摘要：沸水煮提貴州產(chǎn)天冬中的多糖成分并提純；測定其對·Ｏ２－和·ＯＨ的清除作用。結(jié)果顯示貴州產(chǎn)天冬中多糖的提取率為１３．００％；一定劑量的天冬多糖在體外對·Ｏ２－和·ＯＨ具有顯著的清除作用（Ｐ＜０．０５）。

關(guān)鍵詞：天冬；多糖；提?。豢寡趸?/p>

中圖分類號：Ｒ２８４．２；Ｏ６３６．１ 文獻標(biāo)識碼：Ａ 文章編號：0439－８114（２０12）07－1436-02

Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｒａｄｉｘ Ａｓｐａｒａｇｉ ａｎｄ Ｉｔｓ

Ａｎｄｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ Ａｃｔｉｖｉｔｙ

ＬＩ Ｙａｎ－ｊｕ１，ＬＩ Ｑｉｎ－ｓｈａｎ２，ＴＩＡＮ Ｓｈｕｏ２，ＬＩＵ Ｙａｎｇ３

（１． Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ Ｂｌｏｏｄ Ｆａｍｉｌｙ， Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｇｕｉｙａｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｇｕｉｙａｎｇ ５５０００４，Ｃｈｉｎａ；

２． Ｔｅａｃｈｉｎｇ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｐｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｏｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １００７３０，Ｃｈｉｎａ；

３． Ｔｈｅ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Lｉｆｅ Sｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｂｉｏ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００２２，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｂｏｉｌｉｎｇ ｗａｔｅｒ ｍｅｔｈｏｄ ｆｒｏｍ Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｒａｄｉｘ Ａｓｐａｒａｇｉ． Ｔｈｅ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ａｓｐａｒａｇｉ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｏｎ ·Ｏ２－ ａｎｄ ·ＯＨ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ． Ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ａｓｐａｒａｇｉ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｗａｓ １３．００％． Ａｎｄ ｔｈｅ ·Ｏ２－ ａｎｄ ·ＯＨ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｒａｄｉｘ Ａｓｐａｒａｇｉ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ａｔ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ｄｏｓｅ ｗere ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ（Ｐ＜０．０５）．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｒａｄｉｘ Ａｓｐａｒａｇｉ； ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ； extraction； ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ；

天冬（Ｒａｄｉｘ Ａｓｐａｒａｇｉ）為百合科植物天門冬（Ａｓｐａｒａｇｕｓ ｃｏｃｈｉｎｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｍｅｒｒ．）的干燥塊根［１］。國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)天冬含有豐富的多糖和寡糖，具有類激素、抗氧化、增強免疫力、抗炎、抗腫瘤等多種作用［２－７］，本試驗以貴州產(chǎn)天冬為研究對象，提取和純化其中的多糖，并對其體外抗氧化活性進行初步探討，為天冬的開發(fā)利用提供參考。

１ 材料與方法

１．１ 儀器和試劑

中藥天冬購于貴州鳳崗，３，５－二羥基甲苯購自中國藥品生物制品鑒定所，其余試劑均為國產(chǎn)分析純。

１．２ 試驗方法

１．２．１ 天冬多糖的提取與純化［８］ 稱取干燥的貴州天冬粉末１２０ ｇ，加蒸餾水２ ０００ ｍＬ，沸水煮提６ ｈ，過濾，殘渣再加蒸餾水1 ５００ ｍＬ，煮提４ ｈ。合并兩次提取液，濃縮至約２００ ｍＬ，加體積分數(shù)９５％的乙醇使含醇量達到８０％，沉淀多糖，靜置過夜。傾出上清液，抽濾，用６０ ｍＬ體積分數(shù)８０％的乙醇洗滌３次得粗多糖。將粗多糖加熱溶于1 ０００ ｍＬ水中，用２００ ｍＬ氯仿－正丁醇（體積比為４∶１）萃?。创?，除去氯仿層。母液加熱濃縮至２００ ｍＬ，加體積分數(shù)９５％的乙醇使含醇量達８０％，靜置過夜、抽濾、沉淀，依次用體積分數(shù)９５％的乙醇、無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，８０ ℃干燥４ ｈ，得精制天冬多糖，以上方法制備天冬多糖樣品６份，產(chǎn)品稱重后計算其得率。

１．２．３ 天冬多糖抗氧化能力的測定

１）·Ｏ２－清除率的測定［９］。９ ｍＬ的ＰＢＳ ５０ ｍｍｏＬ／Ｌ（ｐＨ ８．３４）、聯(lián)苯三酚０．２ ｍｍｏＬ／Ｌ，反應(yīng)溫度為２５ ℃，分別加入０．２、０．４、０．８ ｇ天冬多糖提取物，以不加多糖提取物的處理作對照，以ｐＨ ８．３４的ＰＢＳ作為參比，測定反應(yīng)啟動后１０ ｓ的Ａ３２２ ｎｍ。清除率按下式計算：

·Ｏ２－清除率＝（Ａ０－Ａ１）÷Ａ０×１００％

式中，Ａ０和Ａ１分別表示對照和添加多糖處理的Ａ３２２ ｎｍ。

２）·ＯＨ清除率的測定［１０］。鄰二氮菲０．７５ ｍｍｏｌ／Ｌ、ＦｅＳＯ４ ９．７５ ｍｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ ７．３４的ＰＢＳ １５０ μｍｏｌ／Ｌ，加入質(zhì)量分數(shù)０．０１％的Ｈ２Ｏ２，３７ ℃保溫６０ ｍｉｎ，加入０．４０ ｇ提取的天冬多糖，總反應(yīng)體系為１０ ｍＬ。以未添加Ｈ２Ｏ２和天冬多糖的處理為陰性對照，以只添加Ｈ２Ｏ２的處理為空白對照，以同濃度多糖作參比，測定Ａ５３６ ｎｍ。

·ＯＨ清除率＝（Ａ２－Ａ０）／Ａ０×１００％

式中，Ａ０、Ａ２分別表示對照和添加多糖處理的Ａ５３６ ｎｍ。

天冬多糖抗氧化能力試驗中每項處理均設(shè)置６個重復(fù)，試驗結(jié)果均以ｘ±ｓ表示，并進行差異顯著性分析。

２ 結(jié)果與分析

２．１ 沸水煮提法提取天冬中多糖的得率

按照１．2．１的方法提取天冬多糖，平均每１２０ ｇ干燥的天冬粉末中可提取得到１５．６ ｇ精制天冬多糖，得率為１３．００％，ＲＳＤ＝１．３６％。

２．２ 天冬多糖的抗氧化能力

２．２．１ 天冬多糖對·Ｏ２－的清除作用 加入多糖后，反應(yīng)體系的Ａ３２２ ｎｍ降低，表明天冬多糖對·Ｏ２－具有清除作用（表１）。在試驗濃度范圍內(nèi)，溶液的Ａ３２２ ｎｍ隨天冬多糖添加量的增加而下降，當(dāng)天冬多糖添加量為０．４ ｇ或０．８ ｇ時，反應(yīng)體系的Ａ３２２ ｎｍ與不加多糖的空白對照相比有顯著差異（Ｐ＜０．０５），·Ｏ２－清除率分別高達１９．３２％和３１．２４％。

２．２．２ 天冬多糖對·ＯＨ的清除作用 在本試驗條件下，由Ａ５36 ｎｍ的測定值判斷天冬多糖對·ＯＨ的清除作用（表２），與陰性對照相比，只添加Ｈ２Ｏ２的處理Ａ５36ｎｍ顯著升高（P＜０．０５），而同時添加了Ｈ２Ｏ２和天冬多糖的處理Ａ５36 ｎｍ沒有顯著變化，表明天冬多糖對·ＯＨ有顯著的清除能力，清除率高達５６．３８％。

３ 討論

隨著自由基研究的不斷深入，氧自由基造成的組織損傷已為人們所關(guān)注。它能破壞脂類、細胞膜、核酸及染色體，影響蛋白質(zhì)性質(zhì)及酶的活性［１１－１３］。試驗證明當(dāng)機體內(nèi)·Ｏ２－及·ＯＨ過多時，會產(chǎn)生大量脂質(zhì)過氧化物（ＬＰＯ），損傷細胞膜，引起高血脂、冠心病、加速衰老等［１４－１８］。天冬為傳統(tǒng)中藥之一，在中國資源豐富，且具有多種潛在的藥用價值，具有抗菌，抗腫瘤等生物活性。前人報道，中藥天冬中含粘液質(zhì)、寡糖等成分［１９，２０］。本試驗從貴州產(chǎn)天冬中提取多糖的得率為１３．００％，且體外試驗表明，達到一定劑量的天冬多糖對·Ｏ２－和·ＯＨ具有明顯的清除作用，從而推測天冬多糖在防治心血管疾病、抗衰老、防輻射等方面的作用可能與其能清除·Ｏ２－、·ＯＨ有關(guān)，本試驗可為貴州產(chǎn)天冬的開發(fā)與應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

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