張俊杰，馮莉

（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830052）

孔雀魚（Poecilia reticulata），隸屬鳉形目（Cyprinodontiformes），花鳉科（Poeciliidae），胎鳉屬（Poecilia），屬于小型熱帶觀賞魚，卵胎生，該魚色彩豐富，性情溫和，體質(zhì)健壯，對水質(zhì)適應(yīng)能力強，容易繁殖，價格便宜，且具有很高的觀賞價值，雜食性，較耐低氧，可以與其他小型熱帶觀賞魚和平共處，成為觀賞魚市場長盛不衰的寵兒，深受廣大觀賞魚愛好者的喜愛[1]。但孔雀魚在養(yǎng)殖管理過程中也很容易發(fā)生疾病，需要使用相應(yīng)的藥物進(jìn)行治療。

孔雀魚作為一種觀賞魚，其疾病防治所用藥物除了參考主要水產(chǎn)藥物使用方法外，還要考慮這些藥物對孔雀魚的毒性。雖然已有關(guān)于青霉素、慶大霉素、二溴海因、三氯異氰尿酸、高錳酸鉀、孔雀石綠、亞甲基藍(lán)、溴氰菊酯、二氧化氯、甲醛、環(huán)丙沙星、恩諾沙星和諾氟沙星等藥物對孔雀魚的急性毒性試驗研究報道[2-6]，但還有很多常用漁藥如漂白粉等對孔雀魚急性毒性試驗的研究還未見報道。漂白粉是水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中廣泛使用的含氯消毒劑，含有效氯30%左右，遇水后生成次氯酸，有很強的殺菌作用，可用于清塘、池水消毒和防治魚病等，在魚病防治中具有價格低廉、使用方便、效果好等特點[7-8]。但由于漂白粉具有很強的腐蝕性，使用不當(dāng)對人體和養(yǎng)殖對象會產(chǎn)生一定的毒副作用，所以在使用時必須注意合適的濃度和操作方法。

現(xiàn)進(jìn)行了漂白粉對孔雀魚幼魚的急性毒性試驗，并計算出漂白粉對孔雀魚幼魚的半致死濃度和安全濃度，旨在尋找漂白粉在孔雀魚養(yǎng)殖過程中的安全用藥范圍，為觀賞魚養(yǎng)殖過程中魚病防治工作提供依據(jù)和參考，促進(jìn)觀賞魚產(chǎn)業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗藥物

試驗所用漂白粉由天津市福晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，有效氯含量為28%～32%。

1.2 試驗孔雀魚及環(huán)境

試驗用孔雀魚幼魚，購自烏魯木齊華凌魚市場的種魚繁殖出的幼魚，挑選健康、無病、無外傷的孔雀魚幼魚，在水族箱中飼養(yǎng)10～15 d，已經(jīng)完全適應(yīng)實驗室環(huán)境。飼養(yǎng)用水為曝氣自來水，用充氣泵充氧，水溫 24～26 ℃，每天換水 1 次，投餌 2 次。試驗用水為曝氣1 d 的自來水，水溫25 ℃，pH 值 7.0 左右。試驗容器為2.5 L 塑料瓶。

1.3 試驗方法

1.3.1 預(yù)備試驗 根據(jù)漂白粉通常的水體消毒濃度，并結(jié)合漂白粉對其他魚的急性毒性試驗結(jié)果[8-10]，確定預(yù)試驗的最低和最高濃度，然后采用常溫靜水試驗法從低濃度到高濃度進(jìn)行24 h 預(yù)備試驗。將試驗藥物先配成母液，后稀釋成所需濃度。所設(shè)漂白粉預(yù)試驗濃度分別為8 000，2 000，500，350，64，8，1 g/m3，找出 24 h 內(nèi)幼魚的病死率為 0～100%的濃度范圍。

1.3.2 正式試驗 根據(jù)預(yù)備試驗結(jié)果確定試驗濃度范圍，按改良寇氏法（Karber）設(shè)計分組，藥物試驗共設(shè)6 個等對數(shù)間距梯度和一個空白對照組，每個梯度設(shè)3 個平行組（見表1）。試驗在室內(nèi)常溫條件下進(jìn)行，每個瓶子先加水，再加入藥液，然后隨機取5 尾魚苗按低濃度到高濃度逐瓶放入。試驗開始后，前8 h 連續(xù)觀察并作詳細(xì)記錄，然后記錄24，48，96 h 魚苗存活情況。

表1 孔雀魚幼魚在不同濃度漂白粉溶液中的病死率、半致死濃度和安全濃度

1.3.3 孔雀魚死亡的判斷 魚中毒死亡的標(biāo)準(zhǔn)是魚體色發(fā)白，身體蜷曲。

1.3.4 半數(shù)致死濃度（LC50）和安全濃度（SC）的計算用改良karber 法求出 24、48、96 h 的半致死濃度[11]，計算公式如下：

式中：Xm為最大劑量的對數(shù)值，i 為相鄰劑量比值的對數(shù)；∑p 為各組病死率的總和（以小數(shù)表示），%；pm為最大劑量組的病死率，%；pn為最小劑量組的病死率，%。

根據(jù)以下公式計算SC：

2 結(jié)果與分析

2.1 漂白粉對孔雀魚幼魚的急性毒性預(yù)備試驗結(jié)果及中毒癥狀

根據(jù)常溫靜水試驗法從低濃度（1 g/m3）到高濃度（8 000 g/m3）進(jìn)行的24 h 預(yù)備試驗，得到漂白粉導(dǎo)致孔雀魚幼魚病死率為0～100%的濃度為8～64 g/m3。

試驗過程中，發(fā)現(xiàn)孔雀魚幼魚在高濃度漂白粉溶液中的中毒表現(xiàn)主要是：魚體失去平衡，出現(xiàn)側(cè)游、旋轉(zhuǎn)游動等現(xiàn)象，有的逐漸沉至水底，狂游亂竄，偶有穩(wěn)定下來的，隨即又呈失衡狀態(tài)。慢慢地，中毒孔雀魚幼魚游動減慢，隨著染毒時間延長，有幾尾試驗魚浮到水面，出現(xiàn)強烈的急躁和狂游不安的狀態(tài)直至死亡。低濃度組試驗魚出現(xiàn)中毒癥狀時間較晚且輕，僅出現(xiàn)短時亂竄、失衡現(xiàn)象，隨后恢復(fù)正常活動。

2.2 漂白粉對孔雀魚幼魚的LD50 和SC

按改良寇氏法設(shè)計分組，共設(shè)計6 個等對數(shù)間距梯度藥物濃度進(jìn)行急性毒性正式試驗，觀察和記錄孔雀魚幼魚24，48 和96 h 的死亡情況，試驗結(jié)果如表1 所示。由表1 可知，漂白粉對孔雀魚幼魚的 24，48 和 96 h LD50均為 17.8 g/m3；SC 為5.34 g/m3。

3 討論

3.1 漂白粉對孔雀魚幼魚的毒性

孔雀魚幼魚在放入試驗所設(shè)不同濃度的漂白粉藥液后，開始的時候魚體應(yīng)激反應(yīng)都不明顯，但過0.5 h 后，在高濃度組的孔雀魚反應(yīng)激烈，出現(xiàn)側(cè)游、旋轉(zhuǎn)游動等現(xiàn)象，有的逐漸沉至水底，狂游亂竄，偶有穩(wěn)定下來的，隨即又呈失衡狀態(tài)，直至死亡。檢查死魚，可見體表和鰓部黏液多，魚體色變淺。孔雀魚幼魚在漂白粉溶液中的中毒現(xiàn)象究竟是神經(jīng)中毒還是體液中毒，還有待于進(jìn)一步研究。

3.2 漂白粉對孔雀魚幼魚的SC 與生產(chǎn)使用

不同水產(chǎn)動物對水中漂白粉濃度耐受程度并不相同，如史氏鱘對漂白粉較為敏感，SC 僅為0.5 g/m3[9]；而對背角無齒蚌的毒性很弱，SC 高達(dá)340.19 g/m3[10]。該試驗結(jié)果表明，漂白粉對孔雀魚幼 魚 的 24，48，96 h LD50均 為 17.8 g/m3，SC 為5.34 g/m3。SC 高于漂白粉在生產(chǎn)中常用的潑灑消毒濃度（1.0～1.5 g/m3），但是低于其常用的浸浴消毒濃度（10～20 g/m3）[7]。所以漂白粉在孔雀魚養(yǎng)殖生產(chǎn)和病害防治中應(yīng)謹(jǐn)慎使用。