趙運勝 張麗娜 李洪臣 崔辰瑩 吳 俠

原發(fā)性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是目前世界上致死率最高的惡性腫瘤之一，在全世界范圍內(nèi)的發(fā)病率有逐年上升的趨勢［1］。早期診斷PHC是治療和延長PHC患者生存期的最主要策略。血清AFP（alpha-fetoprotein）是目前檢測PHC最常用的腫瘤標志物，但其靈敏度和特異性都不夠滿意［2］。

血清蛋白GP73（serum Glogi glycoprotein 73）有望成為早期診斷PHC及預(yù)后的新標志物［3-4］。GP73是定位于高爾基體的一種Ⅱ型跨膜蛋白，分子量為73 kD，由胞內(nèi)、跨膜和胞外3個區(qū)域構(gòu)成，其N-末端為胞外段，是與其他蛋白相互作用的主要功能區(qū)。其編碼基因位于第9號染色體，全長3 042 bp。GP73主要表達于人類多種組織的上皮細胞，正常肝臟組織表達甚微，但肝細胞受到病毒感染或肝癌時明顯高表達［5-6］。早在2005年，Block等就提出，在肝癌患者血清中，GP73水平顯著升高［7］。且有文獻報道GP73檢測肝癌的敏感度可達69%，特異性可達90%［8］，但也有個別報道GP73的靈敏度和特異性與AFP相當甚至低于AFP［9-10］。

肝癌診斷的每一種血清標志物在診斷價值上可能都有其自身的價值但也都有一定的局限性。已有研究提議將GP73與其他常用腫瘤標志物聯(lián)合檢測，以提高原發(fā)性肝癌診斷的意義［11-12］，但這種聯(lián)合檢測的價值還需臨床數(shù)據(jù)的證實。因此，本文探討了GP73及其聯(lián)合AFP和CA199檢測在肝癌診斷中的意義。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取我院2011年4至9月的住院、門診和體檢人員共計130例，其中經(jīng)過病理檢驗明確的PHC患者50例（男38歲，女12歲），年齡32～81歲，平均57歲；肝炎患者20例（男11歲，女9歲），年齡36～57歲，平均48歲；肝硬化患者20例（男15歲，女5歲），年齡41～81歲，平均55歲；其他消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者20例（男14歲，女6歲），年齡47～78歲，平均69歲；健康對照者20例（男10歲，女10歲），年齡21～45歲，平均34歲。

1.2 主要儀器

CODA全自動酶標儀和羅氏2010電化學發(fā)光儀。

1.3 試劑

GP73測定試劑盒購自上海瑞奇科技有限公司；AFP和CA199測定試劑盒購自上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司。

1.4 標本采集

受檢者均采集空腹靜脈血3 mL，用促凝管采血后將分離的血清儲存于-80℃冰箱待測。

1.5 檢測方法

GP73測定采用酶聯(lián)免疫定量方法檢測，按說明書操作；AFP和CA199檢測采用羅氏電化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)。

1.6 統(tǒng)計學方法

利用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。檢測數(shù)據(jù)均為偏態(tài)分布，采用中位數(shù)（四分位數(shù)）表示，不同組別間計量資料比較采用Mann-Whitney U非參數(shù)檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗，GP73、AFP和CA199間的相關(guān)性分析采用Spearman非參數(shù)檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清GP73、AFP和CA199含量檢測結(jié)果比較

肝癌組GP73含量明顯高于其它各組（P均＜0.05），而肝硬化組和其他消化系統(tǒng)惡性腫瘤組的GP73含量也分別明顯高于對照組和肝炎組（表1，P＜0.05）。肝癌組血清中AFP含量明顯高于其他各組（P均＜0.05），而肝炎組、肝硬化組和其他消化系統(tǒng)腫瘤組血清中AFP含量分別明顯高于對照組（表1，P均＜0.05）。肝癌組CA199含量分別明顯高于其他四組（P均＜0.05），且肝炎組和肝硬化組明顯高于對照組（表1，P＜0.05）。

表1 各組血清GP73、AFP和CA199含量檢測結(jié)果比較［中位數(shù)（四分位數(shù)）］Table1 Comparison of serum GP73，AFP，and CA199 levels in every group［median（quartile）］

2.2 ROC曲線分析GP73、AFP和CA199對PHC的鑒別診斷效果

采用ROC曲線分析GP73、AFP和CA199單獨用于鑒別診斷肝癌和非肝癌的效果，曲線下面積分別為 0.824、0.668、0.732；各自 95%置信區(qū)間分別為0.735～0.912、0.564～0.773、0.641～0.824（圖l）。

通過ROC曲線分析將GP73、AFP和CA199鑒別診斷肝癌的臨界值分別設(shè)定為72.7 μg/L、108.0 μg/L、67.7 U/mL（根據(jù)靈敏度+特異性最大的原則設(shè)定）。

2.3 血清GP73、AFP和CA199單項及其聯(lián)合檢測對PHC的診斷價值

肝癌組血清GP73和AFP陽性檢出結(jié)果分別明顯高于其他各組（P＜0.05），肝癌組CA199陽性檢出結(jié)果也明顯高于肝炎組、肝硬化組和正常對照組（P＜0.05），但和其他消化系統(tǒng)腫瘤組無明顯差異（P＞0.05，表2）。

圖l GP73、AFP和CA199鑒別診斷PHC的ROC曲線分析Figure1 ROC curve analysis of GP73，AFP，and CA199 for the diagnosis of PHC

單項檢測中，GP73的靈敏度、特異性和準確率都最高。聯(lián)合檢測中，GP73/AFP/CA199平行實驗靈敏度最高，GP73+AFP+CA199系列實驗特異性最高，GP73/AFP平行實驗準確率最高（表3）。

2.4 血清GP73與AFP和CA199之間的相關(guān)性分析

GP73與AFP，GP73與CA199，AFP和CA199的相關(guān)系數(shù)分別為-0.035，0.007，0.136，P均＞0.05，三個指標之間并無相關(guān)性。

表2 各組血清GP73、AFP和CA199陽性檢出率比較Table2 Comparison of the positive rate in every group about GP73，AFP，and CA199

表3 血清GP73、AFP和CA199單項及聯(lián)檢對PHC的診斷價值比較Table3 Comparison of the diagnosis value about single and combined examination of GP73，AFP，and CA199 for PHC

3 討論

PHC治療效果取決于早期診斷。GP73是新近發(fā)現(xiàn)的PHC血清標志物之一［3-4，13］。本文結(jié)果顯示肝癌患者GP73含量明顯高于非肝癌患者，肝硬化和其他消化系統(tǒng)腫瘤患者血清中GP73含量與對照組和肝炎組相比也有所升高。之前也曾有過文獻報道隨著肝臟疾病的進展，GP73會升高［14］，肝硬化和肝癌患者中GP73水平明顯高于肝炎患者和正常人［15］。另外，將其各組的陽性檢查率做比較，發(fā)現(xiàn)肝癌組的陽性檢出率明顯高于其它各組。ROC曲線下面積分析GP73最大，單項檢測中其靈敏度和特異性也最高。因此，本文結(jié)果支持血清GP73含量對檢測肝癌的臨床意義。

本文數(shù)據(jù)表明血清中AFP含量在PHC、肝炎組，肝硬化組和其他消化系統(tǒng)腫瘤組均明顯高于對照組，文獻報道AFP在肝癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、膽道腫瘤和睪丸腫瘤等多種臨床疾病的患者血清中升高［16］，這些都說明AFP診斷PHC的特異性不夠。但本文數(shù)據(jù)也說明肝癌組AFP升高的陽性檢出率仍然明顯高于其他各組，說明AFP對于肝癌的鑒別診斷仍有臨床價值。另外，肝癌組血清中CA199含量分別明顯高于其它各組，肝癌組CA199的陽性檢出率明顯高于肝炎組、肝硬化組和對照組，而和其他消化系統(tǒng)惡性腫瘤組差異不明顯，這些說明CA199是診斷消化系統(tǒng)惡性腫瘤通用標志物之一。相應(yīng)地，GP73和其他指標聯(lián)合檢測可能提高肝癌檢出靈敏度。

本文結(jié)果表明，GP73和其它標志物聯(lián)合檢測可提高診斷PHC的靈敏度和特異性，GP73+AFP+CA199同時陽性診斷PHC的特異性達100%，可作為確診PHC的較好組合標志物。選用上述三種標志物任一陽性診斷PHC敏感度升高，GP73/AFP/CA199靈敏度達92%，可作為排除肝癌的較好的判斷方法。GP73/AFP在所有兩指標組合中靈敏度最高，診斷效果也最好。因此，在平時的臨床工作中，可以根據(jù)不同的診斷目的選擇不同的項目組合。

總體而言，本文結(jié)果表明血清GP73單獨診斷PHC的靈敏度和特異性都優(yōu)于單用AFP和CA199；其聯(lián)合AFP和CA199同步陽性檢測可提高對PHC診斷的可靠性。

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