容至刻度，搖勻，備用．按照已經(jīng)確定的色譜條件，分別進樣5μl，每樣重復進樣3次，取峰面積的平均值；以峰面積為縱坐標，紅景天苷進樣量為橫坐標，得方程為Y=2.192×106X+140359，相關系數(shù)R=0.9998，該條件下峰面積和紅景天苷量的線性關系良好，線性范圍為0.1～5μg．

(2)精密度試驗.精密吸取紅景天苷對照品溶液(0.5mg.ml-1)5μl，重復進樣5次，測定紅景天苷峰面積，得其RSD=1.37%．

(3)穩(wěn)定性試驗.精密吸取紅景天苷對照品溶5μl，每隔2h測定1次，結果表明樣品在8h內穩(wěn)定，樣品紅景天苷峰面積的RSD=1.23%(n=5)．

(4)重現(xiàn)性試驗.取四川大花紅景天樣品，按2.2中的(2)制樣方法制樣5份，依次進樣測定紅景天苷的含量，結果紅景天苷的RSD=1.33%(n=5)．

(5)回收率實驗.采取加樣回收法．取已知紅景天苷含量的四川大花紅景天粉末5份，每份約0.5g，精密稱定，分別加入紅景天苷對照品0.25mg，制備供試品溶液，計算回收率，測得紅景天苷平均回收率為97.19%，RSD=1.17%(n=5)．

2.5 含量測定與結果

圖1 紅景天苷標準品圖

圖2 紅景天樣品譜圖

在上述色譜條件下，分別進樣測定紅景天藥材中紅景天苷的含量，進樣量5μl．不同產(chǎn)地紅景天苷含量(見表1).

表1 不同提取溶劑提取紅景天苷的含量比較

2.6 結論

本試驗對不同產(chǎn)地紅景天藥材樣品進行分離，結果表明由于不同產(chǎn)地的紅景天藥材樣品成分不盡相同，因此不能對各個產(chǎn)地的樣品均達到良好的分離效果，而且出峰時間均較早，因此缺少一定的準確度和精密度；但該流動相對各個產(chǎn)地的樣品均能達到良好的分離效果，且峰形良好，也彌補了乙腈/水作為流動相使紅景天苷出峰過早的缺點．故本實驗選擇甲醇/水(18:52)作為最佳比例的流動相，同時發(fā)現(xiàn)臨江地區(qū)紅景天樣品與其他產(chǎn)地樣品比較成分更為復雜，且紅景天苷的含量相對也要低一些，因此，從藥用價值角度考慮，推薦使用四川、西藏、青海等地的紅景天藥材．另外，不同產(chǎn)地紅景天其紅景天苷提取率隨溶劑極性的減小而升高，并在60%乙醇提取下達到最高，而后呈下降趨勢，這說明60%乙醇能夠比較完全的提取紅景天苷，而與一些文獻報道的水提紅景天苷提取率最高并不一致；且黃明立等選用不同比例的甲醇-水作為提取溶劑對紅景天苷進行提取，發(fā)現(xiàn)甲醇-水(2:8)提取效果為最佳．

參考文獻：

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