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        四種中草藥對(duì)小鼠抗炎作用比較研究

        2013-01-01 00:00:00李淑紅,王京仁,成鋼,王興平
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2013年4期

        摘要:為了研究蒲公英(Dandelion)、敗醬草(Patrinia)、魚(yú)腥草(Houttuynia)、車前草(Plantain)4種中草藥的抗炎效果,采用水煎法制成中藥原液,將小白鼠用二甲苯致炎,作動(dòng)物病理模型進(jìn)行試驗(yàn),用血液分析儀VS2000對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分析。結(jié)果表明,小鼠耳腫脹率,試驗(yàn)1組與試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05),其他各組間差異不顯著;在消炎效果方面,蒲公英較好,魚(yú)腥草和敗醬草次之,車前草較差;在白細(xì)胞總數(shù)方面,試驗(yàn)1組與試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05);試驗(yàn)2組與試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05);試驗(yàn)3組與試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05);試驗(yàn)4組與試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05)。

        關(guān)鍵詞: 蒲公英(Dandelion);敗醬草(Patrinia);魚(yú)腥草(Houttuynia);車前草(Plantain);抗炎作用;小白鼠

        中圖分類號(hào):S853.9 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2013)04-0892-03

        Comparative Study of Anti-inflammatory Effects of Four Chinese Herbals in Mice

        LI Shu-hong,WANG Jin-ren,CHENG Gang,WANG Xin-ping

        (Department of Life Science, Hunan University of Arts and Science, Changde 415000, Hunan, China)

        Abstract: The anti-inflammatory effects of Dandelion, Patrinia, Houttuynia, Plantain, were studied by using dymethylbenzene-induced inflammatory mice through the analysis of leukocyte by VS2000 analyzer. The Chinese medical liquids were decoction. The results showed that the ear swelling rate between the test group 1 and group 2, group 3, group 5, was significantly different(P<0.05), while there was no significant difference in other groups. The anti-inflammatory effect of Dandelion was the best, and successively Houttuynia, Patrinia, and Plantain. There was significant difference in total white blood cell between each two groups expect of group 1 and group 4(P<0.05).

        Key words: Dandelion; Patrinia; Houttuynia; Plantain; anti-inflammatory effect; mice

        蒲公英(Dandelion),別名黃花苗、婆婆丁、黃花地丁等,為菊科蒲公英屬 (Taraxacum)多年生草本植物的帶根全草,《中華人民共和國(guó)藥典》 (2005年)記載其具有清熱解毒、消腫散結(jié)、利尿通淋等功效[1]。敗醬草(Herba Patriniae)屬敗醬科(Valerianaceae)多年生草本植物,《中國(guó)藥典》(1995年版)規(guī)定敗醬草的原植物為黃花敗醬(Patriniae scabiosaefolia Fisch)或白花敗醬(Patriniae villosa)干燥全草。敗醬為較常用中藥,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,其辛散苦泄,性寒清鮮,善療癰癥,兼有明目祛癖,解毒良補(bǔ)之效[2]。車前草(Plantagomajor L.)又名車前、車輪菜、豬耳草、錢串草等,為車前科植物大車前的干燥全草,多年生草本植物,生于田野、畦畔、山埔、路旁、屋旁荒地[3]。魚(yú)腥草(Houttuynia)為三白草科蕺菜屬植物蕺菜(Houttuynia cordata Thunb)的全草,因其莖葉搓碎后有魚(yú)腥味,故名魚(yú)腥草[4]。魚(yú)腥草,性味辛、寒,具有清熱解毒、消腫排膿、利尿通淋的功效,有抗菌、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫、抗炎等作用[5]。

        為進(jìn)一步了解敗醬草、魚(yú)腥草、車前草、蒲公英四種中草藥對(duì)動(dòng)物的抗炎效果,本研究以小白鼠為試驗(yàn)動(dòng)物,比較4種中草藥抗炎作用效果,為獸醫(yī)臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 藥物 蒲公英、白花敗醬草、魚(yú)腥草采自湖南文理學(xué)院生物園,車前草采自常德市屈原公園,將其洗凈,曬干備用。

        1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 試驗(yàn)動(dòng)物為昆明系小白鼠,雌雄各半,體重(20±4)g。

        1.1.3 儀器 血液分析儀VS2000(北京中檢維康技術(shù)有限公司)、高速萬(wàn)能粉碎機(jī)(天津市泰斯特儀器有限公司)、電子萬(wàn)用爐(天津市泰斯特儀器有限公司)、電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。

        1.2 方法

        1.2.1 藥物制備 4種試驗(yàn)藥物的劑型均為水煎劑。將曬干的4種中草藥用高速萬(wàn)能粉碎機(jī)粉碎成粉末后,用電子天平準(zhǔn)確稱取蒲公英、敗醬草、魚(yú)腥草、車前草粉末50.0 g,加蒸餾水500 mL,浸泡30 min,加熱至沸后文火60 min,濾渣。再加200 mL蒸餾水,加熱煮沸后文火30 min,濾渣,將兩次藥液混合,3 000 r/min離心20 min,加熱濃縮至50 mL,即每毫升含1 g生藥的濃度。做好標(biāo)記,高壓滅菌15 min,置于4 ℃冰箱中備用。

        1.2.2 中藥制劑對(duì)小鼠耳廓腫脹及白細(xì)胞的影響 選用生長(zhǎng)發(fā)育健康小鼠60只,隨機(jī)分為試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組并對(duì)每一組小白鼠進(jìn)行標(biāo)記,每組12只,分籠飼養(yǎng);其中試驗(yàn)1組為對(duì)照組即生理鹽水,試驗(yàn)2組中藥為敗醬草,試驗(yàn)3組中藥為魚(yú)腥草,試驗(yàn)4組中藥為車前草,試驗(yàn)5組中藥為蒲公英。分別腹腔注射生理鹽水或試驗(yàn)藥物,第一天按1.5 g/kg給藥,以后每天按0.5 g/kg給藥,第五天給藥30 min后,于每只小鼠左耳兩面滴加0.05 mL二甲苯致炎,右耳作對(duì)照,致炎20 min后固定小鼠,每組6只剪下兩耳,在兩耳相同部位用7 mm打孔器打下圓耳片,于天平精確稱量。計(jì)算小鼠耳腫脹率。

        鼠耳腫脹率=(左耳重量-右耳重量)/右耳重量×100%

        每組另6只摘取眼球采取血樣,用血液分析儀VS2000檢測(cè)白細(xì)胞數(shù)量。

        1.3 統(tǒng)計(jì)分析

        數(shù)據(jù)處理采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件One-way ANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,統(tǒng)計(jì)結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 4種中草藥對(duì)小鼠耳腫脹率及血液白細(xì)胞總數(shù)的影響

        用稱重法觀察4種中草藥對(duì)小鼠耳腫脹率影響,用血液分析儀VS2000對(duì)血液白細(xì)胞總數(shù)進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)表1。由表1可知,在小鼠耳腫脹率方面,試驗(yàn)1組與試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05)。白細(xì)胞總數(shù)各組間方差統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果,試驗(yàn)1組與試驗(yàn)2組、試驗(yàn)3組、試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05),試驗(yàn)2組與試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05),試驗(yàn)3組與試驗(yàn)4組、試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05),試驗(yàn)4組與試驗(yàn)5組存在顯著差異(P<0.05)。

        2.2 4種中草藥對(duì)小鼠耳腫脹消腫消炎作用結(jié)果

        由圖1可知,在四種中草藥中,試驗(yàn)5組即對(duì)小鼠的消炎作用較好,試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組對(duì)小鼠的消炎作用次之,試驗(yàn)4組的作用較弱,與試驗(yàn)1組相比4個(gè)中草藥組對(duì)小鼠耳腫脹都有不同程度地消腫消炎作用。

        2.3 4種中草藥對(duì)小鼠血液白細(xì)胞總數(shù)作用結(jié)果

        由圖2可知,試驗(yàn)5組對(duì)血液白細(xì)胞總數(shù)增加作用明顯,試驗(yàn)2組和試驗(yàn)3組對(duì)小鼠血液白細(xì)胞總數(shù)增加作用次之,試驗(yàn)4組對(duì)血液白細(xì)胞總數(shù)增加作用不明顯。各中草藥組與試驗(yàn)1組相比對(duì)小鼠血液白細(xì)胞總數(shù)均有不同度的增加作用。

        3 討論

        3.1 4種中草藥消炎消腫作用分析

        從試驗(yàn)可以看出,敗醬草、蒲公英、車前草、魚(yú)腥草對(duì)動(dòng)物病理模型都具有一定的消炎作用。其中,蒲公英消炎效果最強(qiáng),顯著降低小鼠耳腫脹程度,敗醬草和魚(yú)腥草對(duì)小鼠的消炎作用次之,與生理鹽水組比較差異顯著(P<0.05);車前草的作用較弱與生理鹽水組相比差異不顯著(P>0.05)。消炎效果依次為:蒲公英>魚(yú)腥草>敗醬草>車前草。從該試驗(yàn)的結(jié)果和文獻(xiàn)記載來(lái)看,蒲公英抗炎作用最強(qiáng),蒲公英可用來(lái)治療畜病,尤其是治療家畜乳房炎效果較好[6]。

        3.2 4種中草藥對(duì)血液白細(xì)胞影響分析

        4種中草藥均能增加小鼠血液中白細(xì)胞總數(shù),其中蒲公英作用最明顯,并與其他各組間存在顯著差異(P<0.05);敗醬草作用較明顯,并與其他各組間存在顯著差異(P<0.05);魚(yú)腥草作用次之,并與蒲公英組和車前草組存在顯著差異(P<0.05);車前草作用較差,與蒲公英組存在顯著差異(P<0.05)。白細(xì)胞具有吞噬異物并產(chǎn)生抗體的作用,正常動(dòng)物體內(nèi)白細(xì)胞總數(shù)和分類白細(xì)胞的百分比是相對(duì)穩(wěn)定的,機(jī)體發(fā)生炎癥或其他疾病時(shí)都可引起白細(xì)胞總數(shù)及各種白細(xì)胞的百分比發(fā)生變化,白細(xì)胞總數(shù)在一定范圍內(nèi)增加對(duì)機(jī)體抗炎作用增強(qiáng)有促進(jìn)作用[7]。

        3.3 影響4種中草藥作用原因分析

        敗醬草、蒲公英、車前草、魚(yú)腥草的成分復(fù)雜,不同的提取方法都會(huì)影響其活性成分、純度及濃度,從而影響其抗炎效果。該試驗(yàn)采用水煎法提取藥物活性成分,易受藥物炮制時(shí)間、煎制火候、煎制時(shí)間及次數(shù)、高壓滅菌環(huán)境等因素影響,其結(jié)果可能會(huì)造成敗醬草、蒲公英、車前草、魚(yú)腥草活性成分析出不全和有效成分流失,對(duì)試驗(yàn)結(jié)果有一定的影響,所以研究中草藥的炮制方法、科學(xué)的提取工藝,將為中草藥制劑的研制開(kāi)發(fā)及臨床應(yīng)用起重要作用。另外在試驗(yàn)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)敗醬草和魚(yú)腥草2個(gè)試驗(yàn)組有個(gè)別小白鼠出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。蒲公英和車前草組未見(jiàn)異常,說(shuō)明敗醬草和魚(yú)腥草對(duì)小白鼠可能具有一定的毒副作用,也可能是由其他環(huán)境因素或自身因素所致,其原因有待于進(jìn)一步試驗(yàn)研究 。

        中草藥為天然綠色植物,毒副作用小,無(wú)殘留污染,符合國(guó)際獸醫(yī)學(xué)發(fā)展趨勢(shì)[8]。該試驗(yàn)選敗醬草、蒲公英、車前草、魚(yú)腥草4種中草藥,用小白鼠為炎癥試驗(yàn)?zāi)P?,證實(shí)了以上四種中草藥的抗炎作用,可為獸醫(yī)臨床治療炎癥性疾病提供一些理論依據(jù),但其抗炎作用的原理、毒副作用及各中草藥藥物抗炎成分的藥理活性等還有待進(jìn)一步研究。

        參考文獻(xiàn):

        [1] 陳福星,陳文英,郝艷霜.蒲公英多糖對(duì)小鼠免疫器官的影響[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2008,29(4):10-12.

        [2] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典(上冊(cè))[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1986.

        [3] 國(guó)家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會(huì).中華本草[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1999.

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        [5] 曹郡雙,秦榮和.魚(yú)腥草的藥理作用及臨床應(yīng)用[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2001,10(6):572-574.

        [6] 楊 蕾,葛國(guó)君,王曉麗,等.中草藥防治奶牛乳房炎研究進(jìn)展[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(6):346-348.

        [7] 楊秀平.動(dòng)物生理學(xué)[M].北京:高等教育出版社,2002.

        [8] 高桂生,郝玉蘭,李正本,等.中草藥免疫增效劑對(duì)雞白細(xì)胞吞噬能力的影響[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī),2007,34(7):148-149.

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