摘要:以木蘭科木蘭屬新種紅花玉蘭為材料,研究了不同培養(yǎng)基和激素配比對不同外植體愈傷組織誘導的影響。篩選結果表明:MS為誘導愈傷組織的最適培養(yǎng)基;休眠芽的成活率高,玻璃化率低,為愈傷組織的最佳外植體;誘導休眠芽產生愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為MS +0.5 mg/L BAP(芐氨基嘌呤)+ 0.5 mg/L NAA(α-萘乙酸)。
關鍵詞:紅花玉蘭;愈傷組織;誘導;培養(yǎng)基
中圖分類號:S685.150.4+3文獻標識號:A文章編號:1001-4942(2013)02-0057-02
紅花玉蘭(Magnolia wufengensis)是2006年發(fā)表的木蘭科木蘭屬新種[1],又稱辛夷、木筆、木蘭,其花瓣比一般玉蘭花瓣多,花冠碩大,花色艷麗,極具觀賞價值,是園林綠化的優(yōu)良觀花樹種,具有很高的經濟價值[2]。目前,紅花玉蘭常用的繁殖方法為種子繁殖和嫁接繁殖,兩種方法的育苗期長,管理要求嚴格,速度較慢,不能滿足大規(guī)模生產和推廣。因此,采用離體培養(yǎng)技術進行快速繁殖具有重要的理論和實踐意義[3,4]。本研究通過組織培養(yǎng)技術建立紅花玉蘭離體培養(yǎng)和植株再生體系,旨在為紅花玉蘭的快速繁殖提供理論依據。
1材料與方法
1.1植物材料及前處理
休眠芽、長有兩片幼葉的幼芽和成熟葉片均采自青島農業(yè)大學校園內的紅花玉蘭樹,用自來水沖洗10 min后,再用無菌水沖洗3次,然后放入75%的酒精中漂洗30 min,用無菌水沖洗3次后,再用0.1%HgCl2浸泡(休眠芽浸泡15 min,幼芽和葉片浸泡6 min),最后用無菌水沖洗3次。
1.2試驗方法
1.2.1不同培養(yǎng)基對休眠芽愈傷組織誘導的影響以MS、B5為基本培養(yǎng)基,添加不同濃度的細胞分裂素(BAP)和生長素(NAA)[5,6],每種激素有3個濃度水平,兩種基本培養(yǎng)基和不同濃度的兩種激素兩兩組合,得到18種不同組合的培養(yǎng)基,如表1所示。
1.2.2不同培養(yǎng)基對幼芽和葉片愈傷組織誘導的影響以MS、N6為基本培養(yǎng)基,設置4個組合進行對比試驗。組合1:MS + 2.0 mg/L BAP +0.2 mg/L NAA;組合2:MS + 1.0 mg/L BAP + 0.2 mg/L NAA;組合3:MS + 1.5 mg/L BAP +0.1 mg/L NAA;組合4:N6 + 2.0 mg/L BAP +0.2 mg/L NAA。2結果與分析
2.1不同培養(yǎng)基對休眠芽愈傷組織誘導的影響
將紅花玉蘭休眠芽接種到含不同激素配比的MS和B5培養(yǎng)基中,30 d時的統(tǒng)計結果(表2)表明,紅花玉蘭休眠芽在組合2和組合15上的誘導率和生長量最高,分別為100%和 87.5%,但組合15的玻璃化率較高,因此,組合2即MS+0.5 mg/L BAP+0.05 mg/L NAA為最佳培養(yǎng)基。